用于骨关节腔的透明质酸钠凝胶针剂及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种用于骨关节腔的透明质酸钠凝胶针剂及其制备方法，透明质酸钠凝胶针剂的一种制备方法是首先制备交联透明质酸钠凝胶和透明质酸钠凝胶，然后将交联透明质酸钠凝胶与透明质酸钠凝胶混匀消毒；另一种制备方法是先制备交联透明质酸钠干粉，将交联透明质酸钠干粉与透明质酸钠干粉混匀得到混合粉末后，溶胀、纯化、消毒后得到。本发明专利技术制备的用于骨关节腔的透明质酸钠凝胶针剂中交联剂残留低于2ppm，向骨关节腔注射后，不会出现因交联剂毒性产生的毒副作用，降解速度慢，正常情况下在关节腔中的停留时间可长达6个月。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及ー种透明质酸钠凝胶，具体涉及ー种。
技术介绍
骨关节炎(Osteoarthritis，0A)是骨科临床上的多发病和常见疾病，临床主要以关节疼痛、僵直以及活动受限为主要表现，骨关节炎的发病率随年龄的增加而递增。世界卫生组织统计，50岁以上的人群中，OA的发病率为50% ;而55岁以上的人群的发病率则上升为80%。有关机构对我国局部地区的流行病调查报告显示，55岁以上人群患有膝关节炎的表现者为60%，60岁以上人群的骨关节病患病率为78. 5%，65岁以上的老年人关节炎的发病率为85%。关节包括软骨、滑膜和关节囊。关节软骨的基本成分是软骨细胞和细胞外基质，其中软骨细胞只占1%，而细胞外基质占99%，细胞外基质中约3%为糖胺聚糖。透明质酸(Hyaluronic Acid,HA)是一种大分子的糖胺聚糖(Glycosaminoglycan ,GAG),广泛存在于生物体的各种组织中，它以组织细胞外混合物的形式广泛存在于人体所有组织，且高浓度存在于关节滑液和软骨中。已有研究证明关节疾病与滑液黏弹性降低密切相关，因此黏弹性补充疗法(Balazs等J. Rheumatol, 1993, 20 ;3 9),即通过向关节腔内注射外源性透明质酸治疗骨关节炎的方法，自问世起已取得革命性进展。透明质酸特异的粘弾性及流变学特性，对关节的意义尤为重要。HA赋予骨关节腔内的滑液非牛顿流体力学的特性和粘弾性。当关节处于低撞击频率时，滑液呈粘性溶液，对关节的滑膜组织、平面组织、韧带和胶原结构等行使润滑的功能，減少组织间的摩擦；当关节负重时，滑液中的低分子溶质以及水分自滑液压出至软骨基质中，使滑液转变成ー个具有几微米厚的凝胶状态，由流体转变为弾性体，在关节间隙充当缓冲垫，减轻关节承受的压力，对骨关节的软骨发挥保护作用。透明质酸作为关节滑液的重要组成部分，对维持滑液的正常功能具有极其重要的意义，使得关节软骨和滑液具有良好的弾性。在骨关节炎患者的关节滑液中，透明质酸钠的分子量、浓度和黏弹性均明显降低。通过向关节腔内直接给予高分子量的透明质酸钠，当外源性透明质酸钠在关节腔中长时间存在时，依靠软骨组织的自身修复作用，骨关节炎得以痊愈。但是现有的ー些产品，如日本生化学エ业株式会社的Artz、加拿大Bioniche公司的Suplazyn以及中国山东博士伦福瑞达的施沛特，由于代谢较快，在关节腔内停留时间较短，需要多次注射。多次注射不仅增加了刺激反应和感染的机会，对患者的生理和心理也是负担。HA分子中的羟基、羧基、N-こ酰胺基，可以对其进行化学修饰；化学修饰后的HA衍生物，不仅保留了 HA原有的生物相容性和细胞粘附性，同时与HA相比延长了在体内的存在时间。为了延长透明质酸钠在关节腔的停留时间，现有研究发现交联透明质酸或其钠盐克服了天然透明质酸易分散、易降解的缺陷，保留了良好的生物相容性，是目前比较理想的组织填充材料，例如瑞典Q-Med AB公司生产的缩水甘油醚交联的透明质酸凝胶Restylan系列和DuiOlane系列产品。但是上述包含交联透明质酸或其钠盐的产品中存在交联剂的残留，长期注射对人体存在安全隐患。另外，中国专利文献CN 101502675 A(申请号200810009190. 8)公开了ー种注射用含大分子水凝胶的透明质酸或其盐的混悬液及其制备方法，所述大分子化合物可以是交联多糖化合物，优选1，4- 丁ニ醇ニ缩水甘油醚(BDDE)交联的透明质酸产物。制备混悬液吋，首先制备大分子化合物的凝胶颗粒；然后将凝胶颗粒在等渗溶液中充分溶胀、平衡，得到水不溶性的、在等渗溶液中充分溶胀的大分子化合物含水凝胶颗粒；最后将前一步骤得到的水不溶性的、在等渗溶液中充分溶胀的大分子化合物含水凝胶颗粒与HA或其盐的等渗溶液混合均匀而得到混悬液。上述文献制备大分子水凝胶例如交联透明质酸钠时，是将透明质酸钠与含有交联剂BDDE的1%氢氧化钠溶液混合，于50°C反应3小时，用去离子水纯化后，加压使凝胶通过筛而收集凝胶颗粒，收集的凝胶颗粒在加入等渗PBS保温后，过200目筛而得到交联透明质酸钠凝胶。中国专利文献CN 101538377A (申请号200810034895. 