藏绵羊肌肉生长抑制素重组表达蛋白质制造技术

本发明专利技术公开了一种重组藏绵羊肌肉生长抑制素蛋白质。包括克隆藏绵羊肌肉生长抑制素编码基因MSTN，以该基因为模板PCR扩增并克隆MSTN生物活性区，构建重组表达载体，并转化到大肠杆菌构建基因工程菌，对工程菌进行IPTG诱导表达并纯化MSTN蛋白质。随后用MSTN蛋白质主动免疫家兔制备多克隆抗体血清，用间接ELISA法检测MSTN蛋白质免疫原性。用重组藏绵羊MSTN蛋白质主动免疫小鼠，检测重组MSTN蛋白质对小鼠生长发育的影响。本发明专利技术提供的重组藏绵羊MSTN蛋白质纯度高，免疫原性好，主动免疫MSTN蛋白质可使小鼠肌纤维直径、面积显著增加，且肌纤维数量也有增加的趋势。由此提示，重组藏绵羊MSTN蛋白质可用于藏绵羊主动免疫，有利于加快藏绵羊生长速度，提高产肉性能。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程
，具体地说，涉及一种构建藏绵羊 pET28a(+)-MSTN' -Ε. coli BL21 (DE!3)基因工程菌、重组蛋白质表达纯化、制备多克隆抗体及免疫性检测的技术。
技术介绍
藏绵羊是在高寒生态环境中经长期自然选育形成的地方特有羊种，具有耐寒、耐粗饲、抗病力强等特点，是我国青藏高原及其毗邻的四川、甘肃、云南等地的优势畜种，也是牧区人民重要的生产资料和生活资料，于2000年被农业部列入《国家级畜禽品种资源保护名录》，2006年被农业部列入《国家级畜禽遗传资源保护名录》。藏绵羊肉营养丰富，肌纤维细嫩、柔软，蛋白质含量高，富含组氨酸、精氨酸、苏氨酸、丙氨酸、甘氨酸、脯氨酸等多种氨基酸，胆固醇含量低，膻味小，备受消费者亲睐，市场潜力巨大。然而，众多科学研究数据显示，藏绵羊产业发展存在诸多不利因素，藏绵羊在周岁以后生长速度缓慢、成年体重小、 屠宰率低、性成熟晚、繁殖率低、繁殖成活率低；同时，品种选育及更新速度较慢，品种老化， 个别地方羊个体变小，生产性能降低；此外，青藏高原气候严寒、生态脆弱，近年来草地鼠害严重，加之过度放牧等诸多不利因素，使得草场退化严重本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种含有藏绵羊ｍｙｏｓｔａｔｉｎ成熟肽基因的重组表达载体ｐＥＴ２８ａ（＋）－ＭＳＴＮ′，其特征在于它包含序列表中序列５的３′端３３０个核苷酸组成的藏绵羊ｍｙｏｓｔａｔｉｎ成熟肽基因ＭＳＴＮ′和ｐＥＴ２８ａ（＋）载体，该藏绵羊ｍｙｏｓｔａｔｉｎ成熟肽基因ＭＳＴＮ′位于ｐＥＴ２８ａ（＋）载体的ＥｃｏＲⅠ和ＢａｍＨＩ限制性内切酶酶切位点之间。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：徐亚欧，毛亮，郑玉才，
申请(专利权)人：西南民族大学，
类型：发明
国别省市：90