本发明专利技术提供一种用于测定蛋白质总浓度的可视化生物传感器装置，包括：电泳管；两个四通玻璃管，第一端口和电泳管的两端相连；两个恒流泵，其一端分别和两个四通玻璃管的第二端口相连；阳极电解液槽和阴极电解液槽，分别和两个恒流泵的另一端相连；阳极废液槽和阴极废液槽，分别和两个四通玻璃管的第三端口相连；电压供给装置，和两个四通玻璃管的第四端口相连；数据记录装置，位于电泳管的一侧。本发明专利技术基于MRBT技术，通过记录单位时间内移动反应界面（MRB）的相对距离不同来测定蛋白质总浓度。经过实验验证不同非蛋白氮（NPN）的加入对实验结果无明显影响，能够排除非蛋白氮对蛋白质浓度测定的干扰。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及分析化学
，具体涉及的是一种用于测定蛋白质总浓度的可视化生物传感器装置。
技术介绍
用于测定不同生物样品中蛋白质浓度的方法有很多，比如凯氏定氮法(Kjeldahl, J. Z.，1883，Anal. Chem.，22，366-382.)，双缩脲法(Cole, E. R.，1969，RevPure and AppI. Chem. , 19, 109-130. ), Lowry 法(Lowry, 0. H. , Rosebrough, N.J. , Farr, A. , Randal I, R. , 1951, J. Biol. Chem. , 193, 265-275. )，BCA 法(Smith, P.K. , Krohn, R. I. , Hermanson, G. T. , MalIia, A. K. , Gartner, F. H. , Provenzan, M. D. , Fujimoto, E. K. , Goeke, N. M. , Olson, B. J. , Klenk, D. , 1985, Anal. Biochem. , 150, 76-85.),紫外吸收法(Layne, E.，1957，Method. Enzymol.，3，447-454. ; Warburg, 0.，Christian,ff.，1942, Biochem. Z.，310，384-421.)，以及考马斯亮蓝法(Bradford, M.，1976, Anal.Biochem.，72，248-254.)等。每种方法都有各自的优点和缺点。例如，对于经典的凯氏定氮法，它的不足除了所需时间(3-5h)较长外，还在于不能排除三聚氰胺等非蛋白氮(nonprotein nitrogen, NPN)对于样品中蛋白浓度测定的干扰,测定的蛋白质浓度结果会比实际值偏高，而且食品中掺杂的三聚氰胺等NPN杂质对人体健康造成的危害已经有广泛的报道(Gossner, C. M-E. , Schlundt, J. , Embarek, P. B. , Hird, S. , Lo-Fo-ffong, D. , Betran,J. J. 0. , Teoh, K. N. , Tritscher, A. , 2009, Environ. Health Perspect. , 117, 1803 - 1808.)。生物传感器是一种使用物理化学检测器来选择性的检测可以与具有生物活性成分相结合的样品分析装置。生物传感器作为一种简单的，便携的，经济且高效的分析工具已广泛用于蛋白质测定。其中测定蛋白质浓度的生物传感器有电化学生物酶反应传感器(Setford, S. J.，White,S. F.，Bolbot,J. A.，2002,Biosens. Bioelectron.，17,79-86.)，白激发玻璃悬臂式传感器(Campbell, G. A. , Mutharasan, R. , 2005, Biosens. Bioelectron.,21, 597-607.),光学相移传感器(Ozkumur, E.，Yalfm，A.，Cretich, M. , Lopez, C. A.,Bergstein, D. A. , Goldberg, B. B. , 2009, Biosens. Bioelectron. , 25,167-72.),多配体阵列传感器(Andersson, 0. , Nikkinen, H. , Kanmert, D. , Enander, K. , 2009, Biosens.Bioelectron. , 24, 2458-64.)，比色法探头传感器(Hou, C.，Dong, J.，Zhang, G.，Lei, Y.，Yang, M.，Zhang, Y. , 2011, Biosens. Bioelectron. , 26, 3981-6.)等。