本发明专利技术公开了拮抗菌核病菌的固氮芽孢菌及其用途。该固氮芽孢菌是芽孢杆菌(Bacillus?sp.)GDSD212，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为CGMCC?No.5035。本发明专利技术所提供的芽孢杆菌(Bacillus?sp.)GDSD212?CGMCC?No.5035具有较高的固氮活性，可以有效拮抗菌核病菌(Sclerotinia?sclerotiorum)，在固氮微生物菌剂和生物有机肥生产中具有广阔的应用前景。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及拮抗菌核病菌的固氮芽孢菌及其应用。
技术介绍
氮肥是农业生产中最重要的生产资料之一。生产化学氮肥消耗大量能源，占生产总成本的70% 80%。近年来能源日趋紧张，我国化肥生产用煤价格飚升导致化学氮肥价格上涨，农民难以承受，反响强烈。此外，化学氮肥在提高作物产量、保障我国粮食安全方面发挥了巨大作用，但是不合理施氮已经形成了严重的面源污染，造成一系列的严重危害，如太湖蓝藻事件令人触目惊心。城市地下水硝酸盐污染已经对饮用水安全造成了威胁。大气中含有78%的氮素，但其存在形式是分子态氮气，动植物不能直接利用，自然界只有某些原核微生物具有直接利用大气中氮气的能力，将其还原成氨，这就是生物固 氮作用。选用高效固氮微生物菌种工厂化生产制成菌剂，或进一步与其它富含植物营养的物料复合加工成生物制品，应用于农业生产，可以提供作物氮素营养，改善作物根际生态环境，提高土壤生物肥力性状，这就是通常所说的固氮微生物菌剂或固氮微生物肥料。生物氮肥具有多种优势①生物氮肥由可再生的生化制剂和活体微生物组成，可以再生，不存在资源枯竭问题，是可持续发展农资产品。②生物氮肥是环境友好型肥料，其生产和使用过程均不产生三废等污染性物质，而且能改善土壤理化性质，提高土壤肥力，是生态农业农资产品。③生物氮肥生产耗能少、成本低，其成本仅为等效化学氮肥的20% 40%，可以为国家节省大量的煤炭和石油等能源战略物资。④使用生物氮肥可以显著降低农业生产成本，提高农产品品质，提升土壤肥力，使农民受益，促进社会和谐发展。核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)的是作物菌核病的病原菌,形态特征表现为子囊盘小，呈小杯状，浅肉色至褐色，单个或几个从菌核上生出，直径O. 5-lcm，柄褐色细长，弯曲，长3-5cm，向下渐细，与菌核相连。菌丝体可以形成菌核，长柄的褐色子囊盘产生在菌核上。菌核形状多样，长3-15 μ m。子囊圆柱形，120-140 μ mX 11 μ m，孢子通常8个，单行排列，椭圆形，8-14 μ mX 4-8 μ m，侧丝细长，线形，无色，顶部较粗。该菌是一种危害作物和蔬菜的世界性的重要的植物病原菌，广泛地侵染、危害十字花科、豆科、茄科、芸香科等植物，如造成油菜、大豆、向日葵、黄瓜、辣椒等经济作物和蔬菜菌核病。目前对菌核病的防治主要依靠化学农药，然而化学防治不仅成本高、污染环境，而且防效也不理想，同时食品的安全性也受到严重影响。菌种是微生物肥料生产应用的基础。目前，限制我国微生物肥料行业发展的瓶颈就是高效菌种的选育问题。农业生产迫切需求固氮效能高、拮抗病原真菌、抗逆性强、货架期长的微生物肥料生产用菌种。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一株可以在农作物根际进行高效固氮，并且拮抗核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)的细菌。本专利技术所提供的细菌是芽孢杆菌(Bacillus sp.)⑶SD212，该菌株已于2011年7月6日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为北京市朝阳区北辰西路I号院3号)，保藏编号为CGMCC No. 5035。本专利技术的另一个目的是提供一种菌剂，该菌剂的活性成分为所述的芽孢杆菌(Bacillus sp.)⑶SD212 CGMCC No. 5035。该菌剂除包含作为活性成分的芽孢杆菌(Bacillus sp.)⑶SD212 CGMCC No. 5035夕卜，还可包括辅料，如草炭、动物的粪便、各类作物的秸杆、松壳、稻草、花生皮等。该菌剂可用于抑制病原真菌、防治植物真菌病害、固氮、产生固氮酶等。 所述芽孢杆菌(Bacillus sp.)