光动力治疗肿瘤药物组合物制造技术

本发明专利技术提供光动力治疗肿瘤药物组合物。所述组合物包含：ａ、单位剂量的叶绿素ａ稳定降解产物；ｂ、药学上可接受的载体。所述叶绿素ａ稳定降解产物包括脱镁叶绿酸ａ、焦脱镁叶绿酸ａ、二氢卟吩ｅ４、紫红素１８／二氢卟吩Ｐ６。本发明专利技术的光动力治疗肿瘤药物在非细胞体系内的光动力敏化效应、对人癌细胞的光灭活作用和对动物移植瘤的光动力疗效均优于临床用的光动力治疗肿瘤药物血卟啉衍生物（ＨｐＤ）。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术属医药
，具体涉及叶绿素a降解产物光动力治疗肿瘤药物。目前临床应用的光动力治疗肿瘤药物，如血卟啉衍生物(HematoporphyrinDerivative，HpD)、光敏素II或卟非姆钠(Photofrin II，Sodium Pofimer)和癌光啉(Photocarcinorin，PsD-007)存在着三个共同的缺点，即(1)均为复杂的混合卟啉制剂，质量难以控制；(2)红光区吸收系数小，由此导致组织特别是靶病灶光动力效应低，限制了疗效的提高；(3)对肿瘤组织无选择性定位作用的光敏化卟啉含量高，造成正常组织光毒反应相对严重。上述缺点从安全、疗效、质量可控性三个方面限制了它们作为法定新药的发展(许德余肿瘤光动力疗法，中国医药科技出版社，1996年5月，北京；Kessel D and Dougherty TJPorphyrin Photosensitization.Plenun Press，New York，1983；Spinelli P et al.edPhotodynamic Therapy andBiomedical Lasers.Amsterdam-London，New York-Tokyo，Excerpta Medica，1992)。因此，本专利技术的目的在于提供更加安全有效的光动力治疗肿瘤药物。叶绿素a稳定降解产物在红光区的吸收系数高于上述混合卟啉制剂约一个数量级，肿瘤光生物活性远高于后者，且不含其他对肿瘤无定位作用的光敏化物质。毒性也明显低于上述混合卟啉制剂。本专利技术者将其开发成光动力治疗肿瘤药物。本专利技术的光动力治疗肿瘤药物组合物包含a.单位剂量的叶绿素a稳定降解产物；b.药学上可接受的载体。以下对本专利技术作详细描述。本专利技术的光动力治疗肿瘤药物组合物中，叶绿素a稳定降解产物包括脱镁叶绿酸a、焦脱镁叶绿酸a、二氢卟吩e4、紫红素18/二氢卟吩p6，以紫红素18/二氢卟吩p6和二氢卟吩e4为佳。本专利技术中所述的“单位剂量”指一次静脉注射的剂量，在注射该剂量后3-6小时进行光辐照。一般采用的单位剂量为25-250mg，较佳为50-150mg，约相当于1-2mg/kg体重。光辐照剂量为150-180J/cm2(用670-690nm波长的光)。本专利技术所述的“药学上可接受的载体”指适合于静脉注射的任何物质，较佳为注射用水。本专利技术以我国丰富的廉价资源家蚕粪叶绿素初提物为基始原料，经酸降解得到中间体脱镁叶绿酸a和焦脱镁叶绿酸a混合物，并由此中间体混合物制备得到叶绿素a稳定降解产物脱镁叶绿酸a、焦脱镁叶绿酸a、二氢卟吩e4和紫红素18/二氢卟吩p6。本专利技术对作为光动力治疗肿瘤药物的紫红素18和二氢卟吩e4的光敏化效应、对体外培养人癌细胞的光灭活作用和对动物移植瘤的光动力疗效进行了研究。(1)叶绿素a稳定降解产物紫红素18/二氢卟吩p6和二氢卟吩e4在非细胞体系内的光敏化效应光动力治癌的基础是某些化合物在恶性组织内通过对可见光入射光子的能量转递使周围介质中的分子氧成为单线态氧(1O2)、氢氧自由基(OH)、超氧阴离子(O-2)和过氧化氢等活性氧物质。它们可使生物分子的敏感基团氧化失活，并由此导致细胞器损伤和最终引起肿瘤细胞死亡而达到治愈肿瘤的目的。已知单线态氧在活性氧物质中占有较大的比例，它在重水(D2O)中的寿命较长。通常以重水中的光敏化力作用来初步预测一种物质作为光动力治癌药物的可能发展前景。