瘦肉精多残留联检试纸卡制造技术

本实用新型专利技术公开一种“瘦肉精”多残留分析的金标层析检测试纸卡，包括塑料支撑物和试纸芯，试纸芯由样品垫、金标物结合垫、层析膜和吸水垫依次粘贴到衬板上制成，金标物结合垫为吸附有二～五种混合金标抗体的玻璃纤维棉，金标抗体为胶体金标记的抗瘦肉精的单克隆抗体或多克隆抗体，检测线为二～五条相应的瘦肉精-载体蛋白结合抗原，对照线为羊抗或兔抗小鼠IgG、羊抗兔IgG或兔抗载体蛋白IgG抗体印制而成，检测线和对照线沿层析膜横向平行排列。本实用新型专利技术特异性强，敏感性高，最低检出限可达到1ppb，实现了“瘦肉精”多残留金标层析的快速检测，用同一试纸卡一次加样，可同时检测多种“瘦肉精”残留物，大大节省了检测时间，在提高工作效率的同时节省了检测成本。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本技术涉及一种快速检测微量“瘦肉精”的器具，特别是涉及一种“瘦肉精”多残留分析的金标层析检测试纸卡。
技术介绍
“瘦肉精”是指一类药物，任何能够促进瘦肉生长、减少脂肪沉积的物质都可以叫做“瘦肉精”，包括“克伦特罗”(Clenbuterol，CL)，盐酸克伦特罗是其盐酸盐，“莱克多巴胺” aactopamine，RAC，也译为雷托巴胺)、“沙丁胺醇”(Salbutamol，SAL)、“特布他林” (Terbutaline, TBL)和“西马特罗”(Cimaterol，CIM)等。“瘦肉精”在肉用动物生产中剂量为治疗量的5-10倍时，具有促进肌肉发育和脂肪分解作用，可以提高肉用动物胴体瘦肉率。因为消费者对瘦肉的特殊偏好，瘦肉产出率高的猪可以卖个好价钱，添加“瘦肉精”给养殖户带来了额外收益。因此，受不法利益的驱使，养殖户常在养殖环节添加“瘦肉精”到动物饲料中去。但是“瘦肉精”是一种选择性β2_肾上腺素受体激动剂，副作用极大，当摄入量较大时会造成心血管系统的损害和出现严重的神经症状。当人们食用了含“瘦肉精”残留的动物内脏和肉品后，会造成急性或慢性食肉中毒，危害消费者的健康安全。目前为止没有一个国家批准“盐酸克伦特罗”可用于动物生产中，但长期以来一直存在着非法使用，在世界各地造成严重食物中毒的事件并不鲜见。在我国北京、香港、上海、浙江、广东、山东、河北、 广西、黑龙江和安徽等地也出现了“瘦肉精”的中毒事件，极大地威胁着消费者的身心健康。 因国家对盐酸克伦特罗的严格管控，现在出现了“莱克多巴胺”、“沙丁胺醇”等所谓的“新型瘦肉精”产品。用于“瘦肉精”残留检测的方法较多，(1)理化分析方法，如高压液相色谱仪 (High performance liquid chromatography, HPLC)、气相色谱(Gas chromatography, GC)、薄层层析(Thin-layer chromatography，TLC)、毛细管区域电泳法(Capillary zone electrophoresis，CE)等；(2)免疫分析法，如放射免疫法(Radio-immunoassay，RIA)、酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)等；(3)生物测定法，如微生物学测定法(microbiological assays,ΜΑ)、 放射受体测定法(rediorec印tor assays,RA) 等。但这些方法有的需要昂贵的仪器设备，需要熟练的专业人员操作，操作过程复杂，需要时间较长，限制了其应用范围，难以在生产实际中推广应用。免疫试纸法具有半定量和一定的定量能力，可以提供待测物的初步信息，该法灵敏度高，分析过程简单，用作“瘦肉精”的筛查有独特的优势，是需要优先发展的检测技术，但目前“瘦肉精”多残留试纸检测技术在国内尚属空白，急待研究解决。
技术实现思路
本技术要解决的技术问题提供一种适用于现场检测的特异、敏感、快速和简便的瘦肉精多残留联检试纸卡。本技术的技术方案一种瘦肉精多残留联检试纸卡，包括塑料支撑物和试纸芯，塑料支撑物包括底座和面板，其中底座上设有安装试纸芯的固定槽，面板上设有加样孔和结果显示窗，试纸芯由样品垫、金标物结合垫、层析膜和吸水垫依次粘贴到衬板上制成，层析膜上设有检测线和对照线，所述金标物结合垫为吸附有二 五种混合金标抗体的玻璃纤维棉，金标抗体为胶体金标记的抗瘦肉精的单克隆抗体或多克隆抗体，检测线为二 五条相应的瘦肉精-载体蛋白结合抗原或人工合成的模拟结合抗原，对照线为羊抗或兔抗小鼠IgG、羊抗兔IgG或兔抗载体蛋白IgG抗体印制而成，检测线和对照线沿层析膜横向平行排列。