化学发光液,增强化学发光的试剂和方法技术

本发明专利技术公开了一种以1，2-二氧杂环丁烷化合物为底物的化学发光液，含有1，2-二氧杂环丁烷化合物和式I的烷基二甲基苄基类季铵盐。本发明专利技术还公开了一种增强1，2-二氧杂环丁烷化合物化学发光作用的试剂和方法，试剂中含有式I的烷基二甲基苄基类季铵盐。

【技术实现步骤摘要】
,增强化学发光的试剂和方法
本专利技术涉及化学发光免疫分析。更具体地讲，本专利技术涉及含有增强剂的，制备方法及试剂盒；增强1，2-二氧杂环丁烷化合物化学发光作用的试剂和方法，制备方法及试剂盒。
技术介绍
化学发光免疫分析是世界范围内发展非常迅速的非放射性免疫分析技术，是继酶免技术、放免技术、荧光免疫技术之后发展起来的一种超高灵敏度的微量检测技术。它具有灵敏度高、检测范围宽、操作简便快速、标记物稳定性好、无污染等优点，是目前免疫定量分析最理想的方法。在化学发光免疫分析中，常用发光物质包括鲁米诺、异鲁米诺、吖啶酯、1，2_ 二氧杂环丁烷化合物(l，2-di0Xetane compound)。其中异鲁米诺和吖啶酯作为示踪分子直接标记，属于闪光型化学发光反应。鲁米诺和1，2-二氧杂环丁烷化合物依靠酶作为示踪分子标记，属于酶促辉光型化学发光反应。1，2-二氧杂环丁烷化合物是最新的超灵敏的碱性磷酸酶底物，在适宜的缓冲液中，随着碱性磷酸酶的催化水解作用，1，2- 二氧杂环丁烷化合物分解发出强度很高的光信号，信号可持续20个小时以上，是理想的化学发光物质。国外生产厂家研制出以碱性磷酸酶为标记物，1,2- 二氧杂环丁烷化合物为底物的试剂盒，与之相匹配的有DPC、Beckman, BioMerieux, Olympus全自动化学发光系统。1,2- 二氧杂环丁烷化合物中的CSPD，CDP，CDP-Mar，BZPD及其发光液，多数为国外公司Tropix，Lumigen等的专利产品，价格昂贵，大大限制了该项技术在国内的应用。国内能够提供的1，2_ 二氧杂环丁烷化合物——3-(2-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3-磷酰氧基)苯-1，2-二氧杂环丁烷(AMPPD)，其发光信号强度大大弱于上述国外产品。AMPPD的分子结构中存在一个-0-0-键很弱的四元杂环和一个磷酸根基团。磷酸根基团维持着整个分子结构的稳定。在通常情况下，这种化合物很稳定，5°C下保存的固体 AMPPD几乎不分解。当有碱性磷酸酶催化作用时，AMPPD发生磷酸根基团水解，形成一个不稳定的中间体。这个中间体随即自行分解，-0-0-四元环释放出大量能量，激发化学发光反应，发射光子。1989年，Schaap报道了利用十六烷基三甲基溴化铵和5_(N_十四酰)_氨基荧光素对1，2-二氧杂环丁烷化合物进行化学发光增强的技术(Clin. Chem.，35)。在美国专利 US4959182和US5004565及中国专利CN89106M9. 1中，Schaap描述了在十六烧基三甲基溴化铵形成的胶束条件下，1,2- 二氧杂环丁烷化合物进行化学和酶触发而导致的化学发光增强。美国专利US5145772公开了聚乙烯苄基二甲基苄基氯化铵(BDMQ)、血清白蛋白等大分子物质对1，2-二氧杂环丁烷化合物的发光增强效应。美国专利US5M7836公开了聚乙烯苄基三甲基氯化铵(TMQ)及聚乙烯苄基三丁基氯化铵(TBQ)可作为1，2-二氧杂环丁烷化合物的发光增强剂。美国专利US5393469公开了聚合季膦盐对酶催化1，2_ 二氧杂环丁烷化合物所产生的发光增强作用。美国专利US5650099及中国专利CN1208399A公开了依靠双阳离子表面活性剂——三辛膦甲基-4-三丁基膦甲基苯二氯化物和荧光物——荧光素、羟基芘磺酸对1， 2-二氧杂环丁烷化合物的发光增强效应。中国专利CN1719254A公开了一种以CSPD为底物，氯化十六烷三甲基铵、肉蔻酰甘油磷酸二钠、牛血清白蛋白、十八烷氨基荧光素为增强剂的。上述专利中公开的1，2_ 二氧杂环丁烷化合物的发光增强剂所使用的聚合物和长链烷基荧光物，价格昂贵，不易购买。因此，本领域需要开发更经济的和增强1，2-二氧杂环丁烷化合物发光作用的试剂和方法。
