重组促红细胞生成素及制备方法技术

本发明专利技术涉及化学修饰的重组促红细胞生成素及制备方法，采用基因工程技术对促红素进行重组，在促红素中引入了具有化学活泼酮基的2-氨-8-氧代壬酰残基，在聚乙二醇对重组促红素共价修饰时，聚乙二醇特异性地与2-氨-8-氧代壬酰残基反应，反应完全，且不与其他氨基酸残基发生反应，所需要的反应条件较温和，解决了现有技术中选择性差、反应条件恶劣的问题。聚乙二醇化的重组促红素的药代动力学研究结果、血细胞比容测定结果均优于天然的促红素。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，具体涉及化学修饰的。
技术介绍
促红细胞生成素(Erythropoietin)也称促红素,英文简称ΕΡ0,是一种糖蛋白激素，其主要的生理功能是刺激骨髓红细胞前体细胞的分化与增殖，因此EPO被认为是促进红细胞的产生并能够调节体内的红细胞总量在最适宜水平的主要调节因子。天然人促红细胞生成素(hEPO)是一种主要由肾脏合成并分泌的糖蛋白激素。当肾脏功能衰竭时，EPO就无法正常合成，因而导致红细胞生成数量的减少，即造成贫血。贫血是慢性肾病的常见症状之一，以前对于慢性肾病引起的贫血没有有效的预防和治疗措施， 基本上只能是通过输血来暂时缓解症状。随着现代基因技术的发展，1984年重组人促红素(r-HuEPO)首次研究成功并广泛应用于临床，大大加速了人们对促红素的基础及应用研究，并为肾性贫血病患者提供了新的医疗途径。现有的研究表明促红素的作用要比以前所认识到的广泛，它不仅适用于慢性肾功能衰竭导致的贫血、恶性肿瘤或化疗导致的贫血、失血后贫血和艾滋病引起的贫血等，还可以降低病人对输血的需求，减少艾滋病以及病毒性肝炎等通过血液制品传播疾病的发生几率。目前，越来越多得贫血患者在接受EPO本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种化学修饰的重组促红细胞生成素，其中，第65位的氨基酸残基为2？氨？8？氧代壬酰残基，所述的2？氨？8？氧代壬酰残基是通过在促红细胞生成素基因序列的第65位发生琥珀无义突变后由该琥珀无义突变的位置翻译而成的，在第65位发生琥珀无义突变的促红细胞生成素基因序列如SEQ？ID？No.3所述，所述的2？氨？8？氧代壬酰残基上共价连接了聚乙二醇。

【技术特征摘要】
1.一种化学修饰的重组促红细胞生成素，其中，第65位的氨基酸残基为2-氨-8-氧代壬酰残基，所述的2-氨-8-氧代壬酰残基是通过在促红细胞生成素基因序列的第65位发生琥珀无义突变后由该琥珀无义突变的位置翻译而成的，在第65位发生琥珀无义突变的促红细胞生成素基因序列如SEQ ID No. 3所述，所述的2-氨-8-氧代壬酰残基上共价连接了聚乙二醇。2.如权利要求I所述的重组促红细胞生成素，其中，所述的聚乙二醇为羟氨基或联氨基取代的聚乙二醇。3.制备如权利要求I所述的重组促红细胞生成素的方法，其中，该方法包括 (1)构建含有编码2-氨-8-氧代壬酰-tRNA合成酶基因、琥珀突变抑制tRNA基因、在第65位发生琥珀无义突变的促红细胞生成素基因的重组表达载体，所述编码2-氨-8-氧代壬酰-tRNA合成酶基因序列如SEQ ID No. 6所述，所述琥珀突变抑制tRNA基因序列如SEQ IDNo. 5所述，所述在第65位发生琥珀无...

【专利技术属性】
技术研发人员：万为，
申请(专利权)人：苏州元基生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：