本发明专利技术涉及一种红花药材中活性成分的提取、分离及其检测方法，所述的方法包括：⑴提取过程：取红花药材，用乙醇提取，醇提液进行浓缩干燥，加入酸水水解，水解液回收溶剂并浓缩，再用乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩、干燥成浸膏，留用；⑵分离、纯化过程：取步骤⑴中留用的浸膏，用硅胶柱分离，再用葡聚糖凝胶LH-20柱纯化，即得。本发明专利技术所述的提取、分离和检测方法具有简单可行、科学等特点。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及，所述的方法包括：⑴提取过程：取红花药材，用乙醇提取，醇提液进行浓缩干燥，加入酸水水解，水解液回收溶剂并浓缩，再用乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩、干燥成浸膏，留用；⑵分离、纯化过程：取步骤⑴中留用的浸膏，用硅胶柱分离，再用葡聚糖凝胶LH-20柱纯化，即得。本专利技术所述的提取、分离和检测方法具有简单可行、科学等特点。【专利说明】
本专利技术涉及。
技术介绍
红花为菊科植物红花Cartkamus tinctorius L.的干燥花,夏季花由黄变红时进行采摘，阴干或晒干。性温，味辛，具有活血通经、散瘀止痛的功能，主要用于经闭、痛经、恶露不行、癥瘕痞块、跌打损伤、疮疡肿痛等症。国内外学者们对红花的化学成分及药理作用进行了较为深入的研究，具体内容如下:A:化成成分研究:(I).查耳酮类:主要为红花黄色素(safflor yellow, SY),它是含有多种成分的水溶性混合物。Takahash iY等于1982年分离得到红花黄色素A (SY-A) ; 1984年进一步分离得到红花黄色素B(SY-B) ；Danisova等分离得到SY_C.Meselhy等1993年首次分离得到羟基红花黄色素A(hydroxysa fflor yellow A, HSYA) οΥ?η HB等首次得到红花苷Cartormin,红花苷(Carthamin)是红花中的一种色素，由于红花苷具某些独特的化学性质和光学特征，多年来其结构一改再改，比较混乱。(2).黄酮类:主要含有6-羟基山萘酚、山萘酚-3-葡萄糖苷、6-羟基山奈酚-3-0-葡萄糖苷、6-羟基山奈酚-7-0-葡萄糖苷、山奈酚、槲皮素、6-羟基-山奈酚、黄芩苷、槲皮素苷、 山奈酚-3-芸香糖苷和芦丁、槲皮素-3-葡萄糖苷、槲皮素-6-葡萄糖苷、杨梅素及芹黄素，木樨草素，木樨草素-7-0-β-D-葡萄糖苷、丁香脂素等。(3).脂肪酸类:有棕榈酸、二棕榈酸、肉豆蘧酸、香豆酸、月桂酸、油酸、亚油酸。⑷.甾体类:红花甲醇提取物中分离出了 3种饱和甾醇，9种5-甾醇，I种9 β、19-环甾醇和7种7-甾醇，15 α，20 β - 二羟基-4-孕烯-3酮等，研究还发现含有β -谷甾醇、豆甾醇。(5).多糖类:该成分是由葡萄糖、木糖、阿拉伯糖和中乳糖以键连接的一种多糖体。(6).聚炔类:主要为3(顺)，11(反)_和3(反)_十三碳_1，3，11-三烯_5，7，9_三块、二十九烧、β _谷留醇-3-0-匍萄糖苷、十六烧酸甘油酯、反-3-十二烯-5，7, 9, 11-四炔-1，2-双醇和反-反-3，11-十三烯-5，7，9-三炔-1，2-双醇等。(7).微量元素:红花花中含钾、钠、氯等大量元素，还富含铬、猛、锌、钥等微量元素。(8).其它:红花中含 benzy 1_0_β-D-glucopyra_noside、5-轻甲基糠醒、胡萝卜苷等。B.药理活性:⑴对心功能及血管的影响:小剂量红花煎剂对蟾蜍心脏有轻微兴奋作用，使心跳有力、振幅加大，对心肌缺血有益；大剂量对蟾蜍反而有抑制作用，而扩张体冠动脉及股动脉。研究表明红花黄色素可减少大鼠低灌流离体心脏乳酸脱氢酶(LDH)漏出，缓解心室肌组织ATP含量下降及其超微结构的损伤；又可缓解大鼠心肌线粒体混悬液中线粒体的肿胀及膜流动性下降，即缓解大鼠心肌缺氧性损伤，改善心肌能量代谢，腹腔注射红花黄色素可明显降低大鼠心率，且显著改善异丙基肾上腺素(ISOP)所致的心电图缺血性改变；同时可缓解大鼠低灌流离体心脏的心率及冠状动脉流量的下降。红花黄色素对大鼠缺血再灌注损伤心肌的影响实验表明，红花黄色素能影响心肌蛋白的表达，对心肌缺血再灌注有一定保护作用。