用于骨再生的纳米脱钙骨基质材料及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种晶粒尺寸达到纳米级，用于骨再生时抗原性弱、成骨诱导活性好的纳米脱钙骨基质材料及其制备方法。该方法包括下列步骤：１）采用新鲜健康成人骨，去除软组织，获得不同尺寸的骨块，流水冲洗２－６ｈｒ，无水乙醇脱水１－３ｈｒ，乙醚脱脂０．５－２ｈｒ，通风处干燥，置于－１０至－１００℃冰箱冻干，用磨样机粉碎成０．５－２．５ｍｍ颗粒；２）无水乙醇浸泡１－３ｈｒ，乙醚浸泡１－３ｈｒ，蒸馏水冲洗２－５次，盐酸浸泡２－８ｈｒ，乙醚浸泡０．５－２ｈｒ，通风处干燥得脱钙骨基质ＤＢＭ，置于－１０至－１００℃冰箱冻干；３）研磨机研磨ＤＢＭ至１－３００纳米颗粒，γ射线或环氧乙烷消毒，即得。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程
，涉及一种纳米骨再生材料及其制备方法，特别是涉及一种。
技术介绍
自古以来，骨不连，骨缺损和骨坏死一致是骨科医生面临的一大难题。自体骨是工人的理想骨移植材料，但其存在明显的缺点，如1、来源有限，不能满足大段骨缺损和各类翻修手术的需要，特别对于小儿病人；2、供区并发症带来的额外痛苦，有报道在5％～25％，主要有血管、神经损伤，骨折，血肿，感染和慢性疼痛等；3、延长了手术时间，相应地增加了出血量。临床上应用骨移植替代物取代自体骨进行植骨手术已成必然趋势。由同种异体骨经中性酸抽提后制成的脱钙骨基质(Demineralized Bone Matrix，DBM)，同时具有骨诱导和骨传导作用，其在脊柱融合术中已得到临床应用，被认为是取代自体骨的重要骨修复材料。但非纳米化的脱钙骨基质骨传导作用较自体骨弱；经脱钙处理后其生物力学性能下降，在植骨融合时的骨支撑作用降低；同时由于脱钙骨基质来源于异体骨，存在一定程度的排异反应。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种晶粒尺寸达到纳米级，用于骨再生时抗原性弱、成骨诱导活性好的纳米脱钙骨基质材料及其制备方法。本专利技术的技术方案是一种用于骨再生的纳米脱钙骨基质材料，它是通过先采用健康成人骨制备脱钙骨基质颗粒(DBM)，然后采用物理方法研磨至纳米晶颗粒得到的，它是一种纳米粉状颗粒，晶粒尺寸为1-300nm，脱钙后产品的钙残留量为1％-5％(重量比)。上述纳米脱钙骨基质材料的制备方法具体包括下列步骤1)采用新鲜健康成人骨，去除软组织，获得不同尺寸的骨块，流水冲洗2-6hr，无水乙醇脱水1-3hr，乙醚脱脂0.5-2hr，通风处干燥，置于-10℃至-100℃的冰箱冻干后，用磨样机粉碎成0.5-2.5mm颗粒。2)用无水乙醇浸泡1-3hr，乙醚浸泡1-3hr，蒸馏水冲洗2-5次，再用盐酸浸泡2-8hr，乙醚浸泡0.5-2hr，通风处干燥得脱钙骨基质DBM，再置于-10℃至-100℃的冰箱冻干。3)用研磨机研磨DBM至1-300nm纳米颗粒，再用γ射线或环氧乙烷消毒，即得纳米骨再生材料。上述方法中，研磨机的转数为10-1000转/秒，研磨时间为6-10hr。利用本专利技术的方法制备出来的纳米DBM在以下三个方面可显著改善DBM的性能1)DBM内部颗粒结构运用纳米构建，整块移植物内部孔隙率可以人工调控，可以使DBM的骨传导作用得到合理引导，以符合各类骨移植的需要。2)DBM纳米处理后，其疏水性增强，在体内植入后，更加稳定，可使DBM的抗原性降低，成骨诱导活性更趋稳定。3)应用纳米技术构建DBM可尽可能减少因DBM自身脱钙所带来的生物力学下降的后果，以使其更适用于植骨融合时的骨支撑作用。