用于治疗和诊断自身免疫性脑炎或癫痫的方法和组合物技术

本发明专利技术提供了诊断或确定对象中的自身免疫性脑炎或癫痫的原因和诊断对象中的肿瘤的方法，包括测试对象的体液中的ＮＭＤＡ受体的ＮＲ亚基的抗体的步骤。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术提供了诊断或确定对象中的自身免疫性脑炎或癫痫的原因和诊断对象中的肿瘤的方法，包括测试对象的体液中的NMDA受体的NR亚基的抗体的步骤。
技术介绍
记忆、行为、认知和癫痫发作( seizures)的干扰可得自免疫介导的脑炎。自身免疫性脑炎的一种原因是赘生物的副肿瘤性(paraneoplastic)体现。至今大多数副肿瘤性脑炎与胞内癌神经元蛋白的抗体和假定抗相同蛋白的胞毒性T细胞相关。这些病症通常与恶性肿瘤相关并且对癌症的免疫疗法或治疗反应不良。近年来， 一种主要影响年轻女性的病因学未知的严重但经常可逆的脑炎越来越被认识。这种病症有几个名字，包括急性弥漫性淋巴细胞性脑膜脑炎，急性可逆性边缘叶脑炎，急性年轻女性非疱疹性脑炎或幼年型急性非疱疹性脑炎。尚未与感染、癌症或特异性自身抗体相关，但是鉴于大多数患者产生前驱性(prodromic)病毒样疾病，已经假定了感染后免疫介导的病因学。受影响的患者是有显著精神病症状、癫痫发作、记忆缺失和意识水平降低经常需要通气支持的女性。三种主要特征包括患者年轻，与卵巢畸胎瘤相关及检测到针对未知抗原的抗体，所述未知抗原主要在海马神经元的细胞膜中表达(也称作神经毡抗原亚组)。对副肿瘤性神经元(或癌神经元)抗原的功能的更好理解与在动物中建模PND产生了改良的治疗策略。但是，对于目前遇到这些患者的临床医生而言，影响神经学结果的最佳机会取决于(l)疾病的快速诊断，(2)肿瘤的早期发现和治疗，及(3)免疫疗法的使用。因此，存在对诊断自身免疫性脑炎的存在及观察到的癫痫发作是由(有时是隐性)肿瘤导致的可能性的可靠方法的需求。本专利技术提供了诊断或确定对象中自身免疫性脑炎或癫痫的原因和诊断对象中肿瘤的方法，包括测试对象的体液中NMDA受体的NR亚基的抗体的步骤。在一个实施方案中，本专利技术提供了确定对象中脑炎的原因的方法，包括测试对象的体液中NMDA受体(NMDAR)的NR亚基的抗体的步骤，由此确定对象中脑炎的原因。在另一个实施方案中，体液中NR亚基的抗体的存在表明所述脑炎是自身免疫病因学。每种可能性代表本专利技术单独的实施方案。在另一个实施方案中，本专利技术提供了确定对象中的自身免疫性脑炎的原因的方法，包括测试对象的体液中NMDA受体的NR亚基的抗体的步骤，由此确定对象中自身免疫性脑炎的原因。在另一个实施方案中，所述抗体的存在表明对象中存在肿瘤。在另一个实施方案中，所述肿瘤是自身免疫性脑炎的原因。每种可能性代表本专利技术单独的实施方案。在另一个实施方案中，本专利技术提供了确定对象中癫痫的原因的方法，包括测试对象的体液中NMDA受体的NR亚基的抗体的抗体的步骤，由此确定对象中癫痫的原因。在另一个实施方案中，所述抗体表明对象中存在肿瘤。在另一个实施方案中，所述肿瘤是癫痫的原因。每种可能性代表本专利技术单独的实施方案。在另一个实施方案中，本专利技术提供了诊断患有脑炎的对象中的肿瘤的方法，包括测试对象的体液中NMDA受体的NR亚基的抗体的步骤，由此诊断患有脑炎的对象中的肿瘤。在另一个实施方案中，抗体的存在表明对象中存在肿瘤。每种可能性代表本专利技术单独的实施方案。在另一个实施方案中，本专利技术提供了诊断患有癫痫的对象中的肿瘤的方法，包括测试对象的体液中NMDA受体的NR亚基的抗体的抗体的步骤，由此诊断患有癫痫的对象中的肿瘤。在另一个实施方案中，所述抗体的存在表明对象中存在肿瘤。每种可能性代表本专利技术单独的实施方案。附图说明图1:病因学不清楚的LE中的海马神经毡抗体。大鼠脑的矢状切片与几个LE患者的血清反应。上排3病例显示与海马神经毡的强反应性。病例#2和6竞争相同表位(未示出)；病例#2具有抗齿状回内部中神经元的亚集的额外抗体(在中排示出)。高倍的中间和下排示出病例#1, 2, 5,7和对照anti-Hu的反应性。