一种脱细胞真皮基质制造技术

本发明专利技术公开了一种脱细胞真皮基质及其制备方法。该脱细胞真皮基质是将哺乳动物皮肤依次用氢氧化钠溶液和去污剂处理后得到的产品。其制备方法包括以下步骤：１）剥离哺乳动物体表皮肤；２）清除皮下附带成分；３）清洗皮肤；４）将皮肤用２－５Ｎ氢氧化钠溶液处理１０－６０分钟；５）置换新的２－５Ｎ氢氧化钠溶液，处理１０－６０分钟；６）重复步骤５）１－３次；７）将步骤６）经氢氧化钠溶液处理的皮肤用质量百分浓度为１－５％的去污剂进行处理；８）用去热原水对皮肤进行清洗，得到脱细胞真皮基质。本发明专利技术在医学领域具有较高的实际应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及脱细胞真皮基质及其制备方法。
技术介绍
脱细胞真皮基质的研究经过了漫长的历程，早在1913年，Loewe就证实了真皮组织能增强移植皮的韧性、抑制肉芽组织生长和瘢痕形成，降低创面挛缩程度，由此人们开始注意到真皮组织在皮肤移植中的重要作用；1985年Heck等报道应用异体真皮作为自体表皮的移植载体，将二者复合移植于动物模型和烧伤患者的切痂创面，取得了较好的创面修复和抑制瘢痕增生的效果。但此后的应用和研究发现，同种异体皮肤移植所发生的免疫排斥反应主要源于表皮细胞、内皮细胞和成纤维细胞等细胞，由此推动了真皮的无细胞化研究(陈斌等.脱细胞真皮基质的研究进展.中国美容医学2001，10(4)358-359.)。1995年，Livesey等首先报告制成脱细胞真皮(LIVESEYSA，KERNDON DN.HOLLYOAK MA，et al.Transplanted acellular allograft dermalmatrix.Potential as a template for the reconstruction of viabledermis[J].Transplantation，1995，601-9.)。Wainwright用人的皮肤制成脱细胞真皮(WAINWRTIGHT DJ.Use of an acellular allograft deMal matrix(AlloDerm)in the management full-thickness bums[J].Burns，1995.21243-248.)。随后又有研究者将培养的自体表皮细胞膜片复合脱细胞异体真皮基质移植修复全层皮肤缺损获得成功。美国LifeCell公司将这一成果商品化，用新鲜的人尸体皮制成脱细胞真皮基质，命名为AlloDerm，并通过了美国FDA的批准进入了医用生物材料市场。2000年，香港中文大学威尔斯亲王医院陈斯贤、林炳权等将人体自体培养的表皮细胞复合在Integra基质上成功3例。国内陈璧等最早开始对异体真皮脱细胞处理和临床应用研究(崔正军.陈壁，等.复合皮研究中去除真皮中上皮成分的方让和意义[J].中华整形烧伤外科杂志，1997.13(1)37-39.)。1998年，孙永华等报道37例烧伤患者III度创面和瘢痕切除后，进行异体脱细胞真皮+自体薄皮片移植，成活平均为(96.2±3.4)％，创面收缩轻，外观平整，功能良好，临床效果满意(孙永华，李迟，王春元，等.脱细胞异体真皮与自体薄皮片移植的研究与应用[J].中华整形烧伤外科杂志.1998，14(4)370-373.)。2001年，冯祥生、谭家驹、潘银根等报道异种猪脱细胞真皮基质与自体表皮复合移植修复23例烧伤患者III度创面及瘢痕切除创面以及作为软组织凹陷患者的充填材料，成活的复合皮肤平坦、有弹性、颜色及远期效果同正常皮肤，表面光滑、外观平整、触软、皮肤可捏起，无瘢痕增生或轻度瘢痕增生，临床效果满意(冯祥生，潘银根，谭家驹，等.异种(猪)脱细胞真皮与自体表皮复合移植研究[J].中华整形外科杂志.2000.16(1)40-42.)。江苏启东医用材料研究所在此理论基础上推出了异种脱细胞真皮基质，并已获得了SFDA的批准进入临床应用于烧伤创面的覆盖。随着脱细胞真皮基质在烧伤领域的应用成功，口腔粘膜缺损的修复也渐渐引起了人们的关注，并有部分学者就脱细胞真皮基质修补口腔粘膜缺损进行了临床研究。2003年4月，法永红、李志韧、蔡兴伟应用脱细胞真皮修复口腔颌面外科皮肤、粘膜缺损并取得了满意的效果(法永红，李志韧，等.异体软组织修复材料在口腔颌面部缺损中的应用[J].现代口腔医学杂志2004.18(1)67-68.)；同年8月，石冰、宋庆高等应用组织工程化口腔粘膜修复裸露上颚取得了不错的效果(石冰、宋庆高等.组织工程化口腔黏膜移植修复裸露硬腭对上颌骨生长发育影响的研究华西口腔医学杂志2003.8 255-258.)