红花黄素在缺氧复氧条件下对大鼠肺动脉内皮细胞P-选择素(Ps)及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)基因表达的影响实验表明，单纯缺氧状态下大鼠肺动脉血管内皮细胞Ps、ICAM-1表达无明显变化，缺氧复氧条件下Ps、ICAM-1表达上调，红花黄素可抑制缺氧负氧条件下Ps、ICAM-1的过度表达。⑵降血压、降血脂作用:研究表明红花黄色素对自发性高血压大鼠有明显降压作用，大鼠灌服红花黄色素后血浆肾素活性和血管紧张素II均有明显下降，并能够显著降低冠心病心绞痛患者的胆固醇和甘油三酯。⑶抗凝血、抑制血栓形成的作用:研究表明红花黄色素A通过抑制PAF所致血小板黏附、释放及血小板内游离Ca2+浓度升高而使血小板活化受到抑制，缓解了血栓形成、炎症反应等病理变化，减轻了血液循环障碍。羟基红花黄色素A抗凝作用的研究表明HSYA可抑制ADP诱发的家兔血小板聚集，延长PT及RT，提示该成分为红花抗血栓有效成分，可阻断多种途径诱发的血栓形成反应。⑷对神经系统的作用:红花黄色素A对大鼠缺血脑细胞线粒体的损伤有明显的保护作用，表现为抑制缺血脑线粒体膜流动性的降低、膜磷脂降解、线粒体肿胀、NADH脱氢酶、琥珀酸脱氢酶和细胞色素c氧化酶活性的降低，改善线粒体呼吸功能；同时羟基红花黄色素A能明显降低脑缺血大鼠脑线粒体丙二醛(MDA)含量、升高超氧化物歧化酶(SOD)活性、抑制Ca2+过多摄入。(5)抗自由基、抗氧化、抗衰老作用:红花黄色素可清除羟自由基、抑制脂质过氧化、保护细胞膜，其主要成分羟基红花黄色素A为一查耳酮类成分，其分子中含有多个酚羟基。红花水提液有抗氧化作用，可清除羟自由基及抑制脂质过氧化反应，可显著延长中老龄鼠游泳时间及常压缺氧和寒冷条件下存活时间，增强小鼠在各种不利环境中的生存能力并显著抑制中老龄大鼠体内过氧化质生成，具有抗衰老作用。(6)抗炎、免疫抑制作用、兴奋子宫作用、抗肿瘤等作用。目前，本权利人独家生产的丹红注射液是由丹参、红花2味药材制成的中药注射剂，具有活血化瘀，通脉舒络之功效，用于瘀血闭阻所致的胸痹及中风，证见:胸痛，胸闷，心悸，口眼歪斜，言语蹇涩，肢体麻木，活动不利等症；冠心病、心绞痛、心肌梗塞，瘀血型肺心病、缺血性脑病、脑血栓；为深受上述疾病折磨的广大患者带来了非常显著的治疗效果。其中红花药材是该成方制剂的主要组成药味，本 申请人:对购得的红花原料药，通过对不同批次、不同产地的红花药材进行分析，发现均有一个未知成分对红花药材中的指标成分山柰素的含量检测存在干扰，为了解决这一技术问题，从而保证红花药材的质量控制，其最终保证丹红注射液的疗效和用药安全。据此，我们对红花药材中该未知部位进行分离、纯化及结构解析和药效评价等方面的研究。
技术实现思路
本专利技术的目的之一在于提供一种红花药材中活性成分的提取、分离方法；本专利技术的目的之二在于解析所提取的活性物质的化学结构；本专利技术的目的之三在于提供红花药材中该活性物质的检测方法。本专利技术所述的红花中活性成分的提取、分离方法，它是由如下步骤操作:⑴提取过程:取红花药材，用乙醇提取，醇提液进行浓缩干燥，加入酸水水解，水解液回收溶剂并浓缩，再用乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩、干燥成浸膏，留用；⑵分离、纯化过程:取步骤⑴中留用的浸膏，用硅胶柱分离，再用葡聚糖凝胶LH-20柱纯化，即得。进一步来说，所述方法的技术方案操作如下:⑴提取过程:取红花药材，用与红花药材重量比为6-10倍量、浓度为95%的乙醇提取2-3次，每次l_2h，合并，醇提液浓缩干燥成浸膏，用60°C、浓度为95%乙本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种提取、分离红花药材中活性成分的方法，其特征在于，所述的方法按如下步骤操作：⑴提取过程：取红花药材，用乙醇提取，醇提液进行浓缩干燥，加入酸水水解，水解液回收溶剂并浓缩后，再用乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩、干燥成浸膏，留用；⑵分离、纯化过程：取步骤⑴中留用的浸膏，用硅胶柱分离，再用葡聚糖凝胶LH‑20柱纯化，即得。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：刘峰，马久太，孙宝平，卢新义，孙宇宏，席鹏洲，潘留华，
申请(专利权)人：陕西步长制药有限公司，
类型：发明
国别省市：陕西;61
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