【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物制药领域，具体涉及定点突变和定点修饰的生长激素，所述的定点突变为用非天然氨基酸定点突变生长激素的天然氨基酸，还涉及将经过所述定点突变的生长激素进行定点修饰，例如进行聚乙二醇化的生长激素衍生物。本专利技术还涉及定点突变和定点修饰生长激素的方法，所述方法包括使用基因密码子扩展技术将非天然氨基酸定点引入生长激素基因中，借助非天然氨基酸与修饰剂，如聚乙二醇与生长激素定点连接。本专利技术进一步涉及定点突变或修饰的生长激素的应用，如作为稳定、长效生长激素等的用途。
技术介绍
生长激素天然的人生长激素(hGH)(Bazan, F. Immunology Todyll: 350-354 (1991) ;Mott, H. R.和Campebel1，I. D. Current Opinion in Structural biology5:114-121(1995);Silvennoinen, 0.和 Ihle, J. N. (1996)SIGNALING BY THE HEMATOPOIETIC CYTOKINE RECEPTORS)是由人下脑垂体分泌的蛋白质，生...
【技术保护点】
定点突变的生长激素，其在特定位点的1个氨基酸被突变为非天然氨基酸，所述非天然氨基酸选自：所示的Lys？diazirine，所示的Lys？azido，或其它含有双吖丙啶、叠氮结构的非天然氨基酸中的至少1种；所述特定位点选自：示于SEQ？ID？NO：1的序列的第Y35位,P48位,Q49位，S57位，K70位，L87位，G131位，R134位，Y143位和K145中的1个位点。FDA00001805184100011.jpg,FDA00001805184100012.jpg
【技术特征摘要】
2011.06.23 CN 201110171781.71.定点突变的生长激素，其在特定位点的I个氨基酸被突变为非天然氨基酸，所述非天然氨基酸选自2.定点突变的生长激素，其与示于SEQID NO :1的序列的区别在于在SEQ ID NO 1所示的序列的第N位的氨基酸被突变为Lys-diazirine，所述突变氨基酸与SEQ ID N0:1所示的序列的连接方式如下式所示3.定点突变的生长激素，其与示于SEQID NO :1的序列的区别在于在SEQ ID NO 1所示的序列的第N位的氨基酸被突变为Lys-azido，所述突变氨基酸与SEQ ID N0:1所示的序列的连接方式如下式所示4.经过修饰的权利要求I一 3中任一项的定点突变的生长激素，其连接方式如下式所示，其中R5和R6独立地为H、相同或不同分子量PEG，环糊精，糖，核酸，氨基酸，多肽或羧基端修饰基团，且二者不同时为H，5.权利要求4的经修饰的定点突变的生长激素，所述修饰为在R7上连接不同分子量PEG,环糊精，糖，核酸，氨基酸，多肽或羧基端修饰基团。6.编码突变的生长激素的核酸分子，所述核酸分子与编码SEQID NO :1的核酸分子SEQ ID NO :2的区别在于，其中编码SEQ ID N O :I的第Y35位，P48位，Q49位，S57位，K70位，L87位，G131位，R134位，Y143位，K145位的氨基酸中的一个氨基酸的密码子被突变为TAG。7.核酸载体，其可操作地连接有权利要求5的核酸分子。8.宿主细胞,其中含有权利要求6的核酸载体。9.权利要求7的宿主细胞，其中还含有表达甲烷球菌的tRNA(tRNAPyl)和吡咯赖氨酰-tRNA合成酶(tRNApyl)的质粒。10.权利要求7或8的宿主细胞，其为真核宿主细胞或原核宿主细胞。11.定点改良生长激素的方法，包括步骤 (1)选择步骤在生长激素的氨基酸序列中选择期望突变的一个或多个特定氨基酸位占. (2)基因突变将编码对应于(I)中选择的位点的生长激素的氨基酸的密码子用基因工程方法突变为密码子TAG ； (3)表达载体构建将(2)基因突变步骤得到的突变的生长激素的编码序列与合适的载体可操作地连接，得到突变序列表达载体； (4)获得pACYC-tRNA/PylRS质粒从保藏日为2011年6月14日、保藏号为CGMCCNo 4951的大肠埃希氏菌pACYC-tRNA/PylRS中获取质粒pACYC-tRNA/Pyl...
【专利技术属性】
技术研发人员：周德敏，张传领，肖苏龙，张雨帆，俞飞，赵传科，陈景贤，张礼和，
申请(专利权)人：北京大学，
类型：发明
国别省市：
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