用于生产和纯化重组溶酶体α-甘露糖苷酶的方法技术

本发明专利技术涉及一种用于纯化重组α-甘露糖苷酶的方法、一种用于生产α-甘露糖苷酶的方法、一种包含α-甘露糖苷酶的组合物、这种组合物作为药物的用途、作为治疗α-甘露糖苷贮积症的药物的用途以及一种治疗α-甘露糖苷贮积症和/或减轻与α-甘露糖苷贮积症相关的症状的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及ー种用于纯化重组α -甘露糖苷酶的方法、ー种用于生产α _甘露糖苷酶的方法、ー种包含α -甘露糖苷酶的组合物、这种组合物作为药物的用途、作为治疗α-甘露糖苷忙积症的药物的用途以及ー种治疗α-甘露糖苷忙积症和/或减轻与α-甘露糖苷贮积症相关的症状的方法。
技术介绍
α -甘露糖苷贮积症α -甘露糖苷贮积症是世界范围以1/1，000, 000和1/500，000之间的频率发生的ー种隐性常染色体疾病。甘露糖苷贮积症存在于欧洲、美洲、非洲以及还有亚洲的全部人种类别中。它在对于溶酶体贮积病具有良好诊断服务的所有国家中以相似的频率检测到。他们出生时是表面上健康的，然而本病的症状是进行性的。α -甘露糖苷贮积症显示出临床异质性，范围从十分严重至十分轻微的形式。常见临床症状是精神发育迟滞、骨骼变化、导致反复感染的受损免疫系统、听カ损害，并且本病经常与典型面部特征(如粗糙的脸部、凸出的前額、扁平的鼻梁、小鼻和阔嘴)相关。在最严重的病例(甘露糖苷贮积症I型)中，儿童患有肝脾肿大，并且它们在生命第一年期间死亡。这种早期死亡可能由归因于免疫缺损的重度感染引起，所述免疫缺损由本这种疾病引起。在本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.02.24 DK PA201070067;2010.02.24 US 61/307,5871.ー种用于从细胞培养物中纯化重组α -甘露糖苷酶的方法，其中，包含重组α-甘露糖苷酶的所述细胞培养物部分在包含多模态配体的树脂上经历层祈。2.根据权利要求I所述的方法，其中，包含重组α-甘露糖苷酶的所述细胞培养物部分是澄清的未稀释收获物。3.根据权利要求1-2中任一项所述的方法，其中，所述结合树脂的多模态配体是具有羧酸或磺酸基团的物质。4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中，所述结合树脂的多模态配体是式(1)、(11)或(III)的物质5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中，加载到包含多模态配体的树脂上的所述细胞培养物部分经历采用包含异丙醇、优选地包含至少1% (v:v)异丙醇，如包含至少2%、3%、4%、4. 5% (V:V)异丙醇、优选地包含至少5% (V:V)异丙醇的溶液的至少ー个洗涤步骤。6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中，包含重组α-甘露糖苷酶的第一洗脱物从包含多模态配体的树脂中使用包含こニ醇或丙ニ醇的水溶液洗脱。7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中，从包含多模态配体的树脂中获得的包含重组α-甘露糖苷酶的第一洗脱物进ー步经历包括以下步骤的方法i)施加包含α-甘露糖苷酶的部分至疏水性相互作用层析树脂以提供包含重组α-甘露糖苷酶的洗脱物，ii)使包含α-甘露糖苷酶的部分通过混合模式离子交换树脂以允许滞留杂质以便提供包含重组α-甘露糖苷酶的通流；和iii)使包含α-甘露糖苷酶的部分在阴离子交换树脂上经历层析以提供包含重组甘露糖苷酶的洗脱物。8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中，所述α-甘露糖苷酶具有选自以下的序列A). SEQ ID NO 2中所述的序列；B). Α)中的序列的类似物；C).A)或B)中的序列的子序列。9.一种组合物，其包含通过根据权利要求1-8中任一项所述的纯化方法可获得的α-甘露糖苷酶。10.一种用于分批补料生产或连续生产重组α-甘露糖苷酶的方法，其包括以下步骤a.在第O日用能够产生...

【专利技术属性】
技术研发人员：延斯·福格，克拉斯·安德松，塞西利亚·魏格尔特，皮亚·许登，海伦娜·雷乌特瓦尔，斯特凡·尼尔松，
申请(专利权)人：齐姆内克斯公司，
类型：
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