。国内市场，北京桀亚公司、北京清源伟业生物组织工程科技有限公司将脱细胞真皮基质应用于皮肤缺损修复和口腔粘膜缺损修复的产品中，并均已取得了中国SFDA的批准。同种异体脱细胞真皮基质，具有以下特点①抗原性小；②低毒性；③植入后有新生血管和成纤维细胞长入。但同时存在着一些不足1、原料来源狭窄，有伦理方面的顾虑，不易普及；2、价格昂贵；3、有传播病毒的危险。尽管已有异种脱细胞真皮的应用，但目前脱细胞真皮基质的制备方法中为了降低材料的免疫原性，方法中都使用化学固定剂，如戊二醛等，这将大大改变了脱细胞真皮基质的天然结构，并阻碍了脱细胞真皮基质在生物体内的降解。另外，目前的脱细胞真皮基质制备方法中都没有考虑如何杀灭疯牛病等人畜共患病病原体的方法，这使得脱细胞真皮基质的临床应用承担了一定的风险。动物源性医疗器械种类广泛。动物组织和其衍生物在其特性方面要优于无生命体材料如金属、塑料或者纺织品。动物组织原料的数量和品种也是多样的。这些原料作为医疗器械的主要组成(如猪、牛的心脏，羊肠缝合线、止血剂等)，产品外结构或者巩固体(如肝磷脂、凝胶、胶原等)，或者用于生产加工过程(如动物脂)。目前动物源性医疗器械产品市场前景广阔。人畜共患并特别是疯牛并为动物源性医疗器械带来了风险。早在发现牛患疯牛病时，英国、德国、法国等国的专家学者就开始了对其它动物易感性及与人类得到感染的可能性进行了系统的科学研究。研究证实，疯牛病可以实验感染的其它动物有鼠、牛、绵羊、山羊、猪、水貉等等。英国野生动物园的长角羚及德国动物园驼鸟均发生疯牛病。英国还有69只猫吃了牛肉(骨)为所制成的动物饲料后感染了疯牛病的报道。至1997年2月底，英国已经发现了17例新型克雅-氏综合症人。估计，英国感染上新型克雅氏综合症的人多达200万人，此病的潜伏期为10-30年，10年后有可能会出现克雅氏综合症大流行。目前，疯牛病病原体的灭活方法很有限。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种杀灭细菌、病毒及疯牛病等病原体的脱细胞真皮基质。本专利技术所提供的脱细胞真皮基质，是将哺乳动物皮肤依次用氢氧化钠溶液和去污剂处理后得到的产品。所述氢氧化钠溶液的浓度为2-5N，去污剂可为质量百分浓度为1-5％的吐温-80、吐温-20、TRITON-X100或其它化学去污剂。本专利技术的第二个目的是提供一种上述脱细胞真皮基质的制备方法。本专利技术所提供的上述脱细胞真皮基质的制备方法，包括以下步骤1)剥离哺乳动物体表皮肤；2)清除皮下附带成分；3)清洗皮肤；4)将皮肤用2-5N氢氧化钠溶液处理10-60分钟；5)置换新的2-5N氢氧化钠溶液，处理10-60分钟；6)重复步骤5)1-3次；7)将步骤6)经氢氧化钠溶液处理的皮肤用质量百分浓度为1-5％的去污剂进行处理；8)用去热原水对皮肤进行清洗，得到脱细胞真皮基质。在上述制备方法中，步骤1)中可用于制备脱细胞真皮基质的哺乳动物的选择是多种多样的，包括猪、牛、羊、马或兔等。步骤2)中的皮下附带成分是指哺乳动物皮下附带的脂肪，肌肉和毛发等成分。步骤4)-6)中氢氧化钠溶液的浓度优选为2N，处理时间优选为20-30分钟；步骤6)中重复处理的次数为1即可。步骤7)中所用的去污剂可为吐温-80、吐温-20、TRITON-X100或本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种脱细胞真皮基质，是将哺乳动物皮肤依次用氢氧化钠溶液和去污剂处理后得到的产品。

【技术特征摘要】
1.一种脱细胞真皮基质，是将哺乳动物皮肤依次用氢氧化钠溶液和去污剂处理后得到的产品。2.根据权利要求1所述的脱细胞真皮基质，其特征在于所述氢氧化钠溶液的浓度为2-5N。3.根据权利要求1或2所述的脱细胞真皮基质，其特征在于所述去污剂为质量百分浓度为1-5％的吐温-80、吐温-20或TRITON-X100。4.一种权利要求1所述的脱细胞真皮基质的制备方法，包括以下步骤1)剥离哺乳动物体表皮肤；2)清除皮下附带成分；3)清洗皮肤；4)将皮肤用2-5N氢氧化钠溶液处理10-60分钟；5)置换新的2-5N氢氧化钠溶液，处理10-60分钟；6)重复步骤5)1-3次；7)将步骤6)经氢氧化钠溶液处理的皮肤用质量百分浓度为1-5％的去污剂进行处理；8)...

【专利技术属性】
技术研发人员：董群，林萍，孙先昌，
申请(专利权)人：烟台正海生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：37[中国|山东]