⑶SD212 CGMCC No. 5035在制备下述I)-4)中任一菌剂中的应用也属于本专利技术的保护范围I)用于抑制病原真菌的菌剂；2)用于防治植物真菌病害的菌剂；3)用于固氮的菌剂；4)产生固氮酶的菌剂。所述病原真菌为通过土壤、施入土壤中的肥料、和/或种子传播的真菌，具体可为引起菌核病的真菌；所述植物真菌病害可为菌核病。所述引起菌核病的真菌可为核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)。所述的芽孢杆菌(Bacillus sp.)⑶SD212 CGMCC No. 5035或以芽孢杆菌(Bacillus sp.)⑶SD212 CGMCC No. 5035为活性成分的菌剂在生产固氮酶中的应用以及在制备生物有机肥中的应用也属于本专利技术的保护范围。本专利技术的再一个目的是提供一种含有芽孢杆菌(Bacillus sp.)⑶SD212CGMCCNo. 5035或以芽孢杆菌(Bacillus sp.)⑶SD212 CGMCC No. 5035为活性成分的菌剂的生物有机肥。本专利技术的又一目的是提供一种培养芽孢杆菌(Bacillus sp.)⑶SD212 CGMCCNo. 5035的方法，包括将芽孢杆菌(Bacillus sp.)⑶SD212 CGMCC No. 5035在用于培养芽孢杆菌的培养基中培养的步骤。本专利技术的又一目的是提供一种制备所述菌剂的方法，该方法包括如下步骤将所述的芽孢杆菌(Bacillus sp.)⑶SD212 CGMCC No. 5035作为活性成分，得到所述菌剂。实验证明，本专利技术是从土壤样品中经过层层筛选，最终筛选出了芽孢杆菌(Bacillus sp.)⑶SD212 CGMCC No. 5035，该菌株具有很高的固氮酶活性，能够拮抗作物菌核病病原菌核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum),竞争适应能力强,接种效果好,在固氮微生物菌剂和生物有机肥生产中具有广阔的应用前景。保藏说明菌种名称芽孢杆菌拉丁名(Bacillussp.)菌株编号⑶SD212保藏机构中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏机构简称CGMCC地址北京市朝阳区北辰西路I号院3号保藏日期2011年7月6日保藏中心登记入册编号CGMCC No. 503附图说明图I为芽孢杆菌(Bacillus sp.)⑶SD212 CGMCC No. 5035的固氮酶活性。图2 为芽孢杆菌(Bacillus sp.)⑶SD212 CGMCC No. 5035 拮抗菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)。 左侧菌落为病原真菌核盘菌(Sclerotiniasclerotiorum),右侧菌落为芽抱杆菌(Bacillus sp.)GDSD212 CGMCC No. 5035。具体实施例方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。 下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。固氮菌富集培养液ACCC55 成份蔗糖 10g、K2HPO4 · 3H20 0. 5g、NaCl 0. 2g、CaCO3Ig^MgSO4 · 7H20 0. 2g、蒸馏水 1000ml、pH 7. 0 7. 2。改良固氮培养基成份蔗糖10g、K2HPO4 · 3H20 0. 5g、NaCl 0. 2g、CaCO3 lg、MgSO4 · 7H20 0. 2g、酵母膏 0. 5g、蒸馏水 1000ml、琼脂 I. 5% 2· 0%, pH7. 0 7· 2。无氮培养基蔗糖10g，NaCl 0. 12g，K2HPO4 · 本文档来自技高网...
【技术保护点】
芽孢杆菌(Bacillus？sp.)GDSD212，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC？No.5035。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：周剑浩，孙建光，江峰，徐晶，张友恒，
申请(专利权)人：上海环垦生态科技有限公司，中国农业科学院农业资源与农业区划研究所，
类型：发明
国别省市：
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