一种稳定的巴曲酶药物组合物制造技术

一种含巴曲酶的组合物，其特征在于，它包括活性浓度从１ＫＵ／ｍｌ到２０００ＫＵ／ｍｌ的巴曲酶，并且含有水解明胶作为稳定剂。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药领域，更具体地涉及稳定的巴曲酶水溶液。技术背景巴曲酶(Batroxobin)是一种从巴西矛头蛇(SoWi^os 毒液中分 离纯化出来的蛋白分子，可以作为一种止血药的主要成分，大剂量使用时还具 有降纤作用。上世纪六七十年代，瑞士素高(Solco Basle Ltd.)公司将含有 该成分的提取物制成药物，并上市销售，商品名为Reptilase ,该药物在中国 也已经用于临床实践十多年了 (商品名立止血@)。中国专利申请(申请号031160549)公开了一种基因重组方法，在甲醇 酵母(Pichia pastoris)中分泌表达重组巴曲酶(Recombinant Bat皿obin) 蛋白。目前生物提取的含该成分的药物都采用冻干粉针剂型，临床使用时再用少 量注射用水溶解。但是，冻干粉针剂的生产成本高，而且临床使用不便。生物 提取巴曲酶，或通过基因重组方法获得的重组巴曲酶，若制成水针剂，又都极 其不稳定。人血白蛋白是目前国内外制剂中的常用成分，但是使用人血白蛋白作为保 护剂时，增加了引入外源性病毒的潜在危险，并且增加生产成本。因此，本领域迫切需要提供一种巴曲酶组合物，所述的组合物水溶液状态 下也很稳定。
技术实现思路
本专利技术旨在提供稳定的巴曲酶组合物。本专利技术的另一个目的是提供上述稳定的巴曲酶组合物的制备方法。 本专利技术的再一个目的是提供上述稳定的巴曲酶组合物的用途。在本专利技术的第一方面，提供了一种含巴曲酶的组合物，它包括活性浓度从lKU/ml到2000KU/ml的巴曲酶，并且含有水解明胶作为稳定剂。更佳地，所述的组合物具有以下稳定性所述的组合物被配制(如稀释)成或复溶成lKU/ml巴曲酶水溶液后，在37'C下放置20天，含量保持不变。 在另一优选例中，所述组合物中巴曲酶的活性浓度为l一400KU/ml。 在另一优选例中，所述的组合物为液体形式。在另一优选例中，所述的组合物为注射剂，并且具有以下稳定性配制(如稀 释)成lKU/ml巴曲酶水溶液后，在37'C下放置20天，100ul所述的水溶液可以使 100ul经抗凝处理的人标准血浆能在60土20秒内凝固。在另一优选例中，所述的抗凝处理是加入抗凝剂，如肝素、水蛭素等。在另一优选例中，所述的组合物为固体形式。在另一优选例中，所述的组合物为冻干粉剂、喷雾干燥粉剂，并且具有以下 稳定性当所述冻干粉剂、喷雾干燥粉剂复溶形成巴曲酶lKU/ml水溶液后，在37 。C下放置20天，100ul所述的水溶液可以使100ul经抗凝处理的人标准血浆能在 60土20秒内凝固。在另一优选例中，所述组合物中水解明胶的含量为O. l — 5重量份，而所述组 合物的干重为100重量份。更佳地，水解明胶的含量为0.5 — 3重量份。在另一优选例中，所述组合物还含有选自下组的辅助性稳定剂L一谷胱 甘肽、甘氨酸、和/或海藻糖，所述的辅助性稳定剂的含量为1X10—4 — 2重量 份L一谷胱甘肽、0.02 — 0. l重量份甘氨酸、禾卩/或0.02 — 0. l重量份海藻糖。在另一优选例中，所述的辅助性稳定剂的含量为1X10—3—0. 1重量份L一 谷胱甘肽、0.03 — 0.07重量份甘氨酸、和/或0.03 — 0.07重量份海藻糖。在另一优选例中，所述的组合物被配制(如稀释)成或复溶成水溶液后，PH为 6.0±1.5。在另一优选例中，所述的组合物还含有缓冲剂，等渗等张调节剂，和抑 菌剂。在另一优选例中，所述的组合物中包括 1—8重量份磷酸钠盐， 7 — 9X10—3重量份氯化钠，0. l — 5重量份水解明胶，和 l一5重量份三氯叔丁醇。在另一优选例中，所述的组合物包括2 — 5重量份磷酸钠盐，7. 5 —8. 8X 10—3重量份氯化钠，IX 10—3 — 0. 1重量份L一谷胱甘肽，0.5 — 3重量份水解明胶，和2 — 4重量份三氯叔丁醇。在另一优选例中，所述的组合物包括l一8重量份磷酸钠盐，7. 5 — 8. 8X 10—3重量份氯化钠，1 X 10—4 — 2重量份L一谷胱甘肽 0.1 — 5重量份水解明胶， l一.5重量份三氯叔丁醇，和 0.02 — 0. 1重量份甘氨酸，和/或 0.02 — 0. 1重量份海藻糖。 在另一优选例中，所述的组合物包括2 — 5重量份磷酸钠盐，0. 75 — 0. 88重量份氯化钠， 1X1(T3 — 0. 