本发明专利技术属于饲料科学与饲料添加剂技术领域，具体涉及一种短小芽孢杆菌及其饲料添加剂、预混料和饲料防霉剂。本发明专利技术的短小芽孢杆菌作为一种饲料添加剂添加到饲料中，能够改善饲料品质，提高饲料中粗蛋白的含量，降低饲料中粗纤维的含量，是一种新型安全可靠、无污染的纯发酵多功能的新的微生态制剂产品。本发明专利技术的饲料防霉剂较常规防霉剂除了安全、无污染、直接制粒之外，不含化学药剂，不仅防霉效果好，抑菌力强，而且可以改善饲料品质，适口性强，同时具有用量少，可大大节约生产成本。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于饲料科学与饲料添加剂
，具体涉及一种短小芽孢杆菌及其饲料添加剂、预混料和饲料防霉剂。
技术介绍
饲料被霉菌及霉菌毒素污染是目前饲料业和畜牧业生产中不可忽视的一个问题。 据联合国粮食组织估算全世界每年大约有5% 7%的粮食、饲料等农产品受霉菌的侵害， 从而造成了巨大的经济损失。被霉菌污染的饲料，其营养物质被分解，适口性下降，并产生多种霉菌毒素，动物吃了发霉变质的饲料，会发生急性或慢性中毒症状，造成畜禽的生长速度缓慢，采食量下降，消化率降低，繁殖能力与免疫力下降，严重危害动物健康，甚至造成中毒死亡，给养殖业带来巨大的危害。为了预防饲料霉变，经常采用控制饲料原料含水量和添加防霉剂的办法，防霉剂的作用在于能破坏霉菌细胞壁及细胞内的酶，使酶蛋白变性而无法参与催化作用，有效地防止霉变。常见的防霉剂有有机酸类、有机酸盐及有机酸酯类以及一些复合防霉剂，但是这些都是化学防霉剂，本身对饲料品质没有改善，同时在使用过程中对动物有刺激性，在适口性、安全性及抑菌方面存在不足。另外，随着人们对抗生素饲料添加剂带来负面效应的意识不断提高，饲料微生态制剂是作为一种新型的抗生素替代品的添加剂，具有无毒副作用、无耐药性、无残留、效果显著等诸多优点，受到了养殖业的欢迎。但是，目前短小芽孢杆菌在中国还不是可作为直接饲喂动物的饲料级微生物添加剂菌株，对其研究也较少。目前国内关于短小芽孢杆菌的应用主要集中在其产碱性蛋白、脂肽及预防植物疾病方面，关于短小芽孢杆菌在动物饲料、预混料、饲料添加剂方面的应用未见报道，在饲料防霉剂的应用中也尚未有人提出。
技术实现思路
(一)要解决的技术问题本专利技术的目的是提供一种短小芽孢杆菌Bacillus pumilus。本专利技术的另一目的是提供一种包含该短小芽孢杆菌Bacillus pumilus的饲料添加剂及包含该饲料添加剂的预混料。本专利技术还提供一种包含该短小芽孢杆菌Bacillus pumilus的饲料防霉剂。(二)技术方案本专利技术的目的是通过如下技术方案实现的本专利技术提供一种短小芽孢杆菌Bacillus pumilus，其保藏编号为CGMCC No. 4756。本专利技术还提供一种包含该短小芽孢杆菌Bacillus pumilus CGMCC No. 4756的饲料添加剂，其特征在于短小芽孢杆菌Bacillus pumilus活菌数为lX101(lCfu/g lX1012cfu/g。本专利技术提供包含上述饲料添加剂的预混料，其特征在于饲料添加剂的添加比例是 2.5%，此比例为体积与质量比(体积/质量)。本专利技术还提供包含上述短小芽孢杆菌Bacillus pumilus CGMCCNo. 4756的饲料防霉剂，但所述饲料为包含玉米、麸皮或豆粕的动物饲料。本专利技术的短小芽孢杆菌Bacillus pumilus为申请人首次在国内分离到的一株来源于动物消化道的新的短小芽孢杆菌，为申请人从牛的瘤胃中分离得到的一株芽孢杆菌优势菌株，经过生理生化及16s RNA分析鉴定，表明该菌属于短小芽孢杆菌，其分类命名为短小芽孢杆菌Bacillus pumilus,已于2011年4月8日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，简称 CGMCC，保藏编号为 CGMCCNo. 4756。(三)有益效果(1)本专利技术的保藏编号为CGMCC No. 4756的短小芽孢杆菌BaciIlus pumilus为申请人首次在国内分离到的一株来源于动物消化道的新的短小芽孢杆菌，并将其作为饲料添加剂应用于动物预混料中，同时首次应用于饲料防霉剂方面；且此菌株具有耐高温的特点， 因而具有不需要包被，可直接制粒的优点；(2)本专利技术的短小芽孢杆菌Bacillus pumilus作为一种饲料添加剂添加到预混料中，能够改善饲料品质，提高饲料中粗蛋白的含量，降低饲料中粗纤维的含量，是一种新型安全可靠、无污染的纯发酵多功能的新的微生态制剂产品；(3)本专利技术的饲料防霉剂较常规防霉剂除了安全、无污染、直接制粒之外，不含化学药剂，不仅防霉效果好，抑菌力强，而且可以改善饲料品质，适口性强，同时具有用量少， 可大大节约生产成本；(4)本专利技术的饲料防霉剂和添加剂的制备方法简单，操作容易。 