一种花生基因组DNA的提取方法技术

本发明专利技术涉及一种花生基因组DNA的提取方法，其包括以下步骤：1）花生叶片磨成粉末；2）加入溶液A和终浓度为1mg/ml的RNA酶；3）加入KAc后进行离心分离；4）取步骤3）得到的上清液加入异丙醇，进行离心分离或者挑取出絮状物质，用体积浓度为75%的乙醇漂洗絮状物质，干燥，再用无菌ddH2O溶解干燥所得的沉淀物；上述步骤中所述溶液A是由1MTris-HCl、0.5MEDTA、5MNaCl、质量浓度为20%的SDS、H2O按体积比为1：1：1：1：6混匀，再按混合溶液体积的2%加入β-巯基乙醇、终浓度为40-50mg/l的RNA酶制成的。本发明专利技术的方法安全、快捷、高效，可满足不同的实验要求。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因组DNA的提取方法，具体涉及一种花生基因组DNA的提取方法。
技术介绍
花生又名落花生，属一年生草本植物，其含油量高，被人们誉为“植物肉”。除供食用外，还可用于印染、造纸工业等，是我国重要的油料和经济作物。我国的花生种植面积和生产总量均居世界前列在国际上具有很强的竞争力。但是，我国目前花生的种质资源相对有限，一些抗病抗逆的种质资源相对缺乏，尤其是抗黄曲霉品种。常规的杂交育种、诱变育种都很难有目的性地进行花生遗传基因改良。而转基因育种可以任意选择生产上的当家品种进行外源基因的导入，达到目的性状基因的转移和种质改良的目的。现有花生转基因育种的常用方法有农杆菌介导法和基因枪法。无论采用何种方法，提取组织培养的外植体的基因组DNA、对转化体进行分子鉴定从而筛选转化体都是必经的途径。由于花生体内含有的次生代谢物质较多，所以花生基因组的提取相对较难。目前广泛应用的技术方案有CTAB、酚类法大量提取，这些方法均存在以下缺陷1、对操作人员身体有害；2、需要较多的样品，步骤繁琐、耗时，对植株也有影响。植物基因组DNA的提取和鉴定是进行植物生物技术试验所必需的试验内容，高质量的植物本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种花生基因组DNA的提取方法，其特征在于包括以下步骤：1）将花生叶片磨成粉末；2）加入溶液A和终浓度为1mg/ml的RNA酶，充分混匀后静置；3）加入KAc充分混匀后进行第一次离心分离；4）取步骤3）得到的上清液加入异丙醇，充分混均，此时出现絮状的核酸，进行第二次离心分离或者挑取出絮状物质，然后用体积浓度为75%的乙醇漂洗絮状物质，漂洗后干燥，再用无菌的ddH2O溶解干燥所得的沉淀物；上述步骤中所述溶液A是由1M？Tris？HCl、0.5M？EDTA、5M？NaCl、质量浓度为20%的SDS、H2O按体积比为1：1：1：1：6混匀，再按混合溶液体积的2%加入β？巯基乙醇，最后加入终浓度为40...

【技术特征摘要】
1.一种花生基因组DNA的提取方法，其特征在于包括以下步骤 1)将花生叶片磨成粉末； 2)加入溶液A和终浓度为lmg/ml的RNA酶，充分混匀后静置； 3)加入KAc充分混匀后进行第一次离心分离； 4)取步骤3)得到的上清液加入异丙醇，充分混均，此时出现絮状的核酸，进行第二次离心分离或者挑取出絮状物质，然后用体积浓度为75%的乙醇漂洗絮状物质，漂洗后干燥，再用无菌的ddH20溶解干燥所得的沉淀物； 上述步骤中所述溶液A是由IM Tris-HCUO. 5M EDTA、5M NaCl、质量浓度为20%的SDS、H2O按体积比为I :1 1 :1 :6混匀，再按混合溶液体积的2%加入β-巯基乙醇，最后加入终浓度为40-50mg/l的RNA酶制成的。2.如权利要求I所述的花生基因组DNA的提取方法，其特征在于步骤I)花生叶片是用液氮研磨成粉末的。3.如权利要求I所述的花生基因组DNA的提取方法，其特征在于步骤2)中每克花生叶片粉末加入的...

【专利技术属性】
技术研发人员：温世杰，刘海燕，李洪杰，洪彦彬，梁炫强，
申请(专利权)人：广东省农业科学院作物研究所，山东圣丰种业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：