此外，多种传感器已应用于测定三聚氰胺等非蛋白氮(NPN),如SPR光学传感器(Fodey, T. L. , Thompson, C. S.,Traynor, I. M. , Haughey, S. A. , Kennedy, D. G. , Crooks, S. R. H. , 2011, Anal. Chem. ,83,5012-5016.)，纳米金颗粒传感器(Cao, Q.，Zhao, H.，He, Y.，Li，X.，Zeng, L.，Ding, N.，Wang, J.，Yang, J.，Wang, G.，2010, Biosens. Bioelectron.，25, 2680-2685.)，以及电化学传感器(Zhu, H. , Zhang, S. , Li, M. , Shao, Y. , Zhu, Z. ,2010, Chem. Commun. , 46, 2259-2261.) 坐寸o尽管已经有很多生物传感器用于测定蛋白质浓度或者检测食品中三聚氰胺等NPN杂质，但是到目前为止还没有用于定量测定蛋白质总浓度以及同时避免非蛋白氮(NPN)对蛋白质浓度检测干扰的可视化生物传感器。
技术实现思路
本专利技术的目的就是针对以上存在的问题，提供一种用于测定蛋白质总浓度的可视化传感器装置，该装置基于移动反应界面滴定(moving reaction boundary titration,MRBT)技术，通过记录单位时间内移动反应界面(MRB)的相对距离不同来测定蛋白质总浓度。经过实验验证不同非蛋白氮(NPN)的加入对实验结果无明显影响，能够排除非蛋白氮对蛋白质浓度测定的干扰。为了实现上述目的，本专利技术提出一种用于测定蛋白质总浓度的可视化生物传感 器装置，包括电泳管，水平放置于一操作平台上；两个四通玻璃管，位于所述电泳管的两侧，且两个所述四通玻璃管的第一端口和所述电泳管的两端相连；两个恒流泵，其一端分别和两个所述四通玻璃管的第二端口相连；阳极电解液槽和阴极电解液槽，分别和两个所述恒流泵的另一端相连；阳极废液槽和阴极废液槽，分别和两个所述四通玻璃管的第三端口相连；电压供给装置，和两个所述四通玻璃管的第四端口相连；数据记录装置，位于所述电泳管的一侧。可选的，所述电压供给装置包括电源和一对电极，所述电极放置于所述四通玻璃管的第四端口中，且所述电极通过香蕉插头、香蕉插座和导线分别和所述电源的正负两极相连。可选的，所述的电极为金属钼电极、金电极或石墨电极。可选的，所述数据记录装置包括相机支架、数码相机、所述操作平台上的刻度标尺和提供光源的白光板，其中所述数码相机通过所述相机支架垂直置于所述电泳管上方，所述刻度标尺位于所述电泳管下方，所述白光板位于所述刻度标尺下方。可选的，还包括凝胶，位于所述的电泳管中，所述凝胶包含聚丙烯酰胺凝胶、蛋白质溶液、背景电解质溶液和指示剂。可选的，所述聚丙烯酰胺凝胶的组成包括丙烯酰胺、N-N’ -甲叉双丙烯酰胺、过硫酸铵和四乙基乙二胺。可选的，所述聚丙烯酰胺凝胶浓度范围为12.0%_18.0%，交联度范围为3. 0%-5. 0%。可选的，所述指示剂为酸碱指示剂。可选的，所述阳极电解液槽中包括背景电解质溶液，且所述阳极电解液槽中的背景电解质溶液的成分和离子强度与所述电泳管本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种用于測定蛋白质总浓度的可视化生物传感器装置，其特征在于，包括 电泳管，水平放置于ー操作平台上； 两个四通玻璃管，位于所述电泳管的两侧，且两个所述四通玻璃管的第一端口和所述电泳管的两端相连； 两个恒流泵，其一端分别和两个所述四通玻璃管的第二端ロ相连； 阳极电解液槽和阴极电解液槽，分别和两个所述恒流泵的另一端相连； 阳极废液槽和阴极废液槽，分别和两个所述四通玻璃管的第三端ロ相连； 电压供给装置，和两个所述四通玻璃管的第四端ロ相连； 数据记录装置，位于所述电泳管的ー侧。2.根据权利要求I所述的生物传感器装置，其特征在于所述电压供给装置包括电源和一对电极，所述电极放置于所述四通玻璃管的第四端口中，且所述电极通过香蕉插头、香蕉插座和导线分别和所述电源的正负两极相连。3.根据权利要求2所述的生物传感器装置，其特征在于所述的电极为金属钼电极、金电极或石墨电极。4.根据权利要求I所述的生物传感器装置，其特征在于所述数据记录装置包括相机支架、数码相机、所述操作平台上的刻度标尺和提供光源的白光板，其中所述数码相机通过所述相机支架垂直置于所述电泳管上方，所述刻度标尺位于所述电泳管下方，所述白光板位于所述刻度标尺下方。5.根据权利要求I所述的生物传感器装置，其特...
【专利技术属性】
技术研发人员：曹成喜，王后禹，郭陈刚，蕫靖宇，张薇，樊柳荫，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：
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