具有CCR10 拮抗活性的模板固定的拟肽制造技术

如说明书和权利要求中定义的通式(I)的新的模板固定的β-发夹拟肽，其中单一元件T或P是以任一方向连接的α-氨基酸残基，取决于它们在链中的位置，具有拮抗受体CCR10的性质。它们可用作药物来治疗或预防真皮和皮肤病症、炎症、过敏性病症、呼吸疾病、胃肠道疾病、眼病、血液病和癌症。这些β-发夹拟肽可通过基于混合的固相和溶液相合成策略的方法来制备。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有CCR10拮抗活性的模板固定的拟肽本专利技术提供了拟肽，其中掺入了如下文定义的4个a-氨基酸残基的链，所述拟肽附着至模板，所述模板提供￠-发夹样构象的特异性结构限制。这些模板固定的￠-发夹模拟物具有针对CCRlO受体的拮抗活性，因此对于多种疾病和病症的治疗是有用的，例如炎性皮肤疾病、过敏性哮喘、胃肠道/结肠疾病、某些黑素瘤、皮肤淋巴瘤，或由CCRlO的活性介导或维持的其它病况。本专利技术还涉及使用这些化合物治疗如上所述的多种疾病和病症的方法，涉及包含这些化合物的药物组合物和形式，以及用于制备和生产这些化合物及其中间体的有效率的方法。很多医学相关的生物学过程是通过涉及趋化因子及其受体的信号转导所介导的，例如，白细胞向炎性位点的组织特异性募集。在血液中存在记忆T细胞的子集，其形态特征在于表达皮肤淋巴细胞抗原(CLA)，其优先归巢至真皮内皮细胞和相关组织。最近有研究表 明，CLA+记忆T细胞也表达趋化因子受体CCR10，另外，该受体的特异性配体CCL27在可检测到富含表达这些CCRlO的细胞的组织中显著上调。这说明CCR10/CCL27相互作用在CLA+记忆T细胞向例如炎性组织损伤的组织特异性运输中具有重要意义。除了在CLA+T细胞上之外，还表明CCRlO在黑素细胞、真皮成纤维细胞、皮肤角质形成细胞、微血管内皮细胞、兰格汉斯细胞和某些类型的组织例如人心脏或结肠中的表达。在表皮上观察到丰富的CCL27的表达(主要由角质形成细胞表达)，其被促炎性介导子例如TNF-a和IL-I ^紧密调控。虽然在角质形成细胞中表达，但是CCL27对于细胞外基质蛋白具有高亲和性，因此，在细胞外扩散之后，也在皮肤血管表皮细胞上呈递以參与白细胞阻遏。越来越多的研究提供了证据证明CCR10/CCL27相互作用对于炎性或感染皮肤或粘膜组织中的生理应答过程中T细胞子集的迁移和定位具有作用(J. Morales et al. , Proc. Nat. Acad. Sci. , 1999, 96, 14470-14475 ; B. Homey etal.，J. Immunol.，2000，164，3465-3470; B. Homey et al. , Nature Medicine, 20 02, 8,157-165;B. Eksteen et al.，J. Immunol.，2006，177，593-603)。在病理状况例如牛皮癣、特应性皮炎或移植物抗宿主病中，发现CCL27的表达相对于在正常皮肤或组织活检中显著上调。因此，可以观察到募集的CCRlO+淋巴细胞的明显聚集(B. Homey, Current Drug Targets - Inflammation & Allergy, 2004, 3, 169-174;B. Homeyet al. , J. Allergy Clin. Immunol. , 2006, 118, 178-189; N. Annels et al. , Brit. J. ofHaematology, 2006, 133，538-549)。在以镍刺激皮肤之后，在镍过敏性人员中观察到了相同的效应。在两个单独的体内概念证明型研究中(分别使用野生型小鼠中的DNFB诱导和卵白蛋白DTH模型)，相同的作者显示在以针对CCL27的功能阻断抗体处理之后，白细胞募集显著下降，伴随较低的肿胀。更多最近的发现強烈表明CCR10的另ー配体/受体相互作用(与粘膜结合的上皮趋化因子CCL28的相互作用)对于炎性呼吸道和皮肤疾病的病理发生具有重大贡献，如在鼠模型中的过敏性哮喘和儿童中的特应性皮炎所证明(B. P. Mahon, Immunology Letters, 2006, 103, 92-100;M. H. M. Ezzat et al. , Int.J. of Dermatology,2009，48，822-829;A.Zlotnik et al. , J. of Biological.Chem.，2000，275，22313-22323)。我们在该领域中的研究表明，基于RNA定量，与健康皮肤相比，在黑素瘤样品中CCRlO的表达增加高达800倍。与不表达CCRlO的B16细胞相比，这不仅导致小鼠B16黑素瘤细胞生长上的优势，还导致向引流淋巴结的转移的显著增加。