防治植物真菌病害的多粘类芽袍杆菌及其生产方法技术

技术编号:8384118 阅读:161 留言:0更新日期:2013-03-07 01:35
本发明专利技术涉及株防治植物真菌病害的多粘类芽抱杆菌及其生产方法,属于生物农药技术领域。本发明专利技术采用的菌株是多粘类芽抱杆菌EBL一06菌株,分离自小麦叶面,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号:CGMCC?No.2377。该菌株可以防治植物多种真菌病害,提高作物产量C本发明专利技术利用味精废水来发酵多粘类芽抱杆菌,制备生防菌剂,该下艺生产的多粘类芽抱杆菌生防剂能有效防治多种植物真菌病害,并且生产成本低廉,操作简单,还可以有效利用味精废水,减少环境污染。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物农药

技术介绍
根据味精生产过程中废水所含污染物情况可分成三类一是高浓度高酸度有机废水即离交尾液;二是其它中高浓度有机废水;三是不需处理直接外排的冷却降温水。离交尾液是通过离子交换法提取谷氨酸后剩余的“废液”,它既含有丰富的有机质,还含有N、P、K等少量无机敖及其它微量元素,这些物质都可为微生物生长提供营养。其它中高浓度有机废水包括淀粉废水、制糖废水、发酵洗灌废水、精制废水等。淀粉废水和制糖废水除了含有一定的有机污染物质外,还有一些悬浮物质;发酵洗灌废水与离交尾液所含成分基本相同,只是含量较低;精制废水有时呈酸性,有时呈碱性,有机物污染物质含量较高,这些有机废水也是微生物资源开发比较理想的营养来源之一。但是,这些废水如果得不到合理利用,不仅会对环境造成严重污染,而且使资源白白浪费掉。文献报导味精废水造成较大环 境污染,如中国环境生态网上指出2005年全国味精生产厂家230余家,年排放废水17万吨,绝大多数未经治理直接排放迪处兰迎巡eedu . org . cn / Article / es / envir /ptheory / water / 200511 / 6456 . html )。中国专利(公开号CN 1916155A )中公开了一种利用味精废水制备发酵培养基及生产生物农药灰色链霉菌的方法,目前,众多味精废水处理技术大致分为两步,一是提取废水中的谷氨酸菌体单细胞蛋自,通过此步分离菌体,约可除去30 %左右的COD,常用物化方法进行处理(如絮凝、离心等方法);二是提取菌体后废液的处理,使其达到排放标准或处理后用于工厂回用,这也是众多味精废水处理技术所面临的关键问题,常采用生物处理方法(如厌氧发酵、生物膜法,SBR法等)。[0004 ]多粘类芽饱杆菌(Paenibacillus pol卿yxa )在自然界中分布广泛,是一种重要的生防菌,对多种植物真菌、细菌病害均有较好的防治作用。王智文等报道了一株多粘类芽抱杆菌CP一 5316菌株对动植物真菌、细菌病原物具有广谱抗性,利用大孔吸附树脂对多粘类抱杆菌Cp 一 5316产生的抗真菌活性物质的吸附、解吸性能,筛选出其最佳解吸剂,该活性物质对热、紫外线稳定,对胰蛋白酶、蛋白酶K有一定的耐受性,对氯仿部分敏感,对酸稳定,对碱敏感(王智文,袁士涛,何亮等,多粘类芽抱杆菌cp — 5316抗真菌活性物质的提取及其部分性质研究,农业环境科学学报,2007 , 26 ( 4 ) : 1464 一 1468 )。中国专利(授权公告号cN I I 69942c )中报导培养的Paenibacillus pol卿及其发酵上清液可以用来防止植物细菌性青枯病,而且还可用来防治植物苗期立枯病,碎倒病,以及黄瓜枯萎病,番茄枯萎病,茄子枯萎病,大豆根腐病,并且对植物具有十分明显的促进生长作用。中国专利(授权公告号cN I 186441c )中公开了 Paenibacillus p川ymyxa可以作为微生物肥料菌剂中的一种成分分解稻杆,有效解决农业生产中一方面农业垃圾过多,污染水体和环境,处理困难,另一方面化肥,农药使用过多,土壤恶化 cN I O I 5 I 9639B说明书2 / / 3页的矛盾。中国专利(授权公告号CN 1325635C)中公开了 Paenibacillus pol卿yxa Jaas cd刚以在较低的浓度卜进入植物体内,井能在植物体内定植,繁殖和传导;对植物同时具有促进生长,提高产量,防病抗病的作用,特别是对土传维管束病害具有良好的防治效果。[O 005 ]多粘类芽抱杆菌生防剂的生产方法有多种,如;中国专利(公开号CN 1844360A )中公开了一种多粘类芽抱杆菌的生产方法,其培养基为豆渣。中国专利(授权公告号CN I 186441C )中使用厄肉培养基作为多粘类芽抱杆菌发酵培养基。以味精废水为培养基生产多粘类芽抱杆菌生防剂的方法未见文献报道。
