含有总红花黄色素的红花提取物的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种红花提取物的制备方法，包括：红花用至少２倍水温浸提取得提取液Ⅰ；提取液浓缩得浓缩液，然后将浓缩液上大孔吸附树脂分离，依次以水和醇洗脱，收集醇洗脱部分，回收洗脱液至醇含量２５％以下，得到洗脱液Ⅱ；通过陶瓷膜超滤，得到超滤液Ⅲ；超滤液减压回收溶剂至稠膏，干燥即得；该提取物的特征为总红花黄色素含量＞８０％，羟基红花黄素Ａ含量＞２０％，山奈酚－３－Ｏ－芸香糖苷含量＞０．６％。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种红花提取物的制备方法，具体地说，是含有总红花黄色素的红花提取物及其制备方法，以及含有该提取物的药物组合物及其应用。
技术介绍
中药红花为菊科植物Carthamus tinctorius L.的干燥花，是传统的活血化瘀药，具有活血化瘀、通经止痛的功效，临床上利用红花或含红花的方剂治疗冠心病、心绞痛等诸多血液循环障碍疾病有很好疗效，同时，总红花黄色素因具有很好的着色能力很强的稳定性，作为食用色素而广泛应用。70年代以来，对中药红花的化学成分研究非常深入，并已明确其有效成分为水溶性总红花黄色素，其主要有效单体成分为羟基红花黄素A等。有关总红花黄色素的生产制备方法有很多报道，早期常用的方法主要是水提醇沉，提取液干燥后得提取物[周瑜芳等，红花有效成分的提取，新疆工学院学报，1997，18(4)270-272]；近年多用水或稀醇浸提或加热提取，提取液由聚酰胺或大孔吸附树脂进行纯化，干燥后得提取物[参见CN 1101424C；CN 1085674C]。上述两专利采用极性溶剂浸提，提取液简单处理后用吸附剂吸附有效成分的方法进行分离纯化，干燥后得到提取物，该方法在一定程度上提高了红花提取物的质量，但由此方法制得的提取物有效成分的组成以及杂质的量均不明确，造成由其开发而成的制剂稳定性和安全性较差，尤其是不适合用于注射剂，随着中药注射剂在临床上的广泛应用，由中药注射剂引起的不良反应报道很多[莫斌斌等，中药注射剂不良反应的文献统计分析，中南药学，2003，1(3)184-185]，大多数是由于沿用传统的提取工艺而精制程度不足所造成的，因此其用药安全性是业内忧虑并关注的问题。如何开发出一种成熟的制备工艺，使红花提取物的有效成分及其含量明确、纯度高、杂质少，并同时可以去除聚合大分子和热原，提高含有总红花黄色素的红花提取物的制剂稳定性，使之直接用于注射剂，进而保证红花制剂尤其是注射剂的安全性，成为业内人士致力解决的问题。
技术实现思路
本专利技术人通过大量的试验研究，得到了红花提取物的有效成分，即一种含有总红花黄色素(也可称为红花黄色素)的提取物，该提取物是红花粗提物经过精制而制得，其中总红花黄色素的含量很高，解决了现有技术有效成分低的缺陷，达到了明确红花有效成分的组成的目的，并提高了其含量，从而提高了生物利用度，增加了治疗效果。 本专利技术的目的在于提供上述含有总红花黄色素的红花提取物的制备方法，该方法包括提取精制过程，尤其是采用HPD600型或HP-20型大孔吸附树脂以及陶瓷膜超滤的技术，使得红花提取物中有效成分含量高、杂质少，更有利于提供其在制剂上的应用。 本专利技术的目的还在于提供一种红花提取物，其由常规提取分离以及陶瓷膜超滤精制而成，该提取物成分明确，更适合直接用于红花提取物的注射剂。 本专利技术提供了一种红花提取物的制备方法，其中包括中药材红花用至少2倍水温浸提取得提取液；浓缩，然后将浓缩液上大孔吸附树脂分离，依次以水和低浓度醇(浓度约为20-50％)洗脱，收集醇洗脱部分，回收洗脱液至醇含量20％以下；通过陶瓷膜超滤，超滤液干燥。 本专利技术方法中红花药材采用温提的好处在于，红花中含有的一些有效成分在冷浸(冷水浸泡提取的方法)时提取不完全，而加热回流提取的情况下有可能因氧化或者分解而使有效成分被破坏，初提的筛选实验也证明，温提的效果优于冷浸和热提。2-14倍水温提得到的提取液借助经过筛选优选的适合红花提取物的HPD600型或HP-20型大孔吸附树脂以及超滤膜(陶瓷膜)分离技术，不仅提高了有效成分的产率和含量，同时也有效地去除了红花提取物中的聚合大分子和热原，使其可以安全有效地应用于注射剂型中。 上述方法其中的温浸提取温度为40-90℃，优选50-80℃，最优选65-75℃；其中分离的步骤包括先用1-2个柱床体积水洗，所述柱的径高比为1∶6-1∶10，以除去多糖等水溶性杂质弃去水液，再用低浓度(20％-50％，优选30％)醇洗脱3-5个柱床体积，收集洗脱液回收至醇浓度低于20％；所述的陶瓷膜的截留分子量优选为1万，若综合考虑收率等因素，也可以是6000-5万，优选为1-3万，以便于提高纯度和收率，以及更有效地去除所述红花提取物中的聚合大分子和热原。 