5)公开了ー种交联透明质酸凝胶及其制备方法，先将透明质酸在碱性物质水溶液中搅拌混合，然后向其中加入交联齐U，于37°C 60°C下反应2 5小时，得到凝胶后用PBS缓冲液或去离子水浸泡清洗凝胶，除去PBS缓冲液或去离子水后，使交联透明质酸凝胶在压力下通过450 550 μ m的挤出孔得到微粒状凝胶；最后将微粒状凝胶与透明质酸混合得到所述透明质酸凝胶。上述两种制备交联透明质酸钠的方法均是在碱的水溶液中进行，存在交联透明质酸钠的水解问题；另外上述两种方法均没有进行交联透明质酸钠中残留BDDE的检测，不能确认凝胶中交联剂的残留情况；而且生成凝胶后，即便用去离子水和PBS纯化凝胶，部分残留在凝胶中的BDDE还是无法去除。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供ー种使用时停留时间较长且安全性较高的。实现本专利技术目的的技术方案是ー种用于骨关节腔的透明质酸钠凝胶针剂的制备方法，包括以下步骤 ①交联透明质酸钠凝胶的制备 a.将透明质酸钠干粉分散在由10 wt% 20 wt%的氢氧化钠水溶液和丙酮组成的混合溶液后获得透明质酸钠碱性混悬液，然后向透明质酸钠碱性混悬液中加入交联剂1，4_ 丁ニ醇ニ缩水甘油醚BDDE，混匀后获得反应物料，从而开始发生生成交联透明质酸钠的反应；搅拌状态下将反应物料于35°C 50°C保温5 8小时后反应结束，用浓盐酸调节反应后固液混合物料的PH值至7 ;其中所述反应物料中透明质酸钠的浓度为2wt% 5wt%，交联剂与透明质酸钠的质量比为(I I. 3) (I 1.8)。b.将步骤a得到的pH=7的固液混合物料过滤以除去液体，剰余的物料用丙酮洗涤至BDDE含量低于2ppm，剰余的物料包括白色粉末及透明的凝胶，然后将洗涤后的物料真空干燥获得水不溶性白色干粉即交联透明质酸钠粉末。c.将步骤b真空干燥获得的交联透明质酸钠粉末过筛分离，收集过筛的粉末。d.向步骤c收集的过筛的粉末中加入去离子水，使得交联透明质酸钠粉末充分溶胀，在室温15°C 35°C纯化6 10小时后，收集凝胶颗粒得到交联透明质酸钠凝胶。e.向步骤d收集的凝胶中加入等渗PBS缓冲 液，于室温15°C 35°C纯化6 10小时后，过滤除去PBS缓冲液，收集凝胶颗粒得到交联透明质酸钠凝胶待用。②透明质酸钠凝胶的配置将另外的透明质酸钠干粉在等渗PBS缓冲液中充分溶胀，过滤多余的PBS溶液后得到透明质酸钠凝胶待用。③混合及消毒将按照步骤①的方法获得的交联透明质酸钠凝胶和步骤②配置的透明质酸钠凝胶混合均匀，混匀得到的凝胶消毒后灌装于事先灭菌的一次性注射器中，用等渗PBS缓冲液定容后得到用于骨关节腔的透明质酸钠凝胶针剂。上述步骤①a中，所述的混合溶液在配置时，所述氢氧化钠水溶液与丙酮的体积比为(2 8) (4 6);步骤①a的反应液中透明质酸钠的浓度为3 wt% 4wt%。上述步骤①c中交联透明质酸钠粉末过筛分离采用35目 45目的筛网；步骤①d中向过筛的交联透明质酸钠粉末中加入去离子水时，去离子水加入后干粉吸水膨胀形成凝胶，去离子本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于骨关节腔的透明质酸钠凝胶针剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：①交联透明质酸钠凝胶的制备：a．将透明质酸钠干粉分散在由10？wt%～20？wt%的氢氧化钠水溶液和丙酮组成的混合溶液后获得透明质酸钠碱性混悬液，然后向透明质酸钠碱性混悬液中加入交联剂1,4？丁二醇二缩水甘油醚BDDE，混匀后获得反应物料，从而开始发生生成交联透明质酸钠的反应；搅拌状态下将反应物料于35℃～50℃保温5～8小时后反应结束，用浓盐酸调节反应后固液混合物料的pH值至7；其中所述反应物料中透明质酸钠的浓度为2wt%～5wt%，交联剂与透明质酸钠的质量比为（1∶1.3）～（1∶1.8）；b．将步骤a得到的pH=7的固液混合物料过滤以除去液体，剩余的物料用丙酮洗涤至BDDE含量低于2ppm，剩余的物料包括白色粉末及透明的凝胶，然后将洗涤后的物料真空干燥获得水不溶性白色干粉即交联透明质酸钠粉末；c．将步骤b真空干燥获得的交联透明质酸钠粉末过筛分离，收集过筛的粉末；d．向步骤c收集的过筛的粉末中加入去离子水，使得交联透明质酸钠粉末充分溶胀，在室温15℃～35℃纯化6～10小时后，收集凝胶颗粒得到交联透明质酸钠凝胶；e．向步骤d收集的凝胶中加入等渗PBS缓冲液，于室温15℃～35℃纯化6～10小时后，过滤除去PBS缓冲液，收集凝胶颗粒得到交联透明质酸钠凝胶待用；②透明质酸钠凝胶的配置：将另外的透明质酸钠干粉在等渗PBS缓冲液中充分溶胀，过滤多余的PBS溶液后得到透明质酸钠凝胶待用；③混合及消毒：将按照步骤①的方法获得的交联透明质酸钠凝胶和步骤②配置的透明质酸钠凝胶混合均匀，混匀得到的凝胶消毒后灌装于事先灭菌的一次性注射器中，用等渗PBS缓冲液定容后得到用于骨关节腔的透明质酸钠凝胶针剂。...

