糖尿病肾病早期诊断的血清代谢标志物测定方法技术

本发明专利技术公开了“糖尿病肾病早期诊断的血清代谢标志物测定方法”的方法。主要是利用基于气相质谱、液相质谱等分析技术和方法，定量测定糖尿病、糖尿病肾病病人血液中内源性小分子化合物，通过计算和比较病理组与正常组内源性小分子化合物相对浓度差异，用于临床糖尿病肾病的早期诊断。与现有的其它临床诊断指标相比，该方法适应面广、灵敏、取样简便、操作简单、对机体无伤害。更适用于糖尿病肾病早期阶段某些生理生化指标尚不明确时糖尿病肾病的筛查，避免患者不能及时诊断而错过治疗的最佳时期。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及糖尿病肾病临床诊断标志物的测定方法，具体涉及采用气相色谱质谱及液相色谱质谱方法检测人血样中内源性小分子，采用相对定量或绝对定量方法测定糖尿病、糖尿病肾病病人血清中内源性小分子，与正常人血清内小分子含量范围进行比较，作为评判依据。
技术介绍
长期以来，临床糖尿病肾病的诊断指标及方法主要包括尿白蛋白、血肌酐测定，这些指标在早期变化不明显，易出现假阳性结果。而肾组织活体虽然较为准确，但对人体伤害大，不能作为糖尿病肾病的常规筛查方法。具体不足主要体现在I.早期变化不明显临床规定尿白蛋白含量在20mg/L_200mg/L范围内，即属于微 量白蛋白尿，超过200mg/L即属于肾脏重度损伤。大量研究表明，许多糖尿病肾病患者早期尿中白蛋白含量并未超标，当尿微量白蛋白超标时，患者肾脏纤维化已达到不可逆程度，从而错过治疗的最佳时段。2.假阳性采用20mg/L做为临界值时，许多尿白蛋白阴性的健康人也会出现假阳性结果。这些假阳性结果往往是由于测试者体内缺水，尿液浓缩导致的，使得糖尿病肾病的患病率被高估。3.伤害性由于微量白蛋白尿评判的不确定性，临床上经常将肾活检与之相结合。但活检对机体伤害性大，费用本文档来自技高网...

【技术保护点】
通过测定血清中代谢标志物用于糖尿病肾病早期临床诊断的方法，其特征包括以下几个方面：a)采用人血清作为样本进行检测；b)采用甲醇等溶剂对尿中小分子进行提取；c)采用三甲基硅烷基三氟乙酰MSTFA的方法对尿样进行衍生化；d)采用气相色谱？飞行时间质谱(GC/TOF？MS)、超高液相色谱？飞行时间质谱(UPLC/TOF？MS)进行样本分析；e)应用SIMCAP？11软件和偏最小二乘？判别分析(PLS？DA)建立数学模型；f)从多维空间数学模型中提取参数，计算正常组和病理组之间相对距离。g)利用仪器所检测的信号强度进行相对定量，或者利用标准品进行绝对定量。

【技术特征摘要】
1.通过测定血清中代谢标志物用于糖尿病肾病早期临床诊断的方法，其特征包括以下几个方面 a)采用人血清作为样本进行检测； b)采用甲醇等溶剂对尿中小分子进行提取； c)采用三甲基硅烷基三氟乙酰MSTFA的方法对尿样进行衍生化； d)采用气相色谱-飞行时间质谱(GC/TOF-MS)、超高液相色谱-飞行时间质谱(UPLC/TOF-MS)进行样本分析； e)应用SMCAP-Il软件和偏最小二乘-判别分析(PLS-DA)建立数学模型； f)从多维空间数学模型中提取参数，计算正常组和病理组之间相对距离。g)利用仪器所检测的信号强度进行相对定量，或者利用标准品进行绝对定量。2.除权利要求I中血清作为生物样本外，生物样本还可为血浆、全血,或来源于人的其它体液、组织、细胞等，具体包括尿液、红细胞、尿液、脑脊液、唾液、泪液、汗液、组织匀浆、细胞或细胞培养液。3.权利I中得到的数据除可用于糖尿病肾病的诊断外，还包括用于诊断其它涉及肾脏损伤的疾病，如急性肾炎、尿毒症、慢性肾衰竭等相关疾病。4.除权利要求I中甲醇沉淀蛋白的方法处理生物样本外，还包括不经过前处理的方法，或过滤/超滤的方法，或固相萃取方法，或经过高速离心和超速离心沉淀；或者生物样本采样其它蛋白沉淀方法，如加入有机溶剂(如乙醇、丙酮、乙腈、异丙醇)、各种酸碱盐沉淀、微波、加热沉淀的方法；或经过有机溶剂进行液-液提取，有机溶剂包括乙酸乙酯、氯仿、乙醚、正丁醇、石油醚、二氯甲烷、苯、正己烷、环己烷、乙腈等处理的方法。5.除权利要求I中采用气...

【专利技术属性】
技术研发人员：王广基，刘志红，阿基业，李梦婕，王旭方，刘林生，葛永纯，曹蓓，石建，
申请(专利权)人：中国药科大学，中国人民解放军南京军区南京总医院，
类型：发明
国别省市：