一株产抗氧化剂的菌株制造技术

一株产抗氧化剂的菌株，它涉及一株青霉菌菌株。本发明专利技术提供了一株青霉菌菌株，可产生抗氧化剂，为抗氧化剂的获得提供微生物资源基础。本发明专利技术产抗氧化剂的菌株为青霉JTLR-1，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏日期为2011年3月21日，保藏号为CGMCC?No.4701。本发明专利技术的青霉JTLR-1能够产生抗氧化剂，为抗氧化剂的获得提供微生物资源基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一株青霉菌菌株。
技术介绍
自由基是生命活动中多种生化反应的中间代谢物质。自由基产生过多或清除过慢，会造成机体在分子水平、细胞水平及组织器官水平的各种损伤，加速机体的衰老过程并诱发各种疾病。自由基攻击生命大分子和各种细胞器造成组织损伤，是引起机体衰老的根本原因，也是诱发肿瘤等恶性疾病的重大原因。抗氧化物质(抗氧化剂)是指能够清除氧自由基，抑制或消除以及减缓氧化反应的一类物质。抗氧化剂的开发与研究一直以来受到人们的广泛关注，天然抗氧化剂已从单纯作为油脂和含脂食品的抗氧化剂，发展到作为体内氧自由基的清除剂，起到保护人体细胞组织，保护心脑血管循环系统、抗癌及延缓衰老等生理作用。目前天然抗氧化物质主要是从动植物中提取的，如维生素类、酶类和天然药物类等。但是动植物中天然抗氧化物质含量较低，提取工艺复杂，而且从这些资源提取势必使这些动植物资源遭到严重破坏，造成生物多样性和生态环境的损失。
技术实现思路
本专利技术提供了一株青霉菌菌株，可产生抗氧化剂，为抗氧化剂的获得提供微生物资源基础。本专利技术产抗氧化剂的菌株为青霉(Penicillium sp. ) JTLR-I，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3 号，保藏日期为2011年3月21日，保藏号为CGMCC No. 4701。本专利技术青霉JTLR-I属于半知菌亚门(Deuteromycotina)，丝孢菌纲 (Hyphomycetes)，丝孢目(Moniliales)，丛梗孢科(Moniliaceae)，青霉属(Penicillium)。本专利技术青霉JTLR-I在PDA固体培养基或查氏固体培养基中培养，1 2天培养基表面有白色絮状菌丝体，生长快，质地柔软，2天后平板底部中心处有少量红色物质产生，边缘为淡黄色，5 7天后可产生分生孢子，菌落正面菌丝夹杂大量分生孢子(见图1)，表面无渗出液，分生孢子颜色为深绿色，菌落反面呈红色夹杂黄色(见图幻。青霉JTLR-I在PDA 液体培养基或查氏液体培养基上培养3 15天后，摇瓶中长满白色菌丝球，呈小球型，溶液表面液面层及摇瓶壁上有大量产红色夹杂黄色菌丝体产生。在光学显微镜下，菌丝呈长丝状，菌丝中间无隔(见图幻。分生孢子梗直径2. 5 3. 5微米；帚状枝为2层，下层小梗3 5个，上层小梗5 7个。分生孢子呈圆形或椭圆形，大小O. 5 μ m 3. 5 μ m) X O. O μ m 2. 5 μ m)。本专利技术青霉JTLR-I可在PDA培养基或查氏培养基中培养，最适生长温度25 ^°C，最适pH值为5 7。本专利技术青霉JTLR-I能够产生抗氧化剂，使用β -胡萝卜素-亚油酸法和清除DPPH法对青霉JTLR-I的发酵产物和化学合成抗氧化剂BHT的抗氧化活性进行检测，实验结果显示青霉JTLR-I产生的抗氧化剂优于BHT的抗氧化活性。本专利技术青霉JTLR-I属于青霉属(Penicillium sp.)，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2011年3月21日，保藏号为CGMCC No. 4701。附图说明图1为本专利技术青霉JTLR-I的菌落正面形态图；图2为本专利技术青霉JTLR-I的菌落背面形态图；图3为本专利技术青霉JTLR-I的菌丝形态图。具体实施例方式本专利技术技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。具体实施方式一本实施方式产抗氧化剂的菌株为青霉JTLR-1，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏日期为2011年3月21日，保藏号为 CGMCC No. 4701。