技术实现思路
本专利技术一方面提供了-少一种具有通式I结构的烷基:权利要求1. 一种，含有1，2_ 二氧杂环丁烷化合物，其特征在于 所述还包括至少一种具有通式I结构的烷基二甲基苄基季铵盐， Γ( 2.根据权利要求1所述的，其特征在于所述烷基二甲基苄基季铵盐选自十二烷基二甲基苄基氯化铵、十四烷基二甲基苄基氯化铵、十六烷基二甲基苄基氯化铵、 十八烷基二甲基苄基氯化铵、十二烷基二甲基苄基溴化铵、十四烷基二甲基苄基溴化铵、 十六烷基二甲基苄基溴化铵、十八烷基二甲基苄基溴化铵及其组合。3.根据权利要求1或2所述的，其特征在于所述烷基二甲基苄基季铵盐的浓度为0. lg/L 10g/L，优选lg/L 10g/L。4.根据权利要求1-3中任一项所述的，其特征在于所述还包括荧光剂。5.根据权利要求1-4中任一项所述的，其特征在于所述还含有2-氨基-2-甲基-1-丙醇或镁离子或两者。6.一种的制备方法，其特征在于将权利要求1-5中任一种的组分溶解在水中。7.一种化学发光试剂盒，其特征在于所述试剂盒中包括权利要求1-5所述的任一种，所述发光液中的组分任选单独包装或混合包装。8.一种增强1，2_ 二氧杂环丁烷化合物发光作用的试剂，其特征在于所述试剂含有至少一种具有通式I结构的烷基二甲基苄基季铵盐，Y为苯环上的取代基，选自H、卤素、羟基、巯基、氰基、硝基、烷基、烷氧基、卤代烷基、氨基、烷基氨基或酰胺基。9.根据权利要求8所述的试剂，其特征在于所述烷基二甲基苄基季铵盐选自十二烷基二甲基苄基氯化铵、十四烷基二甲基苄基氯化铵、十六烷基二甲基苄基氯化铵、十八烷基二甲基苄基氯化铵、十二烷基二甲基苄基溴化铵、十四烷基二甲基苄基溴化铵、十六烷基二甲基苄基溴化铵、十八烷基二甲基苄基溴化铵及其组合。10.根据权利要求8或9所述的试剂，其特征在于所述烷基二甲基苄基季铵盐的浓度为 0. lg/L 10g/L，优选 lg/L 10g/L。11.根据权利要求8-10任一项所述的试剂，其特征在于所述试剂还含有荧光剂。12.根据权利要求8-11任一项所述的试剂，其特征在于所述试剂还含有2-氨基-2-甲基-1-丙醇或镁离子或两者。13.一种增强1，2_ 二氧杂环丁烷化合物发光作用的试剂的制备方法，其特征在于将权利要求8-12所述任一种试剂的组分溶解在水中。14.一种增强1，2_ 二氧杂环丁烷化合物化学发光作用的试剂盒，其特征在于所述试剂盒包括权利要求8-12所述任一种试剂，所述试剂组分任选单独包装或混合包装。15.一种增强1，2-二氧杂环丁烷化合物化学发光作用的方法，其特征在于包括在含 1，2-二氧杂环丁烷化合物溶液中添加权利要求8-12所述的任一种试剂或权利要求14所述的试剂盒。16.具有通式I结构的烷基二甲基苄基季铵盐在制备中的应用，全文摘要本专利技术公开了一种以1，2-二氧杂环丁烷化合物为底物的，含有1，2-二氧杂环丁烷化合物和式I的烷基二甲基苄基类季铵盐。本专利技术还公开了一种增强1，2-二氧杂环丁烷化合物化学发光作用的试剂和方法，试剂中含有式I的烷基二甲基苄基类季铵盐。文档编号G01N33/53GK102311730SQ20101021577公开日2012年1月11日 申请日期2010年6月30日 优先权日2010年6月30日专利技术者张裕平, 钱纯亘 申请人:深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种化学发光液，含有１，２－二氧杂环丁烷化合物，其特征在于：所述化学发光液还包括至少一种具有通式Ｉ结构的烷基二甲基苄基季铵盐，其中Ｒ选自Ｃ８－２０烷基或Ｃ８－２０烯基，优选Ｃ１２－１８烷基；Ｘ－为负离子；Ｙ为苯环上的取代基，选自Ｈ、卤素、羟基、巯基、氰基、硝基、烷基、烷氧基、卤代烷基、氨基、烷基氨基或酰胺基。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：钱纯亘，张裕平，
申请(专利权)人：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司，
类型：发明
国别省市：94