用于中药提取精制领域的膜超滤的种类有很多，例如聚砜有机膜、聚酰胺膜、醋酸纤维膜、陶瓷膜、四氟乙烯膜等，理论上只要是限定了相同的截留分子量范围的超滤膜，其超滤的效果应该是相同的。但在对红花提取物精制超滤的实际操作过程中，申请人发现，对于制备含有总红花黄色素的注射用制剂而言，陶瓷膜的超滤效果是最好的，其中该膜的稳定性、耐酸碱性、通透性等指标性能好，对于过滤总红花黄色素含量高的这种粘稠性强的中药提取物，相应的损失大为减少、可操作性强，明显优于其他膜超滤所能达到的效果，对于相同量药材和相同截留分子量处理的对比实验结果如下 本专利技术也对吸附树脂的种类型号进行了筛选，具体筛选方法为取HPD600、HPD100、Dianion HP-20及860021型等不同类型的树脂，首先进行预处理，取1L吸附树脂装柱，待用；将红花提取液(测得其中羟基红花黄素A含量为7.628mg/ml)上柱，TLC检查是否饱和，先用水洗，再用不同浓度的乙醇洗脱，分别收集过柱残液、水洗液、乙醇洗脱液，测定其中羟基红花黄素A含量，并计算有关的特性参数，结果见表7。 表7 不同型号树脂吸附纯化特性参数 由表7结果可知，以羟基红花黄素A为指标成分，红花提取液在不同树脂上具有不同的吸附、洗脱效果，其中HPD100型树脂比上柱量较小；HPD600、HP-20、860021型号树脂的比上柱量及比吸附量均较大，但是860021用30％乙醇洗脱时的比洗脱量小，即样品损失严重。HP-20和HPD 600型树脂的比上柱量较大且比洗脱量都比较大，吸附洗脱性能很好。因此相对于提取物比较粘稠的红花提取物，优选采用HP-20和HPD 600型树脂进行分离精制，更优选HPD 600型树脂。 通过试验确定上柱条件为 径高比1∶6-1∶10，优选1∶8 吸附温度室温(＜35℃) 药液浓度相当于80-130g生药/升，优选110g/L。 上述提取精制后的提取液经检测可以经过干燥即可得到本专利技术方法所制得的固态提取物，干燥方式可以是任何常规干燥法，优选喷雾干燥。 本专利技术的制备方法与现有技术公开的制备方法相比，由于分离精制步骤采用的具体方案不同，得到的提取物其中含有的有效成分表现出明显的差异，如专利01131268.8和03157479.3中制备得到的提取物中采用了多次柱层析精制，羟基红花黄素A的含量都大于70，其他黄色素类化合物均被作为杂质除去，而本专利技术的研究结果表明，羟基红花黄素A的含量过高，疗效和活性反而不及总红花黄色素这个指标的含量高更好，因此按本专利技术方法制备的提取物具有更好的临床应用价值。 本专利技术的创新之处在于通过应用特定的大孔吸附树脂和陶瓷膜分离技术，提高了红花提取物中总红花黄色素的含量，同时使得含有该提取物的制剂(尤其是注射剂型)稳定性大大提高，有效地去除了植物提取物中的聚合大分子和热原，可以直接制备成注射剂，而且制剂安全性得到了有效的保证。 本专利技术还提供了一种红花提取物，其是以上述制备方法制得，经检测本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种含有总红花黄色素的红花提取物的制备方法，其中包括：（１）红花用至少２倍水温浸提取得提取液Ⅰ；（２）提取液浓缩得浓缩液，然后将浓缩液上大孔吸附树脂分离，依次以水和２０％－５０％的醇洗脱，收集醇洗脱部分，回收洗脱液至醇含量２０％以下，得到洗脱液Ⅱ；（３）通过陶瓷膜超滤，得到超滤液Ⅲ；（４）超滤液Ⅲ经回收至相对密度为１．０５－１．２０，即可。

【技术特征摘要】
1、一种含有总红花黄色素的红花提取物的制备方法，其中包括(1)红花用至少2倍水温浸提取得提取液I；(2)提取液浓缩得浓缩液，然后将浓缩液上大孔吸附树脂分离，依次以水和20％-50％的醇洗脱，收集醇洗脱部分，回收洗脱液至醇含量20％以下，得到洗脱液II；(3)通过陶瓷膜超滤，得到超滤液III；(4)超滤液III经回收至相对密度为1.05-1.20，即可。2、权利要求1所述的制备方法，其中温浸提取温度为40-90℃。3、权利要求1所述的制备方法，其中步骤(2)中大孔吸附树脂为HPD600型或HP-20型，其径高比为1∶6-1∶10，所述的分离包括先用1-2个柱床体积水洗，弃去水液，再用浓度20％-50％的醇洗脱3-5个柱床体积，收集醇洗脱部分的洗脱液回收至醇浓度20％以下。4、权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：张树祥，刘文辉，
申请(专利权)人：北京星昊医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]