含有以HpαR为有效成份的肺癌诊断用标记制造技术

本发明专利技术涉及一种含有以HpαR为有效成份的肺癌诊断用标记。本发明专利技术的肺癌诊断用标记及利用其抗体的肺癌诊断试剂盒使用比较容易采集的血液作为检体，因此与以活检为对象的现有的肺癌诊断方法不同，不仅不会给患者任何负担，能够非常简便地对肺癌进行诊断，而且诊断的敏感度及筛选度高，从而非常有助于肺癌的早期诊断。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种含有以Hp a R为有效成份的肺癌诊断用标记及利用该标记对肺癌进行诊断的方法。
技术介绍
随着吸烟人口的增加和大气污染等原因，在我们国家肺癌也是一种急剧增加的肿瘤疾病。据统计局最近调查，其发生频率在男性中排在胃癌之后居第2位，在女性中排在子宫癌、胃癌、肝癌、大肠癌之后居第5位，其死亡率无论男女均居癌症死亡率的第I位。·从当前的吸烟状况看，这种肺癌的发生频率及因肺癌导致死亡率的增加在今后相当长的一段时间内仍将持续。肺癌通常因癌细胞的生长而侵犯周边组织或者导致气道阻塞、淋巴结转移等症状，但是，也有10-15%左右的患者无任何症状，通过定期体检才能诊断出。另外，大部分肺癌发现时都已经发展到了第III (3)期以上，一般都很难治愈。因此，对肺癌进行早期诊断以降低因肺癌导致的死亡率是一个紧迫的问题。为了对肺癌进行诊断，一般都综合运用多种方法，到目前为止，大都通过检查肿瘤的大小、淋巴结是否转移等或者对肺肿瘤组织或淋巴结等做活检并通过免疫组织化学方法进行分析或者通过利用胸部X-线摄影、胸部计算机断层扫描、纤维支气管镜等进行诊断。但是，如果采用胸部计算机断层扫描，肺癌的大小必须达到约O. Icm以上才能够进行测定，在这一时期，癌症很可能已经转移到了其它的组织。利用纤维支气管镜的方法虽然可以将内镜插入支气管直接对肺内部进行观察，但是，其观察范围在空间上具有一定的局限性，很难对肺末端的肿瘤进行观察。为了克服上述现有诊断方法的缺点，研究人员一直试图通过测定患者血液中全血细胞计数(Complete blood count, CBC)、血清电解质(含I丐)、碱性磷酸酶(Alkalinephosphatase)、白蛋白(Albumin)、天冬氨酸转氨酶(Aspartate aminotransferase,AST) >丙氨酸转氨酶(Alanine transaminase, ALT)、总胆红素(Total bilirubin)或者肌酐(Creatinine)的浓度从而对肺癌进行诊断。但是，虽然一直在对这种肿瘤标记(marker)作为诊断因素或预后因素的价值进行研究，到目前为止也仅限于有限使用，仍然没有建议正式使用的肺癌标记。另外，结合珠蛋白(Haptoglobin, Hp)作为一种与IgG、白蛋白等一起大量存在于血液中的血清蛋白，主要在肝、皮肤、肺及肾脏细胞中合成，并分泌到血液中。通过由2个a chain和2个β chain形成二硫键(disulfide bond)连接的四聚体蛋白(tetramericprotein)形式存在，与红细胞中游离的血红蛋白结合，最终在血液中产生抗氧化功能(ffassell J. (2002)Haptoglobin:function and polymorphism. Clin Lab. 46, 547-552/Langlois M. R. & Delanghe J. R. (1996)Biological and clinical significance ofhaptoglobin polymorphism in humans. Clinical Chemistry 42, 15891600)。据最近的蛋白质组学研究报告表明，皮下及腹部脂肪细胞内也能够产生并分泌非常少量的结合珠蛋白。虽然能够在成人的肝内合成，但是却不能够在胎儿的肝内合成。结合珠蛋白是在生物体内与感染或炎症反应而使血中浓度急剧增加的急性时相蛋白(acute phaseprotein, APP)中的一种。Hp有 2个等位型(Hpl，Hp2)及 3种基因型(Hpl-l，Hp2-l，Hp2-2) (Maeda N, McEvoySM, Harris HF, Huisman TH, Smithies O. (1986)Polymorphisms in the human haptoglobingene cluster: chromosomes with multiple haptoglobin-related (Hpr) genes.Proc NatlAcad Sci U S A. 83, 73957399/Patzelt D, Geserick G, Schroder H. (1988)The genetichaptoglobin polymorphism:relevance of paternity assessment. Electrophoresis9, 393397), Hp α链(Hp a )上存在a I及a 2，上述a蛋白质以多种位点变体(positionvariant)的形式存在(Sadrzadeh SM, Bozorgmehr J. (2004)Haptoglobin phenotypes inhealth and disorders. Am J Clin Pathol. 121 Suppl:S97-104)。与上述蛋白质的基因相关的疾病包括糖尿病肾病(diabetic nephropathy)、克罗恩病(Crohn’ s disease)等，由急性时相蛋白感染(infection)、过度紧张(extreme·stress)、烧伤(burns)、严重的挤压伤(major crush injury)、过敏(allergy)等原因而导致其血液浓度增加，最近有报告显示，Hp的血液浓度在卵巢癌等多数癌症中均增加。但是，到目前为止，有关结合珠蛋白作为肺癌诊断用标记作用的研究仍然很少。因此，现在迫切需要一种能够对肺癌的诊断或者预后进行早期预测的肺癌诊断用标记。
技术实现思路
技术问题 本专利技术人在研究一种能够对肺癌的诊断或者预后进行早期预测的肺癌诊断用标记时发现Hpa R的浓度在肺癌患者血液中都非常高，从而完成本专利技术。技术方案 本专利技术提供一种含有以Hp a R为有效成份的肺癌诊断用标记。另外，本专利技术提供一种含有与Hp a R特异结合抗体的肺癌诊断试剂盒。另外，本专利技术提供一种包含通过血液测定Hp a R步骤的肺癌诊断方法。在本专利技术的一个实施例中上述血液采用血清。技术效果 本专利技术的肺癌诊断用标记及利用其抗体的肺癌诊断试剂盒用比较容易采集的血液作为检体，因此与以活检为对象的现有肺癌诊断方法不同，不仅不会给患者任何负担，能够非常简便地对肺癌进行诊断，而且诊断的敏感度及筛选度高，从而非常有助于肺癌的早期诊断。附图说明图I是利用ELISA方法分别对含有C-末端精氨酸的肽抗原(RP)及除去精氨酸后C-末端氨基酸由谷氨酰胺构成的肽抗原(QP)的VR及VQ抗体的敏感度及筛选度进行测定的不意 图2是利用ELISA方法随RP及QP肽的浓度变化而分别对其VR抗体、VQ抗体、单克隆抗体(MHa及ΜΗβ)及多克隆抗体(Pa)的反应性进行测定的示意图；图3是分别对RP及QP肽的VR抗体、VQ抗体及单克隆抗体(ΜΗ α及MH β )的反应性通过免疫印迹法进行测定的示意 图4是利用ELISA方法对男性正常群及男性肺癌群血清中的Hp a R浓度进行测定的示意 图5是利用ELISA方法对肺炎患者血液中Hp a R、HpHp a Q、Hp α及Hp β浓度进行测定的不意 图6是利用VR及VQ抗体混合物通过ELISA方法对本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：金一韩，
申请(专利权)人：培材大学校产学协力团，
类型：
国别省市：