新型抗菌肽Misgurin突变体的制备方法与应用技术

技术编号:6989431 阅读:284 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术属于生物技术领域,涉及一种新型抗菌肽Misgurin突变体的制备方法与应用。技术方案是:在天然Misgurin的氨基酸序列的C未端引入谷氨酰胺,设计一种新型Misgurin突变体,选用毕赤酵母偏爱密码子,人工合成新型Misgurin突变体全基因,构建毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαA-M,载体电击法转化宿主细胞SMD1168,筛选获得高效表达菌株,在合适的培养条件下,每毫升表达上清中含重组新型Misgurin突变体达100微克。所得产品对金黄色葡萄球菌、猪沙门氏菌和猪致病性大肠杆菌K88、K99、987P均具有较好的抑杀活性,对临床细菌性疾病的防治具有显著的效果。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种新型抗菌肽Misgurin突变体的制备方法与应用,其特征在于设计成了含有谷氨酞胺的Misgurin突变体,并通过酵母表达的方式获得具有抗菌活性的重组Misgurin突变体,具体按以下步骤制备:(1)设计新型抗菌肽Misgurin突变体,选用毕赤酵母偏爱密码子,人工合成Misgurin突变体全基因。(2)将人工合成的Misgurin突变体基因克隆入酵母表达载体pPICZαA中,构建分泌型表达载体pPICZαA-M,电转化到宿主细胞中。(3)筛选整合有Misgurin突变体基因的重组细胞。(4)重组细胞的诱导表达与生物活性测定。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:缪德年樊生超姚惠娟文豪
申请(专利权)人:上海市农业科学院畜牧兽医研究所
类型:发明
国别省市:31

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