免疫原性多肽和单克隆抗体制造技术

在此提供的是用于引发针对肺炎链球菌的免疫反应的组合物和方法。更特别地，所述组合物和方法涉及免疫原性多肽，包括ＰｈｔＤ的片段和其变体，以及编码或表达所述多肽的核酸、载体和转染的细胞。还描述了产生和利用所述免疫原性多肽的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及免疫学，更特别地涉及引发对细菌的免疫反应。背景肺炎链球菌(Str印tococcus pneumoniae)是相当普遍的人类病原体，其可以感 染一些器官，包括肺、中枢神经系统(CNS)、中耳和鼻道。感染引起各种症状，例如支气管 炎、肺炎、脑膜炎、鼻窦感染和败血症。肺炎链球菌是人类中细菌性脑膜炎的主要原因，尽 管有抗生素治疗，与显著的死亡率和发病率相关(Quagliarello et al. , (1992)N. Eng. J. Med. 327 :869_872)。存在着两种现用的肺炎球菌疫苗。一种是用于成年人由23种不同的荚膜多糖 组成的疫苗，所述荚膜多糖在一起代表了引起肺炎球菌感染的约90%的菌株的荚膜类 型。然而，这种疫苗在儿童中不是免疫原性的，儿童是对肺炎球菌感染有高度敏感性的年 龄组。在成年人中，疫苗已经显示了对菌血症性肺炎是约60%有效的，但是它在由于年龄 或潜在医学状况处于肺炎球菌感染的更高风险中的成年人中是不那么有效的(Fedson， and Musher. 2004. "Pneumococcal PolysaccharideVaccine，，，pp. 529-588. In Vaccines. S. A. Plotkin and W. A. Orenstein (eds. ), W. B. Saunders and Co. , Philadelphia, PA ； Shapiro et al.，N. Engl. J. Med. 325 :1453-1460 (1991))。这种疫苗没有显示对感染的最普 通的形式、非菌血症性肺炎球菌肺炎的有效性。第二种现有的疫苗是7-价的缀合物疫苗，其在低于2岁的儿童中对菌血症性肺 炎球菌感染是有效的。它还展现了对肺炎的效力(Blacket al. , Arch. Pediatr. 11(7) 485-489(2004))。由于需要产生7种不同的缀合物，这种疫苗的生产是复杂的，这导致了该 疫苗是昂贵的(约$200/儿童)。而且，在非疫苗型肺炎链球菌非常常见的发展中世界，该疫 苗对于覆盖感染做得不好(Di Fabio et al.，Pediatr. Infect. Dis. J. 20 :959_967 (2001)； Mulholland, Trop. Med. Int. Health 10:497-500(2005))。该疫苗对抗中耳炎和定殖不象 它对抗侵入性疾病那样好。还显示了，7-价的缀合物疫苗的使用导致具有不被疫苗中包括 的7种多糖所代表的荚膜类型的菌株的定殖和疾病方面的提高(Bogaert etal.，Lancet Infect. Dis. 4 144-154 (2004) ；Eskola et al. , N. Engl. J. Med. 344 403-409 (2001)； Mbelle et al.，J. Infect. Dis. 180 1171-1176 (1999))。因而，仍然需要对肺炎链球菌的有 效的治疗。概述描述了引发针对肺炎链球菌的免疫反应的组合物和方法。提供了免疫原性PhtD 多肽、特别是其片段、衍生物和变体，以及编码它们的核酸。还提供了具有对这样的多肽、片 段、衍生物或变体具有特异性的单克隆抗体(和产生它们的杂交瘤)。进一步提供的是制造和使用所述免疫原性多肽、衍生物、变体和单克隆抗体的方法。 本专利技术提供了选自以下构成的组的分离的核酸a)编码具有与SEQ ID N0:2至少 90%同一性的肺炎链球菌多肽的核酸；b)与编码具有与SEQ ID NO :2至少90%同一性的肺 炎链球菌多肽的核酸完全互补的核酸；和c) (a)或(b)的RNA，其中U替代了 T。