动物饲料中４种细菌１６ｓ　ｒＤＮＡ　ＰＣＲ－ＲＦＬＰ指纹图谱分析方法技术

本发明专利技术为动物饲料中４种细菌的ＰＣＲ－ＲＦＬＰ检测技术，具体地说是用１４种内切酶对存在于动物饲料中的４种芽孢杆菌的１６ｓ　ｒＤＮＡ进行酶切，每种菌形成一个１６ｓ　ｒＤＮＡ的内切酶指纹图谱，从而建立４种菌的检测方法。方法包括ＰＣＲ扩增１６ｓ　ｒＤＮＡ，然后以１４种内切酶分别对４种菌的１６ｓ　ｒＤＮＡ扩增产物进行酶切，再经琼脂糖凝胶电泳。４种细菌分别是：阪崎肠杆菌、戴氏西地西菌、金黄色葡萄球菌、居泉沙雷菌。具体检测方法包括４种菌ＤＮＡ的提取、ＰＣＲ扩增１６ｓ　ｒＤＮＡ、内切酶酶切、琼脂糖凝胶电泳、ＰＣＲ－ＲＦＬＰ指纹图谱的建立。其优点是快速、特异性强、灵敏度高、操作简便。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
存在于动物饲料中４种细菌鉴定的快速检测方法，其特征在于所使用的内切酶种类及酶切后形成的指纹图谱：共用１４种内切酶４种细菌进行酶切鉴定，１４种内切酶为：Ａｖａ　Ⅰ，ＢａｍＨ　Ⅰ，ＢｇⅡ，Ｄｒａ　Ⅰ，ＥｃｏＲ　Ⅰ，ＥｃｏＲⅡ，ＨｉｎｄⅢ，Ｈｉｎｆ，Ｈｐａ　Ⅰ，Ｐｓｔ　Ⅰ，Ｓｍａ　Ⅰ，Ｔａｑ　Ⅰ，Ｘｂａ　Ⅰ，Ｘｍａ　Ⅰ，并按照这样的顺序进行酶切。指纹图谱为这１４种内切酶切割后形成１４道的电泳图谱，而且每种菌均具有特异而且唯一的指纹。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：肖西志，高宏伟，邓明俊，朱来华，
申请(专利权)人：山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：95