一种猪去氧胆酸的精制方法技术

本发明专利技术提供了一种猪去氧胆酸的精制方法，包括溶解猪胆汁提取胆红素后的下脚料，脱色，过滤，皂化成盐，调pH值3~4，析晶得到猪去氧胆酸粗品，将粗品进行纯化，获得猪去氧胆酸纯品。整套方法具有安全无毒，操作简便，成本低，周期短，产品纯度高，易于大规模生产等优点，具有广阔的市场前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物化工领域，具体地说，涉及。
技术介绍
猪去氧胆酸又称异去氧胆酸，α -猪去氧胆酸，分子量为392. 58，可以从猪胆汁中提取得到。猪去氧胆酸为降血脂药，能抑制胆酸的形成及溶解脂肪，降低血中胆固醇和甘油三酯，适用于Ia或Ib型高血脂症、动脉粥样硬化症。对百日咳杆菌、白喉杆菌、金黄色葡萄球菌等有一定的抑菌作用。它能刺激胆汁分泌，使胆汁稀释而不增加固含量，适用于胆道炎、胆囊炎、胆石症和其它非阻塞性胆汁郁积，尚能促进肠道脂肪分解和脂溶性维生素吸收，可用于肝胆疾患引起的消化不良。临床上还作为中药清开灵注射剂、清开灵滴丸的有效成分，是人工牛黄配方的重要原料。目前，猪去氧胆酸主要从猪胆汁中提取，猪胆汁中猪去氧胆酸的含量约为40%，鹅去氧胆酸约为25%，其次是猪胆酸和3 α -醛基-6-酮基-胆烷酸，是猪去氧胆酸的主要原料来源。现有的生产猪去氧胆酸的方法主要包括两种，一种是经皂化、脱色、脱脂后的粗品用乙酸乙酯结晶，该工艺使用大量的乙酸乙酯，得到的猪去氧胆酸纯度不高，收率低；另一种是甲酯化法，CN101037463A中公开了一种从猪胆汁中制备高纯度猪去氧胆酸的方法，该方法利用不同胆汁酸甲酯与苯加成物在苯中的不同溶解度分离得到猪去氧胆酸，该法工艺复杂，为获得高纯度产品，使用了苯、乙醚、硫酸等有害化学品，对环境不友好，且不利于大规模生产。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种工艺简单，生产周期短，产品纯度高且对环境友好的猪去氧胆酸的精制方法。为了实现本专利技术目的，本专利技术的，包括溶解猪胆汁提取胆红素后的下脚料，脱色，过滤，皂化成盐，调PH值3 4，析晶得到猪去氧胆酸粗品，将粗品进行纯化，获得猪去氧胆酸纯品。具体地，前述的精制方法包括以下步骤I)溶解脱色，用5 10倍重量的有机溶剂回流f 2小时溶解猪胆汁提取胆红素后的下脚料，加入下脚料重量59TlO%的活性炭继续回流30分钟；2)过滤后降至4(T50°C，加入碱性物质皂化成盐，降至15 25°C，保温1 2小时，过滤得到猪去氧胆酸盐沉淀；3)向猪去氧胆酸盐中加入1(Γ20倍重量的水，加热至45飞(TC溶解，用稀盐酸调节ρΗ3 4，析晶得到猪去氧胆酸粗品I，过滤干燥；4)向猪去氧胆酸粗品I中加入5 10倍重量的水溶性有机溶剂，加热回流广2小时，待其全部溶解后降至15 25°C，向其中滴加水，直至出现混浊物，停止滴加，继续搅拌I小时，过滤得猪去氧胆酸粗品II ；5)向猪去氧胆酸粗品II中加入5 10倍重量的水溶性有机溶剂，加热回流f 2小时，待其全部溶解后降至15 25で，向其中滴加水，直至出现混浊物，立即停止滴加，继续搅拌I小时，过滤干燥即得猪去氧胆酸纯品。前述的精制方法，步骤I)中所述有机溶剂任选下组中的ー种こ酸こ酷、こ酸丁酷、こ醇、丙酮、异丙醇、仲丁醇等，用量为下脚料重量的5 10倍。前述的精制方法，步骤2)中使用的碱性物质为ニ水氯化钙等。前述的精制方法，步骤2)具体为过滤后降至50°C，加入碱性物质皂化成盐，降至15°C，保温2小时，过滤得到猪去氧胆酸盐沉淀。 前述的精制方法，步骤3)具体为向猪去氧胆酸盐中加入10倍重量的水，加热至50°C溶解，用稀盐酸调节pH3 4，析晶得到猪去氧胆酸粗品I，过滤干燥，干燥温度为75°C。前述的精制方法，步骤4)和5)中使用的水溶性有机溶剂任选下组中的ー种甲醇、こ醇、こニ醇、N，N-ニ甲基甲酰胺、冰醋酸、异丙醇等。前述的精制方法，步骤4)具体为向猪去氧胆酸粗品I中加入5倍重量的水溶性有机溶剂，加热回流f 2小时，待其全部溶解后降至25°C，向其中滴加水，直至出现混浊物，停止滴加，继续搅拌I小时，过滤得猪去氧胆酸粗品II。