一种花生籽仁的石蜡切片方法技术

本发明专利技术提供一种花生籽仁的石蜡切片方法，其包括以下步骤：1）取材；2）5%~10%戊二醛固定；3）脱水：80%乙醇50min，95%乙醇45min，100%乙醇45min，每梯度重复1次；4）透明：体积比1:1二甲苯：100%乙醇20~30min，二甲苯15~25min，二甲苯15~25min；5）直接透蜡法透蜡，包埋，切片；6）脱蜡，复水，苏木素-曙红复染，脱水，透明，封片。本发明专利技术能较好的固定花生籽仁细胞组织，切片完整、连续、不存在空洞，切片厚度可达7?m，且操作简单，适用于所有花生品种，便于推广应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及石蜡切片
，具体地说，是。
技术介绍
花生籽仁是花生收获的主要目标产物，决定着花生产量和品质的形成，但花生籽仁在生长过程中容易受到黄曲霉等病菌的侵染。研究表明，花生种皮的低渗透性、强韧性及耐破损等特征使花生对病害、虫害具被动抵制作用，因此花生种皮的完整性、强度对花生抗黄曲霉侵染等具有重要的屏障作用。花生种皮结构是评价花生种质抗、感黄曲霉侵染能力的重要指标，普通显微观察表明抗病品种的种皮结构存在较大差异，抗病品种的种皮细胞壁较厚，表皮细胞间结合紧密，栅栏细胞层严密厚实，裂缝和气孔较少；感病品种的种皮细胞壁则相对较薄，细胞间结合较疏松，裂缝和气孔较大，种皮具有较厚蜡质层。但是由于花生籽仁油分和蛋白质含量高，制作普通切片时，存在粘刀、薄厚不均、不连续或不完整等问题，很难得到理想的切片。石蜡切片法由于操作简单、价格低廉、可连续制片等特点，一直是观察细胞组织的形态结构及其动态变化的理想生物学研究技术。石蜡切片制作过程包括固定、脱水、透明、 透蜡、包埋、切片、贴片、脱蜡、染色、透明以及封片等步骤，在生物学的许多领域都得到了广泛的应用。但是由于花生籽仁油分和蛋白质含量非常高，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种花生籽仁的石蜡切片方法，其特征在于，包括以下步骤：1）取材；2）固定：采用体积浓度为5%~10%戊二醛固定；3）脱水：80%乙醇50min，95%乙醇45min，100%乙醇45min，每梯度至少2次脱水过程；4）透明：体积比1:1二甲苯:100%乙醇处理20~30min，二甲苯处理15~25min，二甲苯处理15~25min；5）透蜡、包埋和切片：采用熔点为54~56℃的切片石蜡直接透蜡2次，每次1.5~2h，透蜡后包埋、切片；6）脱蜡、染色和封片：脱蜡：二甲苯30~40min，重复1次；复水：100%乙醇2~3min，重复1次；95%乙醇2~3min，重复1次；80%乙醇2~3min，...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：单世华，闫彩霞，李春娟，张廷婷，许婷婷，
申请(专利权)人：山东省花生研究所，
类型：发明
国别省市：