比较病例#7和anti-Hu的胞内反应性与神经元的细胞核和细胞质未反应的病例#1， 2和5的显著神经毡反应性(除了#2标记细胞亚集)。仅病例#1具有VGKC抗体。箭头指出齿状回以进行组之间比较。(上排x5;中排和下排x200)。图2.用LE患者的新抗体免疫标记神经元。大鼠海马神经元的培养物(A)与患者CSF保温，(B)用突触泡蛋白共标记或(C)用亲棘蛋白共标记。患者抗体(在所有组中原始是红色)显示与细胞膜的强反应性，与亲棘蛋白的有限共定位(在C中原始是黄色)和与突触泡蛋白较少的共定位(B) (x800油)。图3.患者抗体与海马和前脑的反应性，及与N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)的NR2B亚基的共定位。(A)用患者脑脊液免疫标记的大鼠脑的矢状切片。注意与海马的强反应性及与前脑的稍轻的反应性。小脑大部分没有反应性。(B)更高放大倍数的海马分子层(A中箭头)；这一反应性模式与先前在具有副肿瘤性脑炎和卵巢畸胎瘤的患者中报道的相同。4(C-E)大鼠海马神经元培养物用患者抗体(C，绿色)和抗NMDAR的NR2B的抗体(E，红色)双免疫标记；注意反应性的显著共定位(D，黄色)。这些发现提示患者抗体抗NMDAR。随后的研究证实患者还具有抗NR2A的抗体(未示出)，其部分解释了反应性的部分共定位。原始放大倍数X2.5 (A)和X400 (B)，两者均用苏木精复染；X800 (油镜)，免疫荧光(C-E)。图4.来自LE患者的卵巢畸胎瘤。(A)肉眼观察显示存在脂肪和毛发(箭头)。(B)显微镜区域显示正常表观的神经组织(箭头指出神经元)。x200 H&图5:在三名患者中的脑磁共振成像(MRI)发现。(A， B)在症状呈现时(A)及在部分临床改善及用免疫治疗脑脊液正常化后(B)患者1的MRI;注意临床和MRI改善在肿瘤切除之前开始发生。(C, D)在症状呈现时(C)及4个月后(D)患者2的MRI;这一患者产生快速进行性神经学恶化，对免疫治疗不响应。尸检证实卵巢囊肿是卵巢的成熟畸胎瘤。(E,F)在症状呈现时患者3的MRI;注意在中颞叶和右额皮质中的轻度液体衰减反转恢复高强度。在免疫治疗和肿瘤切除后，MRI正常(未示出)。图6:在脑炎期间肿瘤大小的间隔增加(Interval increase)。 (A)患者1的计算层析X射线照相术显示5cm的囊性卵巢损害(箭头)，在2个月后大小加倍(B)。这一损害最初未切除是因为患者的临床状况不佳及卵巢肿块的良性表观。在用免疫治疗获得部分临床改善后，去除肿块(未成熟畸胎瘤)。图7:患者抗体与N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)的NR2B和NR2A亚基的异聚体反应。表达异聚体(NR1/NR2B或NR1/NR2A)的或用NMDAR的单亚基NR1或NR2B转染的HEK293细胞与患者血清或脑脊液(CSF)保温。(上排)组证实患者7的CSF与表达NR1/NR2B和NR1/NR2A的异聚体(功能性受体)的细胞反应，但不与用单亚基(NR1;NR2B)转染的细胞反应。用单NR2A或无插入序列的质粒转染的细胞不与患者抗体反应(未示出)。(下排)组证实患者1和3的CSF与NR1/NR2B的反应性。在第3组(#7 + NR2B)中，细胞与患者7的CSF及特异于NR2B的抗体共保温，显示反应性的共定位。第4组(C (-))相应于无副肿瘤性脑炎的个体的CSF (阴性对照)。原始放大倍数X800，免疫荧光；细本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种诊断对象中的脑炎的方法，包括如下步骤：从对象获得生物学样品；测试所述生物学样品中ＮＭＤＡ受体的ＮＲ异聚体的抗体，其中所述抗体在所述生物学样品中的存在表明自身免疫性脑炎，由此确定对象中脑炎的原因。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：J达尔莫，M罗森菲尔德，DR林奇，
申请(专利权)人：宾夕法尼亚大学理事会，费城儿童医院，
类型：发明
国别省市：US[美国]