前述的精制方法，步骤5)具体为向猪去氧胆酸粗品II中加入5倍重量的水溶性有机溶剂，加热回流广2小时，待其全部溶解后降至15°C，向其中滴加水，直至出现混浊物，立即停止滴加，继续搅拌I小时，过滤干燥即得猪去氧胆酸纯品。本专利技术提供的猪去氧胆酸的精制方法，以提取胆红素后的下脚料为原料，从中分离纯化出猪去氧胆酸，经高效液相色谱检测分析，精制得到的纯品中猪去氧胆酸含量大于98%，杂质含量小，整套方法具有安全无毒，操作简便，成本低，周期短，产品纯度高，易于大规模生产等优点，具有广阔的市场前景。具体实施例方式以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用原料均为市售商品。本专利技术中涉及到的百分号“％”，若未特别说明，是指重量百分比；但溶液的百分比，除另有规定外，是指IOOml溶液中含有溶质的克数。实施例I猪胆汁提取胆红素后的下脚料的制备取新鮮猪胆汁IOOOmL,用5%氢氧化钠溶液调节pH值至12，加热至沸腾保温2小吋，在搅拌下加入10%氯化钙溶液IOOmL,加热至沸腾，冷却后倾去上清液，过滤，收集胆红素钙盐。将胆红素钙盐加入5倍重量的水溶解后，加入适量的偏重亚硫酸钠抗氧化，用稀盐酸酸化至PH值I. 5，加入三氯甲烷提取得到胆红素結晶。在过滤胆红素钙盐后得到的上清液中，按100g/L加入固体氢氧化钠，加热煮沸24小时皂化，冷却静置分层，虹吸除去上层淡黄色液体，沉淀物加入适量的水使之溶解，用稀盐酸酸化至pH值2 3，过滤水洗至中性，得到黄色的固体，即为下脚料。实施例2以猪胆汁提取胆红素后的下脚料为原料精制猪去氧胆酸称取一定量实施例I中制备的下脚料，用5倍重量的异丙醇回流2小时，加入下脚料重量5%的活性炭继续回流30分钟，过滤后降至50°C，加入15% ニ水氯化钙溶液成盐，降至15°C，保温2小时，过滤得到白色的猪去氧胆酸盐沉淀。将猪去氧胆酸盐用10倍重量的饮用水，加热至50°C溶解，用稀盐酸缓慢调节pH值3，析出白色的猪去氧胆酸粗品I，过滤干燥(干燥温度为75°C)。称取一定量的猪去氧胆酸粗品I，加入5倍重量的乙二醇，加热回流2小时，待其全部溶解后降至25 °C，向其中缓慢滴加纯化水，直至出现混浊物，停止滴加，继续搅拌I小时，过滤得猪去氧胆酸粗品II，称取一定量的猪去氧胆酸粗品II，加入5倍重量的乙二醇，加热回流，2小时，待其全部溶解后降至15°C，向其中缓慢滴加纯化水，直至出现混浊物，立即停止滴加，继续搅拌I小时，过滤干燥得到白色的猪去氧胆酸成品，经HPLC分析，成品中猪去氧胆酸含量为98. 5%。实施例3以猪胆汁提取胆红素后的下脚料为原料精制猪去氧胆酸称取一定量实施例I中制备的下脚料，用5倍重量的乙酸乙酯回流2小时溶解下脚料，加入下脚料重量5%的活性炭继续回流30分钟，过滤后降至50°C，加入20% 二水氯化钙溶液成盐，降至15°C，保温2小时，过滤得到白色的猪去氧胆酸盐沉淀。将猪去氧胆酸盐 用10倍重量的饮用水，加热至50°C溶解，用稀盐酸缓慢调节pH值3. 5，析出白色的猪去氧胆酸粗品I，过滤干燥(干燥温度为75°C)。称取一定量的猪去氧胆酸粗品I，加入5重量的冰醋酸，加热回流2小时，待其全部溶解后降至25V,向其中缓慢滴加纯化水，直至出现混浊物，停止滴加，继续搅拌I小时，过滤得猪去氧胆酸粗品II，称取一定量的猪去氧胆酸粗品II，加入5倍重量的冰醋酸加热回流2小时，待其全部溶解后降至15°C，向其中缓慢滴加纯化水，直至出现混浊物本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种猪去氧胆酸的精制方法，其特征在于，所述方法包括溶解猪胆汁提取胆红素后的下脚料，脱色，过滤，皂化成盐，调pH值3~4，析晶得到猪去氧胆酸粗品，将粗品进行纯化，获得猪去氧胆酸纯品。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陆其华，周大海，
申请(专利权)人：苏州天绿生物制药有限公司，山东天绿制药有限公司，
类型：发明
国别省市：