1重量份L一谷胱甘肽 0.5 — 3重量份水解明胶， 2 — 4重量份三氯叔丁醇，和 0.03 — 0. 07重量份甘氨酸，和/或 0.03 — 0. 07重量份海藻糖。在本专利技术的第二方面，提供了上述组合物的制备方法，它包括步骤将巴曲 酶和作为稳定剂水解明胶混合，从而上述的组合物。在本专利技术的第三方面，提供了一种上述组合物的用途，所述的组合物用于 制备止血的药物。据此，本专利技术提供了一种巴曲酶组合物，所述的组合物水溶液状态下也很 稳定。具体实施方式专利技术人经过广泛而深入的研究，意外地发现巴曲酶与一定量的水解明胶混合 成的组合物，在液体状态下能保持巴曲酶的生物学活性。专利技术人还发现在所述 的溶液中加入一些对重组巴曲酶生物学活性起保护作用、且不与重组巴曲酶药 理作用产生拮抗的缓冲盐、抗氧化剂、等渗等张调节剂和抑菌剂等，巴曲酶的稳 定性能更佳。由此制得的组合物可以作为肌肉、静脉注射以及外用喷雾用物质。如本文所用，巴曲酶可是本领域熟知的提取物或基因重组蛋白，优选基因重 组巴曲酶。如本文所用，1KU是取0. lml的人标准血浆于标准血凝仪(C2000-4血凝仪， 北京普利生仪器有限公司)检测杯中，37。C预温3分钟，加入经适量稀释的待 测定的巴曲酶溶液O. lml，计时，如果血浆在60士20秒凝固，则每lml该待测 溶液中就含一个克氏单位(KU)的巴曲酶。如本文所用，重量份或重量份数可互换使用，所述的重量份可以 是任何一个固定的以毫克、克数或千克数表示重量(如lmg、 lg、 2g、 5g、或 1kg等)。例如， 一个由l重量份组分a和9重量份组分b构成的组合物，可以 是1克组分a+9克组分b，也可以是10克组分a + 90克组分b等构成的组合 物。在所述组合物，某一组分的百分比含量=(该组分的重量份数/所有组分的 重量份数之和)X 100%。因此，由1重量份组分a和9重量份组分b构成的组合 物中，组分3的含量为10%，组分b为90。/。。如本文所用，本专利技术的组合物被配制成lKU/ml巴曲酶水溶液，是指①若 本专利技术的组合物为lKU/ml巴曲酶水溶液，直接使用；②若本专利技术的组合物为 〉lKU/ml巴曲酶水溶液，则用水对其进行稀释，使成为lKU/ml巴曲酶水溶液； ③若本专利技术的组合物为固态形式(如冻干粉剂或喷雾干燥粉剂)，则用水复溶， 使其成为lKU/ml巴曲酶水溶液。如本文所用，辅助性稳定剂是指除水解明胶以外的其它稳定剂，它可以是本领域常用的稳定保护剂，例如但不限于，甘氨酸、海藻糖、乳糖、蔗糖、和/或 麦芽糖。也可以是本领域常用的抗氧化抗聚集剂，例如但不限于谷胱甘肽(GSH)、维生素C、乙二氨四乙酸二钠盐(EDTA-Na2)、聚山梨醇酯(如，Tween-20、 Tween-80)等。本专利技术的组合物中的辅助性稳定剂优选L一谷胱甘肽、、甘氨酸、禾B/或海 藻糖。其本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种含巴曲酶的组合物，其特征在于，它包括活性浓度从１ＫＵ／ｍｌ到２０００ＫＵ／ｍｌ的巴曲酶，并且含有水解明胶作为稳定剂。

【技术特征摘要】
1. 一种含巴曲酶的组合物，其特征在于，它包括活性浓度从1KU/ml到2000KU/ml的巴曲酶，并且含有水解明胶作为稳定剂。2. 如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述的组合物为液体形式。3. 如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述的组合物为注射剂，并且 具有以下稳定性配制成lKU/ml巴曲酶水溶液后，在37'C下放置20天，100ul 所述的水溶液可以使100ul经抗凝处理的人标准血浆能在60±20秒内凝固。4. 如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述的组合物为固体形式。5. 如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述的组合物为冻干粉剂、喷 雾干燥粉剂，并且具有以下稳定性当所述冻干粉剂、喷雾干燥粉剂复溶形成巴曲 酶lKU/ral水溶液后，在37。C下放置20天，100ul所述的水溶液可以使100ul经抗 凝处理的人标准血浆能在...

【专利技术属性】
技术研发人员：张文，潘学工，陈佩新，曹之舫，黄秀东，
申请(专利权)人：上海万兴生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：31