在体外，CCRlO被CCL27激活会导致PI3K的激活，总体下游效果为保护表达CCRlO的B16细胞免于肿瘤特异性细胞毒性T细胞(T. Murakami et al. , J. Exp. Med. , 2003, 198, 1337-1347; X. Wu et al. , Curr. Pharm.Design, 2009, 15, 742-757;0. Simonetti et al. , Eur. J. of Cancer, 2006，42，1181-1187)。概念证明型研究，如上文描述的那些，高度推荐跨膜G蛋白偶联受体(GPCR) CCRlO作为治疗多种疾病状况的靶标。虽然在过去15年中，有接近350种靶向GPCR受体的治疗剂已经成功推向市场(Th. Klabunde, G. Hessler, ChemBioChem 2002, 3, 928-44;G. Vauquelinet al. Fundam. Clin. Pharmacol. 2005, 19, 45-56),但是仍然需要解决数个毒理学问题,其主要是由于那些药物中的ー些药物缺乏选择性造成的。显然，在设计这些试剂时需要不同的理念，以解决目前的问题，并产生用于治疗或预防与该靶标相关的疾病或病况的有效且安全的药物。 本专利技术提供了新的化学实体，其潜在用作GPC受体CCRlO的有力的、选择性的和可作药物的配体。在下文描述的化合物中，利用了新的策略以稳定化显示出针对CCRlO受体的选择性拮抗活性的骨架环拟肽中的￠-发夹构象。这包括将天然或非天然生物聚合物的环序列移植到模板上，所述模板的功能是限制肽环骨架为发夹形状。文献中已经描述了与模板结合的发夹拟肽(D, Obrecht, M. Altorfer, J.A. Robinson, Adv. Med. Chem. 1999, 4, 1-68; J. A. Robinson, Syn. Lett. 2000, 4, 429-441)，并且已经建立了使用组合及平行合成方法产生￠-发夹拟肽的手段(L. Jiang, K. Moehle1B.Dhanapal, D. Obrecht, J. A. Robinson, Helv. Chim. Acta. 2000, 83, 3097-3112)。这些方法能够合成并筛选大的发夹模拟物的文库，这继而显著促进了结构-活性研究，因此促进了具有有力的、尤其是选择性的激动或拮抗活性的新分子的发现。在本领域中极少有研究描述与模板相连的四肽作为GPCR尤其是CCR10的激动剂和/或拮抗剂(W02008092281)。本专利技术现在提供了备选的新型化合物，其在结构上显著不同，令人惊讶地显示出关键药学參数例如生物学效カ、稳定性或选择性的实质改善。通过本文描述的方法获得的P -发夹拟肽可用作CCR10的拮抗剂，因此作为例如牛皮癣、特应性皮炎、接本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2009.11.20 EP PCT/EP2009/0655721.通式⑴的化合物2.权利要求I的化合物，其中R24不是杂芳基或杂芳基烷基。3.权利要求I或2的化合物，其中 T1 是 DPro; DPip;或 nAze; T2是下列式之一的L或D a -氨基酸4.根据权利要求3的化合物，其中T1 是 DPro; DPip;或 nAze; T2是下列式之一的L或D a -氨基酸5.根据权利要求4的化合物，其中 P1和P3独立地是His;His (Me) ;His (Bn) ;hHis ;Phe ;Phe (2C1) ;Phe (3C1) ;Phe(4Cl) ;Phe(3，4Cl2) ;Phe(2F) ; Phe (3F) ; Phe (4F) ; Phe (3，4F2) ; Phe (3CN) ; Phe (4CN) ; Phe (2CF3) ; Phe (3CF3) ; Phe (4CF3) ; Phe (3，4 (CF3) 2) ; Phe (4C00Me) ; hPhe ; Thi ; Tza; Trp ; Trp (50H) ; Trp (5C1) ; Trp (6C1) ; Trp (5，6C12) ; Trp (5Br) ; Trp (6Br) ; Trp (6CF3) ; Trp (7Aza) ; hTrp; Tyr; Tyr (Me) ; Tyr (Ph) ; Tyr (Bn);Tyr(40HPh);Tyr(4Me0C0Bn);hTyr;Thr(Bn);Ser(Bn);2Pal;3Pal;4Pal;Phg;Ala (2 呋喃基);Ala (3 呋喃基);Ala (2Quin) ; Ala (3Quin) ; Ala (4Quin) ; Ala (tBu) ; Gly (tBu) ; INal; 2NaI;Nle(60Bn);Cha;hCha;Bip;Bbta;或 OctG; P2 是 Aib ; Ac3c ; Ac4c ; Cyp ; Chx; Chx (4oxo) ; Ac7c ; Ac8c ; DAtc ; lAtc ; dlAtc ; Deg;或4，4-AC-ThioTHP;P4 是 Arg;hArg; Ala(Ppz) ; Thr; alIoThr;Gln;Gln (Me) ;Gln (Me2) ;Gln (iPr) ; Gln (cPr);Gln (iBu) ; Glu (Ala) ; Glu (cAla) ; Glu (Arg) ; Glu (cArg) ; Glu (Glu) ; Glu (Gly) ; Glu (His);Glu(Leu) ; Glu (cLeu) ; Glu (2Nal) ; Glu (Sar) ; Glu (Trp) ; Glu (DTrp) ; Cys ; hCys ; Ser; hSer; Ser (Me) ; hSer (Me) ; Thr; Met; Met (O2) ; Lys ; hLys ; Lys (Ac) ; Lys (Me) ; Lys (Bz) ; Lys (Nic) ; Lys (40xa) ; Lys ((5R) OH) ; Orn; Dap; Dap (MeO (CH2) 2) ; Dap (CONH2) ; Dap ((MeO (CH2) 2) 2) ; Dab (Sar);Dab; Dab (Ac) ; Dab (Ala) ; Dab (dAI a) ; Dab (Arg) ; Dab (cArg) ; Dab (Dab) ; Dab (Glu) ; Dab (Gly);Dab (His) ; Dab (Leu) ; Dab (cLeu) ; Dab (MEMCO) ; Dab (4Me2NPhS02) ; Dab (MeO (CH2) 2NHCO) ; Dab ((MeO(CH2)2) (Me)NCO) ; Dab (MePpzCO) ; Dab (MeSO2) ;Dab (morphCO) ;Dab(2Nal) ; Dab (Trp) ;Dab (DTrp) ; Dab (Sar);或 Dab(SN13);或 His;His(Me);hHis;2Pal;3Pal;4Pal;h2Pal;h3Pal;h4Pal;Trp;Ala (IIm);Ala(2Im);hAla(IIm) ;hAla(2Im);或 Ala(2 啼唳); 或其药学上可接受的盐。6.根据权利要求5的化合物，其中T1 是 DPro; DPip;或 DAze;T2 是 Pro ; DPro ; Oic ; Pip ; Tie ; Tic (70H) ; Thz ; Thz (5，5Me2) ; Pro ( (4S)F) ; Pro (5，5Me2) ; Pro ((4S) cHex) ; Pro ((4R) Ph) ; Pro ((4R) Bn) ; Pro ((4R) 4BrBn) ; Pro ((.4R)3CNBn);Hyp (Ph);Hyp (Bn);Hyp(4BrBn);Hyp(3CNBn) ;Hyp (4CNBn);Hyp (CONHPh);或(4S)-Hyp (Bn); P1和P3独立地是 Phe; Phe (4C1) ; Phe (4F) ; Phe (4CN) ; Phe (3CF3) ; Phe (4CF3) ; Phe (4C00Me) ; Trp; Trp (50H) ; Trp (6C1) ; Tyr; Tyr (Me) Tyr (Ph) ; Tyr (40HPh) ; Tyr (4Me0C0Bn) ; hTyr; Ala (2呋喃基);Ala(2Quin) ; 2Nal;Nle (60Bn) ;DLTrp (7Aza) ; Cha;Bip;Bbta;或 OctG; P2 是 Aib;Ac3c;Ac4c;Cyp;Chx;Chx (4oxo) ;Ac7c;Ac8c; DLAtc;D eg;或4，4-AC-ThioTHP; P4 是 Arg; hArg; Ala (Ppz) ; Thr; al IoThr; Gln; Gln (iPr) ;Gln(cPr) ; Glu (Ala) ; Glu (dAIa) ; Glu (Arg) ; Glu (cArg) ; Glu (Glu) ; Glu (Gly) ; Glu (His) ; Glu (Leu) ; Glu (cLeu) ;Glu (2Nal);Glu (Sar) ; Glu (Trp) ; Glu (cTrp) ; Cys; hCys; Ser; hSer; Ser (Me) ; hSer (Me) ; Thr; Met; Met (O2);Lys; hLys; Lys (Ac) ; Lys (Me) ; Lys (Bz) ; Lys (Ni...

【专利技术属性】
技术研发人员：F·荣，F·O·贡贝尔，D·奥伯莱希特，C·比桑，S·巴泰勒米，A·勒德雷尔，E·舍瓦利耶，
申请(专利权)人：波利弗尔股份公司，
类型：发明
国别省市：