青霉JTLR-I在PDA固体培养基或查氏固体培养基中培养，1 2天培养基表面有白色絮状菌丝体，生长快，质地柔软，2天后平板底部中心处有少量红色物质产生，边缘为淡黄色，5 7天后可产生分生孢子，菌落正面菌丝夹杂大量分生孢子，表面无渗出液，分生孢子颜色为深绿色，菌落反面呈红色夹杂黄色。青霉JTLR-I在PDA液体培养基或查氏液体培养基上培养3 15天后，摇瓶中长满白色菌丝球，呈小球型，溶液表面液面层及摇瓶壁上有大量产红色夹杂黄色菌丝体产生。在光学显微镜下，菌丝呈长丝状，菌丝中间无隔。分生孢子梗直径2. 5 3. 5微米；帚状枝为2层，下层小梗3 5个，上层小梗5 7个。分生孢子呈圆形或椭圆形，大小(2. 5 μ m 3. 5 μ m) X (2. 0 μ m 2. 5 μ m)。本实施方式的青霉JTLR-I可在PDA培养基或查氏培养基中培养，最适生长温度 25 ^°C，最适pH值为5 7。具体实施方式二 本实施方式从榛属植物茎皮内分离纯化得到，具体步骤为一、 将带部分木质部的榛树皮先用无菌水冲洗去掉杂质，再用质量浓度为75%的酒精浸泡 lmin，然后用无菌水冲洗掉酒精，在用无菌剪刀剪成面积为0. 5cmX0. 5cm的榛树皮小块； 二、将榛树皮小块放置于PDA琼脂固体培养基平板上，在条件下恒温培养至树皮小块周围明显长出菌丝；三、采用尖端菌丝挑取法将菌接种于PDA琼脂固体培养基，在恒温条件下培养3 5天，挑取单菌落，用PDA琼脂固体培养基平板划线培养法，经多次分离、筛选、纯化，得到可以产生抗氧化剂的青霉JTLR-1。对分离纯化得到的青霉JTLR-I进行分子生物学鉴定，按以下步骤进行提取菌株的总DNA，采用真菌通用引物ITS1、ITS4扩增青霉JTLR-1 rDNA ITS序列，PCR产物纯化后，经NCBI数据库序列比对，与青霉属(Penicillium sp.)内各个种之间有极高的同源性，同源性为98%以上，通过结合菌体形态特征、生长条件确定青霉JTLR-I属于青霉属 (Penicillium sp.)。将本实施方式的青霉JTLR-I接种于种子培养基(PDA琼脂固体培养基)，于培养2天，然后转接于装有200mL发酵培养基(PDA液体培养基)的500mL三角瓶中，于 28°CU80r/min条件下摇瓶培养7天，收集发酵固体培养物。对本实施方式的青霉JTLR-I的发酵产物进行抗氧化活性检测，具体如下取青霉 JTLR-I的发酵固体培养物用液氮冷冻并研碎后，以Ig固体培养物加入IOmL质量浓度50% 的甲醇水的比例进行提取，用正己烷萃取，直至正己烷萃取液无色后，除去上层正己烷层， 取下层冷冻干燥，即得到菌产抗氧化剂。(1) β -胡萝卜素-亚油酸法测定菌产抗氧化剂的抗氧化活性将0. ang β-胡萝卜素溶于0. 2mL氯仿中，加入20mg亚油酸及200mg吐温-40， 混合均勻后于40°C水浴中除去氯仿，然后加入50mL蒸馏水(经鼓氧气2 :3min)，剧烈振荡，即配成反应介质溶液。同时设置空白，除不加胡萝卜素氯仿溶液外，其他步骤同前。 于具塞试管中逐一加入4. OmL反应介质溶液，将菌产抗氧化剂和化学合成抗氧化剂BHT溶于无水乙醇配制成系列浓度溶液作为样液，分别加入0. 2mL样液，同时设置空白调零管、对照管和样品管，其中空白调零管中不含胡萝卜素与试样，对照管不含试样，以0. 2mL无水乙醇代替试样溶液。上述溶液混勻后，置于50°C水浴中恒温，在470nm波长下测定t =本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一株产抗氧化剂的菌株，其特征在于产抗氧化剂的菌株为青霉（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ　ｓｐ．）ＪＴＬＲ－１，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（ＣＧＭＣＣ），保藏地址是北京市朝阳区北辰西路１号院３号，保藏日期为２０１１年３月２１日，保藏号为ＣＧＭＣＣＮｏ．４７０１。

【技术特征摘要】
1. 一株产抗氧化剂的菌株，其特征在于产抗氧化剂的菌株为青霉(Penicillium sp.) JTLR-1，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员...

【专利技术属性】
技术研发人员：金涛，邹积宏，
申请(专利权)人：黑龙江大学，
类型：发明
国别省市：93