根据本专利技术的优选的实施方式，所述序列同一性是至少85%、90%，更优选的95 到 100%。本专利技术还提供了包含具有与SEQ ID吣2至少80%、85%、90%、95%或100%同 一性的氨基酸序列的分离的多肽，以及特异性结合具有与SEQ ID而2至少80%、85%、 90%、95%或100%同一性的多肽的单克隆抗体。根据本专利技术的另一个方面，提供了选自以下构成的组的分离的核酸a)编码具有 与SEQ ID NO :3至少80%同一性的肺炎链球菌多肽的核酸；b)与编码具有与SEQ ID NO: 3至少80%同一性的肺炎链球菌多肽的核酸完全互补的核酸；和c) (a)或(b)的RNA，其中 U替代了 T。根据本专利技术的优选的实施方式，所述序列同一性是至少85%、90%，更优选的 95% 到 100%。本专利技术还提供了包含具有与SEQ ID N0:3至少80%、85%、90%、95%或100%同 一性的氨基酸序列的分离的多肽，以及特异性结合具有与SEQ ID N0:3的至少80%、85%、 90%、95%或100%同一性的多肽的单克隆抗体。根据本专利技术的另一个方面，提供了选自以下构成的组的分离的核酸a)编码具有 与SEQ ID NO :4至少80%同一性的肺炎链球菌多肽的核酸；b)与编码具有与SEQ ID NO: 4至少80%同一性的肺炎链球菌多肽的核酸完全互补的核酸；和c) (a)或(b)的RNA，其中 U替代了 T。根据本专利技术的优选的实施方式，所述序列同一性是至少85%、90%，更优选的 95% 到 100%。本专利技术还提供了包含具有与SEQ ID吣4至少80%、85%、90%、95%或100%同 一性的氨基酸序列的分离的多肽，以及特异性结合具有与SEQ ID N0:4的至少80%、85%、 90%、95%或100%同一性的多肽的单克隆抗体。根据本专利技术的进一步的方面，提供的是特异性结合具有SEQ IDNO 4中所列氨基 酸序列的肽的抗原决定簇的单克隆抗体。根据本专利技术的优选的实施方式，所述单克隆抗体特异性结合的抗原决定簇位于具 有SEQ ID NO 4所列氨基酸序列的肽中跨越氨基酸1和氨基酸101的区域中。本专利技术还提供了选自由SEQ ID NO :2、SEQ ID NO 3和SEQID NO 4或其变体构成 的组的免疫原性片段，所述变体选自由SEQID NO 15,SEQ ID N0:16和SEQ ID N0:17构成 的组。根据本专利技术的另一个方面，还提供的是免疫宿主对抗链球菌属细菌感染的方法和 治疗链球菌属细菌的感染的方法，包括向所述宿主施用选自由SEQ ID N0:2、SEQ ID NO 3 和SEQ ID NO :4或其变体构成的组的至少一种PhtD多肽，所述变体选自由SEQ ID NO: 15、 SEQ ID N0:16 和 SEQ ID N0:17 构成的组。根据本专利技术的进一步的方面，提供的是单克隆抗体，其具有与ATCC编号XXXX的杂交瘤所产生的抗体相同的抗原结合特异性。 在本专利技术的优选的实施方式中，所述单克隆抗体选自由ATCC编号XXXX的小鼠杂 交瘤产生的1B12、ATCC编号XXXX的小鼠杂交瘤产生的4D5、和ATCC编号XXXX的小鼠杂交 瘤产生的9E11构成的组。本专利技术还提供了在宿主中预防链球菌属细菌感染的方法和治疗链球菌属细菌感 染的方法，包括向所述宿主施用选自由ATCC编号XXXX的小鼠杂交瘤产生的1B12、ATCC编 号X本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的核酸，编码与ＳＥＱＩＤＮＯ：２具有至少９０％同一性的肺炎链球菌多肽。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：M奥赫斯，R布鲁克斯，R夏尔博瓦，J耶雄，
申请(专利权)人：圣诺菲帕斯图尔有限公司，
类型：发明
国别省市：CA[加拿大]