公开的是：HLA-A*1101限制的WT1肽，具体而言为含有由WT1蛋白质9个邻接氨基酸残基组成的氨基酸序列的肽，能够结合HLA-A*1101分子，并且具有诱导CTL的能力；包含两个肽单体的肽二聚体，所述肽单体各自包含含有至少一个半胱氨酸残基且来自WT1蛋白质的由9个邻接氨基酸组成的氨基酸序列，其中两个肽单体通过二硫键彼此结合，且所述肽二聚体能够结合HLA-A*1101分子并且具有诱导CTL的能力；编码该肽的多核苷酸；含有肽或肽二聚体的用于治疗和/或预防癌症的药物组合物；等等。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及HLA_A*1101限制的WTl肽，具体而言为含有由WTl蛋白质9个邻接氨基酸组成的氨基酸序列的肽，其中该肽具有结合HLA-AiIlOl分子的能力，并且具有诱导CTL的能力。本专利技术也涉及具有结合HLA-AiIlOl分子的能力并且具有诱导CTL的能力的肽ニ聚体，其中两个肽单体通过ニ硫键彼此結合，所述肽单体各自含有由WTl蛋白质9个邻接氨基酸组成并且含有至少ー个半胱氨酸残基的氨基酸序列。此外，本专利技术涉及编码该肽的多核苷酸、含有其的用于治疗和/或预防癌症的药物组合物等。
技术介绍
WTl基因(Wilms氏肿瘤I基因)被鉴定为负责儿童肾癌Wilms肿瘤的基因(非专利文件I和2)。WTl是具有锌指结构的转录因子。最初，认为WTl基因是肿瘤抑制基因。然而，后来的研究(非专利文件3、4、5和6)显示WTl基因相反在造血肿瘤和实体癌中起到癌基因的功能。WTl基因在许多类型的恶性肿瘤中高水平表达。于是，已检查无突变的WTl基因产物(其是自身蛋白质)是否在活体中具有免疫原性。结果掲示，在肿瘤细胞中高水平表达的衍生自WTl基因的蛋白质通过细胞内加工进行片段化，产生的肽与MHC I类分子形成复合物，且该复合物被呈递在细胞表面，而识别这种复合物的CTL可以通过肽接种诱导(非专利文件7、8和9)。在以WTl肽或WTl cDNA免疫的小鼠中也显示，表达WTl基因的移植的肿瘤细胞以高概率被排斥(非专利文件7和10)，然而生理上表达WTl基因的正常组织没有被所诱导的CTL损伤(非专利文件7)。使用人细胞的体外实验显示，当使用Dbl26肽或WH187 肽(SEQ ID No 1 的氨基酸 187-195，SLGEQQYSV)刺激具有 HLA_A*0201 的人外周血单核细胞时，WTl特异性CTL得到诱导，而诱导的CTL对内源性高水平表达WTl基因的肿瘤细胞具有特异的细胞毒活性，且这种CTL的细胞毒活性是HLA-A2限制的(非专利文件11)，其中所述Dbl26肽或WH187肽具有结合人MHC I类分子之一 HLA_A*0201分子的高能力。使用与HLA-A*2402(最常见于日本人HLA-A等位基因)匹配的WTl肽(WT1235 ；SEQ ID No 1的氨基酸235-243，CMTWNQMNL)的人细胞体外实验显示，WTl特异性CTL(TAK-I)得到诱导(非专利文件12)，而诱导的CTL不抑制正常造血干细胞的集落形成活性，所述正常造血干细胞部分生理上表达WTl基因(非专利文件12和13)。这些报告强烈提示，WTl特异性CTL不仅在小鼠而且在人类中是可诱导的，这种CTL对以高水平表达WTl基因的肿瘤细胞具有细胞毒活性，但是对生理上表达WTl基因的正常细胞不具有细胞毒活性(非专利文件7、10、 11,12 和 13)。WTl基因产物作为核蛋白存在，并在细胞质中由蛋白酶体加工以片段化为肽。片段化的肽由TAP (抗原肽转运体)分子转运到内质网腔中，与MHC I类分子形成复合物，并且呈递在细胞表面上。作为CTL前体细胞经TCR识别WTl肽-MHC I类分子复合物的結果，WTl特异性CTL得到诱导，从而对通过MHC I类分子呈递WTl基因产物的肿瘤细胞施加细胞毒作用(非专利文件7、8和9)。于是，至少要求用于靶向WTl基因产物的癌症免疫治疗中的WTl肽是在活体中与MHC I类分子结合的形式。然而，MHC I类分子是多样的，与各自MHC I类分子结合的WTl肽的氨基酸序列彼此不同。因此，要求提供与MHC I类各亚型匹配的肽。