一种人胰岛来源的胰腺干细胞系的构建及向胰岛素分泌细胞分化的方法技术

本发明专利技术公开了一种人胰岛来源的胰腺干细胞系的构建与分化的方法，所述的胰腺干细胞系，是从人胰岛细胞团内扩增出胰腺干细胞，且具有多向分化潜能。其经过诱导后能够分化形成类神经细胞、类脂肪细胞、类骨细胞、以及功能性胰岛样细胞团。将功能性胰岛样细胞团移植到患有糖尿病裸鼠模型的体内，能降低模型裸鼠血糖浓度，在24天内能够维持正常的血糖水平。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于细胞工程
，特别涉及一种人胰岛来源的胰腺干细胞系构建及向胰岛素分泌细胞分化的方法。
技术介绍
糖尿病是继心血管疾病和癌症之后的第三大高发慢性疾病，它严重危害着人类的生命健康。目前，对糖尿病的治疗虽然有很多方法，如口服降糖药物，注射外源性胰岛素，并结合饮食限制以及体育锻炼的方法，但都不能从根本上解决问题。器官移植是一种比较好的解决方法，但该方法的应用受到供体不足和免疫排斥问题的限制。而干细胞增殖力强、数量充足、移植排斥反应相对较低。因此，人们寄希望于干细胞替代疗法能够解决供体不足和免疫排斥的问题。·干细胞的使用虽然能够解决供体细胞数量问题，但是在应用前还需要先将其诱导分化为功能性的胰岛素分泌细胞。胰腺干细胞(Pancreatic stem cells)是一类存在于胎儿和成年胰腺组织中的成体干细胞，具有自我更新，多向分化潜能，在自然分化过程中首先分化为胰腺组织内的各种细胞。由于该细胞来源于胰腺组织，因此，在向胰岛素分泌细胞分化方面具有更大的潜力。越来越多的证据表明胰腺导管、胰岛和腺泡组织内都存在着具有多向分化潜能的干细胞。目前有观点认为，由胰岛组织获得的间充质样干细本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人胰岛来源的胰腺干细胞系的构建方法，该方法包括以下步骤：1)将人胰腺细胞加入培养液A中培养2？3天；2)挑出上述培养物中的胰岛细胞团，用蛋白酶消化成单细胞，接种于培养液A中培养；3)待细胞生长至80？90％融合时，传代，加入培养液B培养，得到胰岛细胞来源的人胰腺干细胞系(hPSC)；其中所述培养液A为含有10？25％？FBS、8？12mM尼克酰胺、18？22ng/mLEGF和18？22ng/mL？bFGF的RPMI1640；所述培养液B为含有10？25％FBS、18？22ng/mLbFGF的Low？DMEM。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：曹晖，徐军军，孙振华，
申请(专利权)人：厚朴生物科技苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：