【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种促进胞外酶分泌的的方法和其应用，属于生物工程
技术介绍
在制备重组蛋白的众多表达系统中，大肠杆菌表达系统凭借培养条件简单，生长周期短，表达效率高等优势被认为是实现规模化制备重组蛋白的有效表达系统之一。根据最终定位方式，采用大肠杆菌表达系统表达 外源蛋白有三种形式胞内表达、周质表达以及胞外基质表达。与胞内及周质空间定位相比，重组蛋白分泌至胞外基质中，不仅有助于蛋白的折叠，降低包涵体的形成几率，而且免除了通过菌体破碎或周质释放来回收目的蛋白步骤，大大减少了宿主菌杂蛋白污染，提高了下游纯化效率。因此，基质表达在生物产品规模化生产中具有重要的意义。根据大肠杆菌的两层细胞膜结构，生理条件下，大肠杆菌共有I-V型5种分泌蛋白的方式。重组蛋白的基质分泌一般采用绝大部分大肠杆菌自身蛋白跨膜转运所采纳的由SecB介导的II型分泌途径。在大肠杆菌中，当目的蛋白N末端有一段约20-30个氨基酸残基组成的Sec途径特征性信号肽序列(如PelB、OmpA, MalE等)时，前体目的蛋白从核糖体中合成后即与转运伴侣蛋白SecB结合,开始SecB途径介导的蛋白胞内...
【技术保护点】
一种促进胞外酶基质分泌的方法，其特征在于，将NCBI编号为AAZ54921的T.fusca角质酶基因和目标蛋白基因在宿主菌大肠杆菌中共表达，发酵培养并收集发酵上清液。
【技术特征摘要】
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