【技术特征摘要】
1.一种用于骨关节腔的透明质酸钠凝胶针剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤 ①交联透明质酸钠凝胶的制备 a.将透明质酸钠干粉分散在由10wt% 20 ￥七％的氢氧化钠水溶液和丙酮组成的混合溶液后获得透明质酸钠碱性混悬液，然后向透明质酸钠碱性混悬液中加入交联剂1，4- 丁二醇二缩水甘油醚BDDE，混匀后获得反应物料，从而开始发生生成交联透明质酸钠的反应；搅拌状态下将反应物料于35°C 50°C保温5 8小时后反应结束，用浓盐酸调节反应后固液混合物料的pH值至7 ;其中所述反应物料中透明质酸钠的浓度为2wt% 5wt%，交联剂与透明质酸钠的质量比为(I I. 3) (I 1.8); b.将步骤a得到的pH=7的固液混合物料过滤以除去液体，剩余的物料用丙酮洗涤至BDDE含量低于2ppm，剩余的物料包括白色粉末及透明的凝胶，然后将洗涤后的物料真空干燥获得水不溶性白色干粉即交联透明质酸钠粉末； c.将步骤b真空干燥获得的交联透明质酸钠粉末过筛分离，收集过筛的粉末； d.向步骤C收集的过筛的粉末中加入去离子水，使得交联透明质酸钠粉末充分溶胀，在室温15°c 35°C纯化6 10小时后，收集凝胶颗粒得到交联透明质酸钠凝胶； e.向步骤d收集的凝胶中加入等渗PBS缓冲液，于室温15°C 35°C纯化6 10小时后，过滤除去PBS缓冲液，收集凝胶颗粒得到交联透明质酸钠凝胶待用； ②透明质酸钠凝胶的配置将另外的透明质酸钠干粉在等渗PBS缓冲液中充分溶胀，过滤多余的PBS溶液后得到透明质酸钠凝胶待用； ③混合及消毒将按照步骤①的方法获得的交联透明质酸钠凝胶和步骤②配置的透明质酸钠凝胶混合均匀，混匀得到的凝胶消毒后灌装于事先灭菌的一次性注射器中，用等渗PBS缓冲液定容后得到用于骨关节腔的透明质酸钠凝胶针剂。2.根据权利要求I所述的用于骨关节腔的透明质酸钠凝胶针剂的制备方法，其特征在于步骤①a中，所述的混合溶液在配置时，所述氢氧化钠水溶液与丙酮的体积比为(2 : 8) (4 : 6);步骤①a的反应液中透明质酸钠的浓度为3 wt% 4wt%。3.根据权利要求I所述的用于骨关节腔的透明质酸钠凝胶针剂的制备方法，其特征在于步骤①c中交联透明质酸钠粉末过筛分离采用35目 45目的筛网；步骤①d中向过筛的交联透明质酸钠粉末中加入去离子水时，去离子水加入后干粉吸水膨胀形成凝胶，去离子水的加入量保证能完全没过干粉吸水后形成的凝胶；并且纯化过程中隔55min SOmin更换去离子水。4.根据权利要求I所述的用于骨关节腔的透明质酸钠凝胶针剂的制备方法，其特征在于步骤③中，交联透明质酸钠凝胶和透明质酸钠凝胶的质量比为8 : 2或者6 : 4，混匀得到的凝胶消毒后，取其中45g 50g灌装于事先灭菌的一次性注射器中，再用等...

【专利技术属性】
技术研发人员：何浩明，贾超，张峰，赵晓斌，
申请(专利权)人：常州药物研究所有限公司，
类型：发明
国别省市：