技术实现思路
本专利技术的日的是提供一种能够在植物叶际与根际定植,并且对多种病原菌具有拮抗作用的生防菌一多粘类芽抱杆菌EBL — 06菌株,同时提供一种利用味精废水生产该生防菌剂的方法。本专利技术所提供的生防菌株是由我们实验室从小麦的叶面上分离筛选出来的。将其编号为EBL — 06,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏日期为二零零八年二月二十六日,分类命名为多粘类芽抱杆菌 (PaenibacilluspoIymyxa )。保藏编号为CGMCC No . 2377。该菌株具有下列性质I菌落形态特征该菌株在PDA培养基上生长良好,单个菌落呈半玻璃珠状,边缘整齐,表面粘稠,与培养基结合紧密,菌落中心乳黄色。2菌体形态特征菌体杆状,革兰氏染色显阳性,芽抱端生,包囊膨大。3碳源利用能力可以利用碳源Q —环式糊精;肝糖;D —葡糖胺酸;衣康酸;D —半乳糖酸Y —内醋;D —半乳糖醛酸;2 —环式糊精;肝糖;D —葡糖胺酸;衣康酸;D —半乳糖酸Y —内醋;D —半乳糖醛酸;2 —轻基苯甲酸;4 一轻基苯甲酸;L 一精氨酸;L 一天门冬酞胺;L 一丝氨酸;甘氨酞一 L 一谷氨酸;D —木糖;D —甘露醇;苯乙胺。不可利用碳源丙酮酸甲酷;D —纤维二糖;P —甲基一 D —葡萄糖昔;i 一赤醉糖醇;N —乙酞一 D葡萄糖氨;D,L 一 u —磷酸甘油;u —丁酮酸;Y —经丁酸;L 一苯丙氨酸;L 一苏氨酸;腐胺。对真菌拮抗能力菌株在PDA固体培养基上表现出对灰葡萄抱霉、黄瓜黑星病的病原菌原菌、木霉菌等的高效拮抗效果。5 [ O 021」2、液体种子制备向高压灭菌的土显液体培养基中,接种多粘类芽抱杆菌,十25 — 35oC,ZOOr / min培养,得到液体种子。[002幻4、液态发酵向经过预处理的废水中接种5 % (体积)的液体种子,于25 — 35 V,通无菌空气培养24 — 72小时。[O。2315、后处理培养好的发酵液经细菌计数后,调节至I 08 — I 口。cell / ml,包装使用。 具体实施方式[O。24〕由本专利技术技术方案生产的多粘类芽抱杆菌生防剂能够高效防治多种真菌类植物病害,而且无公害,生产成本低,并且有效地利用了味精废水。以下通过具体实施例详细说明本专利技术的实施,目的在于帮助读者更好地理解本专利技术的精神实质,但不作为对本专利技术实施范围的限定。[O。25 ]实施例I :多粘类芽抱杆菌生物农药制备[0026〕种子培养基制备称取2009 土豆,切碎,于儿自来水中煮沸30分钟,过滤除去残渣,加入209葡萄糖,定容至IL,即得土豆培养基。分装入5个IL的三角瓶中,121oC火菌20min。[ O。27〕发酵培养基制备经过絮凝除去细菌蛋白的味精废水比加入gL自来水稀释,并用氢氧化钠调节PH至6 . O。 [ O。25 ]液体种子制备向土豆液体培养基中接种多粘类芽抱杆菌,于30 V,摇瓶ZOOr / min,恒温摇床振荡培养24小时,得到液体种子。[O。29」发酵产品将上述发酵培养基装罐到IOL的发酵罐中,121 V火菌巧min,按照5 %的接种量接种液体种子,在30 V恒温,通无菌空气的条件下,发酵2至3天,取样计数后,无菌条件下分装。[O。30 ]实施例2 :对多种病原真菌的拮抗作本文档来自技高网
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【技术保护点】
一株具有防治植物病害作用的多粘类芽抱杆菌(Paenibaclllus?polymyxa?)?,其特征在于:该多粘类芽抱杆菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号:CGMCC?No?.?2377?。

【技术特征摘要】
1.一株具有防治植物病害作用的多粘类芽抱杆菌(Paenibaclllus poIymyxa ),其特征在于该多粘类芽抱杆菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号CGMCC No . 2377。2.权利要求I所述的多粘类芽抱杆菌,其特征在于该菌株在POA培养基上生长良好,单个菌落呈半玻璃珠状,边缘整齐,表面粘稠,与培养基结合紧密,菌落中心乳黄色,菌体杆状,革兰氏染色显阳性,芽抱端生,包囊膨人;该菌株的...

【专利技术属性】
技术研发人员:不公告发明人
申请(专利权)人:青岛群恒生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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