所述金标抗体和相应的瘦肉精-载体蛋白结合抗原或人工合成的模拟结合抗原为第一组金标抗盐酸克伦特罗CL抗体，检测线为CL-载体蛋白结合抗原；第二组金标抗莱克多巴胺RAC抗体，检测线为RAC -载体蛋白结合抗原；第三组金标抗沙丁胺醇SAL 抗体，检测线为SAL-载体蛋白结合抗原；第四组金标特步特林TBL抗体，检测线为TBL-载体蛋白结合抗原；第五组金标抗西马特罗CIM抗体，检测线为CIM-载体蛋白结合抗原；采用其中的二组、三组、四组或五组，分别组成二联检试纸卡、三联检试纸卡、四联检试纸卡或五联检试纸卡。所述吸水垫采用滤纸、海绵或无纺布制作，所述衬板用不吸水的硬质塑胶条制作。所述样品垫采用玻璃纤维棉、尼龙膜、聚偏二氟乙烯膜或聚酯膜制作；层析膜采用尼龙膜、聚偏二氟乙烯膜、硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜制成，对照线采用硝酸纤维素膜、 纯纤维素膜或羧化纤维素膜制成。所述载体蛋白为牛血清白蛋白、鸡卵清白蛋白、人血清白蛋白或钥孔血蓝蛋白。本技术的积极有益效果①试纸卡特异性强，敏感性高，最低检出限可达到lppb，符合我国瘦肉精的限量检测要求。②试纸卡实现了“瘦肉精”多残留金标层析的快速检测，用同一试纸卡一次加样， 可同时检测多种“瘦肉精”残留物，克服了常规单项检测试纸卡一次只能检测一种药物的不足，实现了较高通量的检测，大大节省了检测时间，在提高工作效率的同时节省了检测成本。G")使用该试纸卡时，无需其它额外试剂和仪器，用于现场检测在5min内即可判定检测结果，简便、快速。④使用该试纸卡以棕红色线条“ I ”显示检测结果，判定依据形象、直观，简单明了，不易出现人为误判。⑤本技术的试纸卡可节省检测费用，适用范围广。使用该试纸卡比用仪器分析和常规单项检测试纸条的费用大幅下降；同时该试纸卡适用范围广，可满足不同层次人员的需要，包括专业检验、海关检疫、卫生检疫、质量监测、加工企业和养殖场户等，可保持对非法添加瘦肉精的威慑，保障食品安全，便于推广应用。附图说明图1、试纸芯侧视结构示意图。图2、试纸芯俯视结构示意图。图3、二项联检试纸卡面板构造俯视图。图4、试纸卡底座构造示意图。图5、三项联检试纸芯俯视结构示意图。图6、三项联检试纸卡面板构造俯视图。图7、五项联检试纸芯俯视结构示意图。图8、五项联检试纸卡面板构造俯视图。图中，1 衬板；2 样品垫；3 金标物结合垫；4 层析膜；5 吸水垫；6 对照线；7:检测线；8:加样孔；9:显示窗；10:面板；11:底座；12:固定槽。具体实施方式在制备“瘦肉精”多残留联检层析试纸卡时，需要先制备某种“瘦肉精”-载体蛋白结合抗原、“瘦肉精”金标物，制备羊抗或兔抗小鼠IgG抗体或羊抗兔IgG抗体，或兔抗载体蛋白IgG抗体，进而制备成试纸芯，并安装在塑料壳底座的固定槽中，最后和面板嵌合在一起。实施例一“瘦肉精” 二项联检金标层析试纸卡。在得到瘦肉精-载体蛋白结合抗原、瘦肉精金标物和IgG抗体的基础上，组装得到本专利技术的试纸卡(以盐酸克伦特罗和莱克多巴胺二联检为例)。试纸卡塑料壳包括底座11和面板10，底座上设有安装试纸芯的固定槽12，面板上设有加样孔8和显示窗9，显示窗旁边设有1\、T2和C标识，参见图1-4。试纸芯的构造衬板1用硬质塑胶条制成；样品垫2用玻璃纤维棉制成；金标物结合垫3为吸附有胶体金标记的抗CL和抗RAC单克隆抗体的玻璃纤维棉；层析膜4用硝酸纤维素膜，其上分别用偶联CL-载体蛋白和RAC-载体蛋白的结合抗原制备两条检测线7 (隐形)，载体本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种瘦肉精多残留联检试纸卡，包括塑料支撑物和试纸芯，塑料支撑物包括底座和面板，其中底座上设有安装试纸芯的固定槽，面板上设有加样孔和结果显示窗，试纸芯由样品垫、金标物结合垫、层析膜和吸水垫依次粘贴到衬板上制成，层析膜上设有检测线和对照线，其特征是：所述金标物结合垫为吸附有二～五种混合金标抗体的玻璃纤维棉，金标抗体为胶体金标记的抗瘦肉精的单克隆抗体或多克隆抗体，检测线为二～五条相应的瘦肉精－载体蛋白结合抗原或人工合成的模拟结合抗原，对照线为羊抗或兔抗小鼠ＩｇＧ、羊抗兔ＩｇＧ或兔抗载体蛋白ＩｇＧ抗体印制而成，检测线和对照线沿层析膜横向平行排列。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：职爱民，胡骁飞，张改平，邓瑞广，李孟顺，杨继飞，刘庆堂，赵东，邢广旭，柴书军，杨艳艳，李青梅，滕蔓，
申请(专利权)人：河南省农业科学院，
类型：实用新型
国别省市：41