具体实施例方式实施例1本专利技术通过如下方法制备得到纳米骨再生材料1.采用新鲜健康成人骨，去除软组织，获得不同尺寸的骨块，流水冲洗4hr，无水乙醇脱水2hr，乙醚脱脂1.5hr，通风处干燥，置于-80℃冰箱冻干后，用磨样机粉碎成0.5mm颗粒；2.用无水乙醇浸泡2hr，乙醚浸泡2hr，蒸馏水冲洗3次，再用盐酸浸泡6hr，乙醚浸泡1.5hr，通风处干燥得脱钙骨基质DBM(钙残留量重量比为1％)，再置于-80℃冰箱冻干； 3.用转数为100转/秒的研磨机研磨DBM 10hr，至50nm的纳米颗粒，再用γ射线或环氧乙烷消毒，即得纳米骨再生材料。实施例2本专利技术通过如下方法制备得到纳米骨再生材料1.采用新鲜健康成人骨，去除软组织，获得不同尺寸的骨块，流水冲洗4hr，无水乙醇脱水1hr，乙醚脱脂2hr，通风处干燥，置于-80℃冰箱冻干，用磨样机粉碎成1.5mm颗粒；2.无水乙醇浸泡3hr，乙醚浸泡1hr，蒸馏水冲洗2次，用盐酸浸泡4hr，乙醚浸泡1hr，通风处干燥得脱钙骨基质DBM(钙残留量重量比为3％)，置于-30℃冰箱冻干；3.用转数为500转/秒的研磨机研磨DBM 6hr，至100nm的纳米颗粒，再用γ射线或环氧乙烷消毒，即得纳米骨再生材料。实施例3本专利技术通过如下方法制备得到纳米骨再生材料1.采用新鲜健康成人骨，去除软组织，获得不同尺寸的骨块，流水冲洗2hr，无水乙醇脱水3hr，乙醚脱脂1hr，通风处干燥，置于-80℃冰箱冻干，用磨样机粉碎成2.5mm颗粒；2.无水乙醇浸泡1hr，乙醚浸泡3hr，蒸馏水冲洗5次，用盐酸浸泡2hr，乙醚浸泡2hr，通风处干燥得脱钙骨基质DBM(钙残留量重量比为5％)，置于-60℃冰箱冻干；3.用转数为900转/秒的研磨机研磨DBM 8hr，至10nm的纳米颗粒，再用γ射线或环氧乙烷消毒，即得纳米骨再生材料。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于骨再生的纳米脱钙骨基质材料的制备方法，其特征在于它包括下列步骤：４）采用新鲜健康成人骨，去除软组织，获得不同尺寸的骨块，流水冲洗２－６ｈｒ，无水乙醇脱水１－３ｈｒ，乙醚脱脂０．５－２ｈｒ，通风处干燥，置于－１０℃至－１００℃ 的冰箱冻干后，用磨样机粉碎成０．５－２．５ｍｍ颗粒；５）用无水乙醇浸泡１－３ｈｒ，乙醚浸泡１－３ｈｒ，蒸馏水冲洗２－５次，再用盐酸浸泡２－８ｈｒ，乙醚浸泡０．５－２ｈｒ，通风处干燥得脱钙骨基质ＤＢＭ，再置于－１０℃至－１００℃的冰箱 冻干；６）用研磨机研磨ＤＢＭ至１－３００ｎｍ纳米颗粒，再用γ射线或环氧乙烷消毒，即得纳米骨再生材料。

【技术特征摘要】
1.一种用于骨再生的纳米脱钙骨基质材料的制备方法，其特征在于它包括下列步骤4)采用新鲜健康成人骨，去除软组织，获得不同尺寸的骨块，流水冲洗2-6hr，无水乙醇脱水1-3hr，乙醚脱脂0.5-2hr，通风处干燥，置于-10℃至-100℃的冰箱冻干后，用磨样机粉碎成0.5-2.5mm颗粒；5)用无水乙醇浸泡1-3hr，乙醚浸泡1-3hr，蒸馏水冲洗2-5次，再用盐酸浸泡2-8hr，乙醚浸泡0.5-2hr，通风处干燥得脱钙骨基质DBM，再置于-10℃至-100℃的冰箱冻干；6)用研磨机研磨DBM至1-300nm纳米颗粒，再用γ射线或环氧乙烷消毒，即得纳米骨再生材料。2.根据权利要求1所述的用于骨再生的纳米脱钙骨...

【专利技术属性】
技术研发人员：张忠民，陈雄生，
申请(专利权)人：上海再生医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]