为了比较叶绿素a降解产物与目前临床使用的光动力治癌药物HpD在非细胞体系内光敏化作用的强弱，按Juri G et alMed Biol Eviron1980，8139；李益新等生物物理学报1985，1(4)257；Bodaness RS et alJ Biol Chem1977，2528554；许德余等第二军医大学学报1988，9(5)435报道的方法，对比测定了叶绿素a稳定降解产物紫红素18/二氢卟吩p6和二氢卟吩e4在重水中对NADPH光氧化作用的敏化效应。结果如下表 表中所列数据表明，两种叶绿素a稳定降解产物不同浓度下(1μmol/L-5μmol/L)对NADPH在重水中的光氧化作用均明显较HpD为强。(2)叶绿素a稳定降解产物紫红素18/二氢卟吩p6和二氢卟吩e4对体外培养人癌细胞的光灭活作用参照文献方法(彭迁，等第二军医大学学报1986，7280)测定了叶绿素a稳定降解产物紫红素18/二氢卟吩p6和二氢卟吩e4对体外培养人大肠癌细胞SW-1116系和人红白血病细胞K-562系的光灭活作用，结果见下表 表中数据表明，两种叶绿素a稳定降解产物对两种体外培养人癌细胞的光灭活作用均明显较HpD为强。单纯用同剂量激光辐照或单加受试化合物与空白对照一样均对体外培养人癌细胞无作用，表明叶绿素a稳定降解产物是颇有前景的肿瘤光动力敏化剂。其所致体外人癌细胞的光灭活作用是由其导致的光动力损伤效应的结果。(3)三种叶绿素a稳定降解产物对动物移植瘤的光动力疗效参照文献方法(陈文晖，等第二军医大学学报1986，7253)测定了紫红素18/二氢卟吩6、二氢卟吩e4对小鼠S-180肉瘤、Lews肺癌和U-14宫颈癌(均为实体瘤)的光动力疗效，结果如下表。 光动力治疗条件受试化合物剂量5mg/kg；光剂量270J/cm2，波长630nm；疗效指标以荷瘤小鼠激光辐照后，肿瘤消失，经45天未见复发为治愈。上表结果表明，两种叶绿素a稳定降解产物对不同动物移植瘤的光动力治疗效果均明显优于临床治癌用的HpD，提示它们是理想的光动力治癌新药。急性毒性试验用常规方法测定叶绿素a稳定降解产物紫红素18/二氢卟吩p6和二氢卟吩e4对小鼠静脉注射的半数致死量(LD50)，并与HpD进行比较。结果见下表紫红素18/二氢卟吩p6280±12.43mg/kg二氢卟吩e4 252±9.65mg/kgHpD175±21.20mg/kg以上结果表明，紫红素18/二氢卟吩p6和二氢卟吩e4的毒性低于HpD。以下用实施例对本专利技术进行举例说明，这些实施例旨在阐述本专利技术的最佳实施方案。本领域技术人员根据本专利技术的启示，结合本领域的常识所做的各种变更，均落在本申请权利要求的范围内。实施例1 中间体粗品脱镁叶绿酸a和焦脱镁叶绿酸a的制备取市售蚕沙叶绿素初提物500g，加入乙醚2L，充分搅匀后，缓缓加入浓盐酸(12N)2L，继续搅拌反应0.5-1小时，室温放冷，待分层后，分取酸层，用强碱调节pH至5-6，滤集析出的沉淀，后者用水洗净、抽干，置真空干燥器中，P2O5减压干燥。所得粗品脱镁叶绿酸a和焦脱镁叶绿酸a收率按蚕沙叶绿素初提物计算为20％。毋须分离纯化即可直接用于下步反应。实施例2紫红素18的制备将脱镁叶绿酸a和焦脱镁叶绿酸a粗品混合物50g溶于2L乙醚，加入200mL25％氢氧化钾正丙醇溶液，室温下通空气反应4小时，反应混合物加2倍量水稀释后，用醋酸调节pH至2-3，上述酸性水溶液用氯仿萃取(400mL/次，3次)，合并氯仿萃取液，加无水硫酸镁干燥过夜，滤除干燥剂，在旋转蒸发器上蒸馏回收氯仿，残存物即为紫红素18粗品重10g。收率按粗品脱镁叶绿酸a计算20％。5g紫红素18粗品与适量硅胶H研匀，过200g硅胶H柱，展开剂氯仿-丙酮-甲醇-甲酸(70∶2本文档来自技高网...

【技术保护点】
光动力治疗肿瘤药物组合物，所述组合物包含： ａ．单位剂量的叶绿素ａ稳定降解产物； ｂ．药学上可接受的载体。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：许德余，
申请(专利权)人：上海复旦张江生物医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]