本发明专利技术属于辐射防护领域，具体涉及一种具有辐射防护功能的细胞核靶向的富勒醇固体脂质纳米粒。所述富勒醇固体脂质纳米粒包括：硬脂酸、胆固醇、卵磷脂、玉米油和吐温-80，富勒醇粉末和己烯雌酚；将硬脂酸、胆固醇、卵磷脂、玉米油、富勒醇粉末和己烯雌酚溶于乙醇，充分溶解并混匀，旋转蒸发去除乙醇，将其缓慢滴加至同温度的吐温-80水溶液，加完后继续搅拌以混匀，得C60(OH)24-SLN-E初乳；将C60(OH)24-NLC-E初乳进行高压乳匀，冷却后得到所需产品。本发明专利技术所得富勒醇固体脂质纳米粒能够通过多种生物屏障和核膜，高效率地载带富勒醇到细胞核内，清除细胞核内的自由基，从而实现辐射防护的作用。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于辐射防护领域，具体涉及一种具有辐射防护功能的细胞核靶向的富勒醇固体脂质纳米粒。
技术介绍
核能在国防、工业、农业和医学等领域广泛应用，在造福人类的同时，也带来严重的核辐射危机。2011年3月日本9. 0级强震导致福岛核电站发生高温核燃料泄漏，电离辐射对机体的损伤及其防护已经得到了各国政府和研究人员的高度重视。放射性同位素在工业、农业等应用中的辐射防护非常重要，在肿瘤放射治疗时对正常组织与器官的保护也很重要。电离辐射是一切能引起物质电离的辐射总称，它作用于机体，辐射能量被生物组织吸收，导致分子发生激发和电离、自由基产生、化学键发生断裂、生物大分子发生变性，导致细胞、组织器官和系统发生变化，继而引起全身功能的变化，最终出现病理变化。射线的能量作用于水分子，产生大量的自由基如H_、H2、H2O2, Haq-, OH'、eaq-等，由于细胞核组织含有大量水分，机体的主要生物大分子(蛋白质、核酸、酶等)处于大量水分子(60%-70%左右)的包围中，这些自由基能够迅速作用于DNA、蛋白质、膜脂质分子等靶分子，造成生物大分子损伤、细胞周期紊乱及遗传变异等。DNA受到自由基的攻击，造成碱基与核糖氧化、单链及双链断裂等多种损伤。Templeteton等的实验证实低LET射线诱导的损伤90 %是由0H_引起，从而导致双链断裂(double strand break，DSB)，由于双链断裂可直接致染色体畸变和遗传物质丢失，所以双链断裂是DNA分子结构及遗传学完整性的最关键性损伤，也是细胞死亡的主要原因之一。在众多水辐解产物中，0H_在导致辐射损伤中具有重要地位，一方面与0H_在体内的扩散距离可达215 nm，对靶分子的危害性较大有关，另一方面也与体内尚无专一清除0H_的物质有关。所以，理想的自由基清除剂应当能够进入到细胞内，特别是细胞核内，在电离辐射产生自由基的瞬间立即清除DNA和生物膜周围的自由基。尽管人体内有天然存在的自由基清除剂(如SOD等)，但是这些自由基清除剂无法进入到细胞核内发挥作用，特别是没有0H_、ea(1-等自由基的天然清除剂。目前国内外研制了不少辐射防护剂，但是效果不尽理想，不同程度存在防护效价低、稳定性差、有效时间短、毒副作用大和口服效果差等缺点，同时，这些药物主要是针对细胞膜的保护。1985年美国的Smally，Curl和英国的Kroto首次发现富勒烯(fullerene，C60), 而富勒烯的水溶性多羟基衍生物一富勒醇是良好的自由基清除剂，它能够清除0H_、eaq-等自由基，尤其与0H_和的反应速率常数可达0. 5 3. 3 X IO10M-1S-10水溶性富勒醇能够快速地穿过细胞膜，到达细胞内，主要分布在胞浆以及线粒体等细胞器中。并且，富勒烯的毒理学研究表明其是低毒化合物。根据放射生物学的“靶学说”和大量的实验数据，电离辐射作用的“靶”主要是基因组DNA，其次是包括质膜、核膜和细胞器膜在内的生物膜，而DNA 主要分布在细胞核内，自由基会在很短的时间内攻击靶分子DNA，所以理想的自由基清除剂应当能够进入到细胞内尤其是细胞核内，在电离辐射产生自由基的瞬间立即清除DNA和生物膜周围的自由基。而现有的辐射防护药物，主要都是针对细胞膜的保护，未见辐射防护药物能够进入细胞核内的报道。