一种尾叶香茶菜总二萜的制备方法技术

一种新的天然药物有效部位－尾叶香茶菜总二萜，其特征在于主要由尾叶香茶菜［Ｒａｂｄｏｓｉａ　　　ｅｘｃｉｓａ（Ｍａｘｉｍ．）Ｈａｒａ］地上部分提取的二萜类化合物组成。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于天然药物化学领域，涉及从尾叶香茶菜地上部分提取的尾叶香茶菜总二萜，一种新的天然药物有效部位及其制备方法和在制备癌症治疗药物中的用途。
技术介绍
肿瘤是一种常见病、多发病，它严重威胁着人类的健康和生命。近年来由于手术切除和放射疗法有驻足不前之势，而化学药物治疗又无法回避严重的毒副作用，所以人们的目光集中到了毒副作用相对较轻的天然药物上。二萜类化合物是一类抗癌作用较强的天然化合物之一，目前人们已对几百种二萜类化合物进行了抗癌活性筛选，从中找出了一些适于作为抗癌药物开发的化合物，有些已进入临床试验阶段。尾叶香茶菜是唇形科香茶菜属植物，在吉林省长白山区野生资源较为丰富。到目前为止，已从中分离出了ExcisaninA、ExcisaninB、ExcisaninC、ExcisaninD、ExcisaninE、ExcisaninF、ExcisaninG、Kamebakaurin、Kamebanin等二萜类化合物。日本公开特许公报(昭57-167938)和Tetsuro Fujita(Plant medica，1988，414-417)的论文报道了它们中的一些单体的细胞毒活性和对荷瘤动物的生命延长作用，结果表明ExcisaninA、ExcisaninB、Kamebanin、Kamebakaurin具有较强的细胞毒活性，对荷瘤动物具有生命延长作用。中医中药是我国人民千百年来同疾病抗争过程中积累创造出来的防病治病的科学理论体系，它强调辩证施治和中药的多组分多靶点协同作用，这一理论在中医治疗癌症的过程中取得了良好的效果，为世人所瞩目。我国药品管理法规中也制定了把中药、天然药物有效部位作为新药审批的规定。另外研究结果表明，有时中药总提取物或有效部位的活性不完全等同于其中单体的活性，同时提取物或有效部位的毒性往往比单体低。至今为止，没有人对尾叶香茶菜地上部分的二萜类化合物的自然混合物，即尾叶香茶菜总二萜的化学及药理作用进行过研究。综合上述考虑，本专利技术人在单体化合物研究的基础上开始了以尾叶香茶菜地上部分中二萜类化合物的自然混合物即尾叶香茶菜总二萜的化学及药理研究工作，从而完成了本专利技术。
技术实现思路
本专利技术所述的新的天然药物有效部位，即尾叶香茶菜总二萜是指从尾叶香茶菜地上部分提取分离的二萜类化合物的自然混合物。本专利技术的目的就是要提供以尾叶香茶菜地上部分的总二萜为有效部位的新的抗癌药物。本专利技术是通过如下技术研究过程完成的，包括尾叶香茶菜地上部分化学成分研究，有效部位即尾叶香茶菜总二萜的提取工艺研究，有效部位化学成分组成研究，有效部位中总二萜含量测定方法研究，有效部位抗癌活性研究及有效部位急性毒性研究。1.尾叶香茶菜地上部分化学成分研究本专利技术人对尾叶香茶菜地上部分(茎叶)的化学成分进行了更加深入的研究，从尾叶香茶菜地上部分共分离出了12个二萜类化合物，其中除了上述前人已分离过的二萜类化合物ExcisaninA(ent-1β，7β，12β，14α-tetrahydroxy-16-kauren-15-one)、ExcisaninB(ent-12β-Acetoxy-1β，7β，14α-trihydroxy-16-kauren-15-one)、ExcisaninD(ent-18-Acetoxy-1β，7β，14α-trihydroxy-16-kauren-15-one)、Kamebakaurin(ent-1β，7β，14α，20-tetrahydroxy-16-kauren-15-one)、Kamebanin(ent-1β，7β，14α-trihydroxy-16-kauren-15-one)、RabdoserrinB(ent-1β，7β，12β，14α，20-Pentahydroxy-16-kauren-15-one)外，还首次从尾叶香茶菜地上部分分离出了RabdokunminC(ent-7β，12β，14α-18-tetrahydroxy-16-kauren-15-one)、ReniforminA(ent-20-Acetoxy-1β，7β，14α-trihydroxy-16-kauren-15-one)两个已知二萜类化合物，同时还分离鉴定了四个新的二萜类化合物，分命名为ExcisaninH(ent-14，20-epoxy-1β，7β，14-trihydroxy-16-kauren-15-one)、ExcisaninI(ent-7β，12β，14α，20-tetrahydroxy-16-kauren-15-one)、ExcisaninJ(ent-7β，14α，18，20-tetrahydroxy-16-kauren-15-one)、ExcisaninK(ent-1β，7β，14α，20-tetrahydroxy-16-kauren-15-one)，而且发现RabdokunminC在尾叶香茶菜中的含量较高，仅次于Kamebakaurin、ExcisaninA、Kamebanin，与ExcisaninB相近。上述12个二萜类化合物的结构式如下。光谱图见图1-38。 Kamebakaurin Excisanin B Kamebanin Excisanin A Rabdokunmin C Rabdoserrin B Excisanin I Excisanin K Excisanin J Excisanin D Excisanin H reniformin A 2.尾叶香茶菜总二萜提取包括本专利技术人新分离的二萜类化合物，尾叶香茶菜地上部分含有10多种二萜类化合物，其中含量较高的有5、6种。从这些化合物的理化性质及将来大生产的要求考虑，专利技术了如下提取工艺。尾叶香茶菜地上部分用水加热提取，提取液过大孔吸附树脂(D4020、AB-8、860021、D101、HP-20等)吸附，再用乙醇、甲醇、丙酮等有机溶剂或它们与水的混合溶剂洗脱，洗脱液减压回收溶剂，真空干燥得尾叶香茶菜总二萜。另外上述从大孔吸附树脂柱下来的洗脱液直接或经过浓缩后再用脱色树脂(D941)、氧化铝、活性炭的一种或多种脱色，脱色后的溶液减压回收溶剂，真空干燥，可以得到总二萜的含量提高了的尾叶香茶菜总二萜。另外，还可以经过硅胶柱层析和/或ODS柱层析和/或氧化铝柱层析和/或聚酰胺柱层析进一步纯化，获得总二萜含量更加提高了的尾叶香茶菜总二萜。上述方法制备的尾叶香茶菜总二萜，能够满足我国《药品注册管理办法》中的有关规定，可以制备成片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、注射剂以及其它医药学上可能的制剂供临床使用。3.有效部位化学成分组成研究通过高效液相色谱法与标准品对照，发现本有效部位中除了含有ExcisaninA、ExcisaninB、RabdokunminC、Kamebakaurin、Kamebanin等二萜类化合物外还可能含有ExcisaninD、RabdoserrinB、ExcisaninH、ExcisaninI、ExcisaninJ、ExcisaninK等含量较低的二萜类成分和含量更低的结构尚不清楚的其他二萜类成分。4.有效部位中总二萜含量测定方法研究化合物的含量测定有多种方法可以选择，其中一般以高效液相色谱法的准确度较高，为此目前本专利技术人完成了利用HPLC法本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：桂明玉，金永日，李绪文，
申请(专利权)人：桂明玉，
类型：发明
国别省市：