一种鉴别尼罗罗非鱼、奥利亚罗非鱼及其杂交鱼的分子标记方法技术

本发明专利技术涉及一种鉴别尼罗罗非鱼、奥利亚罗非鱼及其杂交鱼的分子标记方法，其特征是：选用3对特异微卫星标记引物组合，从待测罗非鱼采样血液或鳍条，提取基因组DNA，对待测罗非鱼基因组DNA进行多重PCR扩增，PCR产物用8.0％的非变性聚丙烯酰胺凝胶进行电泳分离，银染法染色后，拍照记录电泳结果。根据多重PCR的电泳检测结果，可鉴别尼罗罗非鱼、奥利亚罗非鱼及它们的杂交鱼。本发明专利技术可快速、有效地鉴别尼罗罗非鱼、奥利亚罗非鱼及其杂交鱼。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子标记
，涉及，是对不同种罗非鱼的鉴别。
技术介绍
罗非鱼(Tilapia)原产于非洲，是世界性养殖品种，该鱼上世纪50年代引入我国，得到了较快发展，现中国已是世界上最大的罗非鱼生产国和出口国。目前，我国主要养殖的罗非鱼品种有尼罗罗非鱼ipreochromis nilo ticus)，奥利亚罗非鱼ifireochromis aureus)和奥尼杂交罗非鱼，其中奥尼罗非鱼是尼罗罗非鱼(早)和奥利亚罗非鱼(古) 的杂交1代，具有雄性率高、生长快、抗病力强等优点，但它的雄性率和养殖性能与亲本的种质纯度密切相关。由于罗非鱼品种间很容易杂交，且杂种可育，杂交种形态又与亲本很相似，传统的形态辨别方法又很难准确辨别纯种和杂交种。因此，很容易造成罗非鱼种质混杂，导致优良经济性状退化，这也是目前制约我国罗非鱼良种保护和养殖发展的突出问题。尼罗罗非鱼，奥利亚罗非鱼及其它们杂交鱼鉴别方面，学者们曾利用同工酶技术、 RAPD技术、微卫星标记技术等建立了区别它们的生化和分子遗传标记。然而，同工酶是基因表达产物，但检测位点有限，对亲缘关系较近或遗传基础复杂的品种不容易区分；RAPD方法虽本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种鉴别尼罗罗非鱼、奥利亚罗非鱼及其杂交鱼的分子标记方法，其特征在于，采用以下提取步骤：（１）选用３对特异微卫星引物组合进行多重ＰＣＲ反应，其中这３对特异微卫星引物如下：ＣＣＣＴＣＴＧＴＴＴＣＣＡＴＣＴＣＡ；ＧＡＴＡＣＣＴＧＴＣＣＡＴＡＣＣＴＣＣＴＣ；ＧＣＴＣＧＣＴＣＣＡＧＡＡＡＡＡＴＣＡＣ；ＧＴＣＡＡＡＡＡＧＧＣＡＴＧＧＣＡＡＡＧ；ＣＴＧＣＡＣＴＴＴＴＡＣＴＧＡＧＧＧ；ＴＧＧＧＡＧＡＴＴＡＡＣＡＧＡＡＴＡＡＣＡ（２）从待测罗非鱼采样血液或鳍条，采用ＤＮＡ提取法提取基因组ＤＮＡ；（３）用步骤（２）的基因组ＤＮＡ为模板，步骤（１）所选的３对微卫星引物组合进行多重ＰＣＲ扩增；（４）对步骤（３）...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李建林，俞菊华，唐永凯，李红霞，徐跑，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院淡水渔业研究中心，
类型：发明
国别省市：32