现有技术中，关于多羟基富勒醇的应用，主要有以下报道(1)公开号为101397132 A的中国专利技术专利申请公开说明书公开了一种水溶性富勒烯衍生物，所述富勒烯衍生物包括以通式C6ciOxHy (10<Y<X<50)表示的富勒醇或以通式 C60(C(COOH)2)N (N=l-3)表示的富勒烯羧基衍生物；所述水溶性富勒烯衍生物具有抑制肿瘤的作用，与目前临床普遍使用的环磷酰胺、顺钼、紫杉醇等相比，富勒醇和羧基化富勒烯纳米颗粒具有用量小，毒性低，且具有抑制肿瘤生长和抑制肿瘤转移的优点。(2)将不同的化学基团结合到富勒烯分子上，形成新的富勒烯衍生物，用于不同的目的。但是目前还没有关于应用富勒烯或其衍生物作为辐射防护药物的报道，也没有将多羟基富勒醇C60 (OH) x载带到细胞核做自由基清除剂的报道。
技术实现思路
本专利技术的专利技术目的是提供一种受体_配体介导的细胞核靶向富勒醇硬脂质纳米粒，使它能够通过多种生物屏障和核膜，高效率地载带富勒醇到细胞核内，发挥其强大的清除自由基能力，从而实现对靶分子DNA的辐射防护的作用。本专利技术的主要原理为使用生物材料(混合类脂，即液态脂质与固态脂质混合的混合物)为载体，将富勒醇包裹起来，在其表面连接与核受体具有高度亲和力的雌激素类似物，制备成的新受体_配体介导的纳米材料，即为所述富勒醇固体脂质纳米粒。为达到上述专利技术目的，本专利技术采用的技术方案是一种富勒醇固体脂质纳米粒， 所述富勒醇固体脂质纳米粒包括硬脂酸、胆固醇、卵磷脂、玉米油和吐温-80，还包括富勒醇粉末和己烯雌酚；其中，富勒醇粉末、硬脂酸、胆固醇、卵磷脂、己烯雌酚、玉米油和吐温-80 的质量比为:7(M00 995-1005 245-255 495-505 0. 84 595-605 700-800 上述技术方案中，富勒醇固体脂质纳米粒的形态近似球形，直径25(T500nm左右。制备上述富勒醇固体脂质纳米粒的方法包括以下步骤按照上述质量比，将硬脂酸、胆固醇、卵磷脂、玉米油、富勒醇粉末和己烯雌酚溶于乙醇，充分溶解并混勻，旋转蒸发去除乙醇，将其缓慢滴加至65°C 80°C左右吐温-80水溶液，加完后继续搅拌以混勻，得 C60 (OH) 24-SLN-E初乳；将C60 (OH) 24_NLC_E初乳进行高压乳勻，冷却后得到所需产品初乳为白色乳状液体，冷冻干燥后为分散的粉末；所述吐温-80水溶液浓度为10mg/m广12 mg/mL。上述技术方案中，所述富勒醇为C60(0H)24。上述技术方案中，在激光共聚焦显微镜下观察，包裹标记物罗丹明-6G的 C60 (OH)24 -SLN-E能够快速进入细胞，在细胞核内有明显聚集，表明C60(0H)24 - SLN -E能穿过核膜，到达细胞核。通过细胞克隆形成实验观察到受、射线照射后该纳米材料对体外培养细胞的辐射保护作用。通过免疫荧光的实验方法，测定受到Y射线照射后体外培养细胞的DNA双链断裂的水平，反映该纳米材料清除自由基，直接保护DNA靶分子免受自由基攻击的能力，从而达到较强的辐射防护效果。因此，本专利技术同时要求保护上述富勒醇固体脂质纳米粒在制备辐射防护药物的应用，尤其是在制备具有细胞核靶向的辐射防护药物的应用。本专利技术同时要求保护一种具有细胞核靶向的辐射防护药物，主要活性成分为上述富勒醇固体脂质纳米粒。由于上述技术方案运用，本专利技术与现有技术相比具有下列优点1.本专利技术所述细胞核靶向富勒醇固体脂质纳米粒C60 (OH)24-SLN-E能穿过核膜，到达细胞核，清除细胞核内的自由基，直接保护DNA靶分子免受自由基攻击的能力，从而达到较强的辐射防护效果。2.本专利技术所述细胞核靶向富勒醇固体脂质纳米粒C60(0H)24-SLN_E能够高效率地载带富勒醇，其所载带的富勒醇分布均一、密集，使它能够穿过多种生物屏障和核膜，到达全身各组织器官，尤其是辐射敏感组织、细胞内，发挥强大的清除自由基的能力。3本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：许玉杰，刘敏，杨百霞，孙俊杰，
申请(专利权)人：苏州大学，
类型：发明
国别省市：
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