然而，迄今为止仅仅已知HLA-A*2402分子、HLA_A*0201分子、HLA_A*2601分子和HLA_A*3303分子限制的肽是HLA分子限制的WTl肽(分别见专利文件I、非专利文件11、专利文件2和专利文件3)。因此，需要发现HLA-A*1101限制的WTl肽。专利文件I :W0 2003/106682专利文件2 W0 2005/095598专利文件3 :日本专利申请号2006-45287 非专利文件I =Daniel A. Haber 等人，Cell. 1990 Jun 29 ；61 (7) :1257-69.非专利文件2 Call KM 等人，Cell. 1990 Feb 9 ；60(3) :509-20.非专利文件3 =Menke AL 等人，Int Rev Cytol. 1998 ；181 :151-212.综述。非专利文件4 =Yamagami T 等人，Blood. 1996 Apr I ；87(7) :2878-84.非专利文件5 =Inoue K 等人，Blood. 1998 Apr 15 ；91(8) :2969-76.非专利文件6 =Tsuboi A 等人，Leuk Res. 1999 May ；23(5) :499-505.非专利文件7:0ka Y 等人，J Immunol. 2000 Feb 15 ；164(4) :1873-80.非专利文件8 :Melief CJ 等人，Immunol Rev. 1995 Jun ; 145 :167-77.非专利文件9 Ritz J, J Clin Oncol. 1994 Feb ；12(2) :237-8.非专利文件10 =Tsuboi A 等人，J Clin Immunol. 2000 May ；20(3) :195-202.非专利文件11 0ka Y 等人，Immunogenetics. 2000 Feb ；51 (2) :99-107.非专利文件12 =Ohminami H 等人，Blood. 2000 Jan I ；95(1) :286-93.非专利文件13 Gao L 等人，Blood. 2000 Apr I ；95(7) :2198-203.
技术实现思路
本专利技术拟解决的问题本专利技术拟解决的问题是提供HLA-AiIlOl分子限制的且包含WTl蛋白质氨基酸序列的肽、编码其的多核苷酸、以及包含其的用于治疗和/或预防癌症的药物组合物等。解决问题的方法作为考虑到上述情况的大量研究的结果，本专利技术人已发现，在各自含有由WTl蛋白质9个邻接氨基酸组成的氨基酸序列的肽中，各自具有结合HLA-A*1101分子的能力的肽能够以高比率诱导WTl特异性CTL。因此，本专利技术得以完成。本专利技术提供(I)含有由WTl蛋白质9个邻接氨基酸组成的氨基酸序列的肽，其中该肽具有结合HLA-AiIlOl分子的能力，并且具有诱导CTL的能力；(2)根据⑴的肽，其中氨基酸序列第9位氨基酸是Lys或Arg ；(3)根据(I)的肽，其中氨基酸序列选自Ala Ala Gly Ser Ser Ser Ser Val Lys(SEQ ID No:.2),Pro He Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg(SEQ ID No:3),Arg Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys(SEQ ID No:4),Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys Arg(SEQ ID No:5),Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys(SEQ ID No:6),Thr Gly Val Lys Pro Ph本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
...
【专利技术属性】
技术研发人员：杉山治夫，
申请(专利权)人：株式会社癌免疫研究所，
类型：发明
国别省市：
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