附图说明图1.菌株WL86的细胞形态及菌落形态图2.短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus) CGMCC No. 4756 营养琼脂平板(37°C，培养2天菌落形态)图3. PCR扩增16s rRNA序列分琼脂糖凝胶电泳分析(M. Marker ；1,2.短小芽孢杆菌 CGMCC No. 4756)图4.短小芽孢杆菌CGMCC No. 4756抑制发酵饲料中霉菌的生长(1为对照，2为地衣芽孢杆菌，3为枯草芽孢杆菌，4为短小芽孢杆菌)A.接种短小芽孢杆菌与空白对照12天的发酵饲料；B.接种45天的发酵饲料图5.短小芽孢杆菌CGMCC No. 4756的生化反应(API 50CHB试验条生化谱) 具体实施例方式通过下列实施例将更具体的说明本专利技术，但是应理解所述实施例仅是为了说明本专利技术，而不是以任何方式限制本专利技术的范围。实施例1短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)CGMCC No. 4756的分离及鉴定1、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)CGMCC No. 4756 的分离(1)取少量采自北京市昌平牛场牛的瘤胃样本，加入无菌水稀释到一定浓度，沸水中煮lOmin，再用LB培养基进行芽孢杆菌的分离，共分离到89株芽孢杆菌。(2)将分离到的89株芽孢杆菌进行耐酸实验将LB液体培养基培养12h的短小芽胞杆菌制成浓度为1 X 108cfu/mL的菌悬液， 分别加入ImL pH为2. 5,3. 0,3. 5的无菌生理盐水溶液，37°C静止培养4h收集菌体并用ImL 无菌生理盐水重新悬浮，使用梯度稀释法进行活菌计数，测其存活率，共挑选出耐受PH值为2. 5的11株芽孢杆菌。(3)将从步骤O)中筛选出的11株芽孢杆菌进行耐胆盐实验将LB液体培养基培养1 的芽胞杆菌制成浓度为1 X IO8CfuAiL的菌悬液，分别加 Λ ImL 浓度为 0%,0. 1%,0.5%,0.8%, 1.0%, 1.2%, 1.5% 的无菌猪胆盐溶液，37°C静止培养他。收集菌体用无菌生理盐水重新悬浮，使用梯度稀释法进行活菌计数，测其存活率， 挑选出其中耐受胆盐浓度为1. 5%的2株芽孢杆菌。(4)将从步骤(3)中筛选出的2株芽孢杆菌进行耐蛋白酶实验a.制备终浓度为3g/L胃蛋白酶溶液，并且调pH值到2. 0，取0. 5mL菌悬液加入到 4. 5mL模拟胃液中(10倍稀释)，置于培养箱中培养，计算存活率。b.将浓度约IO6CfuAiL的菌液按2%的接种量接种于含有胰蛋白酶的液体培养基中，胰蛋白酶浓度分别为(W/V%)0.8，1.2，1.6，37°C培养16h，平板计数法进行菌落计数， 并计算菌株的存活率。共筛选出1株性能耐胃蛋白酶0.4%和胰蛋白酶0.8%的性能较好的菌株，编号为虬86。2、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)CGMCC No. 4756 的鉴定(1)菌株WL86的细胞形态及菌落形态(图1，2)。营养琼脂本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．一种短小芽孢杆菌Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ，其保藏编号为ＣＧＭＣＣＮｏ．４７５６。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：吴慧玲，刘滢，王安如，庞洁，闫轶洁，周娜，刘鹏，汪攀，
申请(专利权)人：北京大北农科技集团股份有限公司，漳州大北农农牧科技有限公司，
类型：发明
国别省市：11
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