中和肉毒杆菌神经毒素的治疗性单克隆抗体制造技术

本发明专利技术提供了抗体，其特异性地结合和中和肉毒杆菌神经毒素Ａ型（ＢｏＮＴ／Ａ）和被那些抗体结合的表位。所述抗体和其衍生物和／或特异性地结合本文提供的中和表位的其它抗体，可以用于中和肉毒杆菌神经毒素，且因此也可以用于治疗肉毒中毒。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】中和肉毒杆菌神经毒素的治疗性单克隆抗体 与相关申请的交叉参考本申请要求享有2005年1月27日提交的USSN 60/648,256的优先权和利益，其内容在这里为所有目的整体引作参考。关于在联邦资助的研究和开发下作出的专利技术的权3 'J的声明 本专利技术在国立卫生研究院(National Institute of Health) 4受予的基 金号AI53389和AI56493以及国防部(Department of Defense )基金 DAMD17-03-C-0076和DAMD17-98-C-8030的政府支4寺下完成。政府 具有本专利技术的某些权利。专利
本专利技术涉及中和肉毒杆菌神经毒素(辨如，BoNT/A)的抗体和它们在治疗肉毒中毒中的用途。专利技术背景肉毒中毒是由梭菌属(C/oW/^//ww)的成员分泌的肉毒杆菌神经 毒素造成的，且其特征在于弛緩性麻痹，其如果没有立即致命，则需 要长期在重病监护病房中住院治疗和机械换气。天然产生的肉毒中毒 发生在胃肠道被梭菌细菌定居的婴儿或成年人中(嬰儿或肠肉毒中 毒)，在摄食被污染的食物产品后(食物肉毒中毒)，或在厌氧伤口感染 中(伤口肉毒中毒)(Center for Disease Control (1998) Botulism in the United States, 1899-1998. Handbook for epidemiologists, clinicians, and laboratory workers. Atlanta, Georgia U.S. Department of Health and Human Services, Public Health Service : 下 载地址是 "www.bt.cdc.gov/agent/ botulism/ index.asp")。 肉毒中毒神经毒素 (BoNT)也被疾病控制中心(Centers for Disease Control) (CDC)归入生 物恐怖主义的6种最高危险的威胁因子("A类因子")之一，这是由于 它们的巨大效力和致死率、容易生产和运输、和需要长期重症监护 (Arnon爭(2001) 285: 1059-1070)。伊拉克和前苏联都生产了用作武器的BoNT(United Nations Security Council (1995) Tenth report of the executive committee of the special commission established by the secretary-general pursuant to paragraph 9(b)(1) of security council resolution 687 (1991)， and paragraph 3 of resolution 699 (1991) on the activities of the Special Commision; Bozheyeva等(1999) Former soviet biological weapons facilities in Kazakhstan: past, present, and future. Center for Nonproliferation Studies, Monterey Institute of International Studies),且日本宗教奥姆真理教(Aum Shinrikyo)尝试使用BoNT 进行生物恐怖主义(Arnon爭(2001)同上)。作为这些威胁的结果，需 要用于预防和治疗中毒的特异性药物试剂。没有存在特异性的小分子药物可以用于预防或治疗肉毒中毒，但 是从CDC可以得到用于研究的五价类毒素疫苗(Siegel (1988) , C//".M/cro^W. 26: 2351-2356),且重组疫苗正在开发中(Smith (1998) rox/co" 36: 1539-1548)。无论如何，由于疾病或暴露的稀少，和接种 疫苗将阻止BoNT的随后的医学应用的事实，大规模平民或军人接种 疫苗是不可能的。由于疾病的快速发作，暴露后的接种疫苗是无用 的。毒素中和抗体(Ab)可以用于暴露之前或之后的预防，或用于治疗 (Franz爭(1993) Pp. 473-476 In B. R. DasGupta (编)，Botulinum and Tetanus Neurotoxins : Neurotransmission and Biomedical Aspects. Plenum Press, New York)。存在小量的马抗毒素和人肉毒杆菌免疫球蛋 白，且其目前分别用于治疗成年人(Black和Gunn. (1980) Jm.丄， 69: 567-570; Hibbs爭(1996) C//".23: 337-340)和婴儿肉 毒中毒 (Arnon (1993). Clinical trial of human botulism immune globulin,, p. 477-482. In B. R. DasGupta (编)，Botulinum and Tetanus Neurotoxins: Neurotransmission and Biomedical Aspects. Plenum Press, New York)。重组单克隆抗体(mAb)可以无限地提供抗毒素，其没有感染性疾 病危险，且不需要人供体进行血浆去除术。鉴于BoNT的极端致死率， mAb必须是高效力的，以在合理的成本提供足够数目的剂量。这样的 mAb的开发，已经成为国家变态反应和传染病研究所(National Institute of Allergy and Infectious Diseases )的最高优先的研究目标。尽管迄今为 止尚未描述一种非常有效的mAb，但我们最近报道了，组合2-3种 mAb，可以产生非常有效的BoNT中和(Nowakowski爭(2002)户roc. 淑/. ytec/. t/SA 99: 11346-50)。存在至少7种BoNT血清型(A-G)的事实，使肉毒中毒的mAb疗 法的开发变得复杂(Hatheway (1995) Cr. /mmw"o/, I95: 55-75.)，所述血清型即使有的话，也表现出微弱的抗体交叉反 应性。尽管仅仅4种BoNT血清型常规造成人疾病(A、 B、 E和F), 但已经出现了由BoNT C造成的婴儿肉毒中毒的 一个报道病例(Oguma 爭(1990)Z^"c" 336: 1449-1450)，与BoNT D有关的 一次食物传播的 肉毒中毒爆发(Demarchi,爭(1958) Sm〃. ^cad A^f. A/et/. ， 142: 580-582)，以及其中分离出BoNT G的几个可疑死亡病例(Sonnabend爭 (1981)D".， 143: 22-27)。还已经表明，气溶胶化的BoNT/C、 D和G通过吸入途径，在灵长类动物中产生肉毒中毒(Middlebrook和 Fmnz (1997) Botulinum Toxins, chapter 33. In 本文档来自技高网...

【技术保护点】
中和哺乳动物的肉毒杆菌神经毒素的方法，所述方法包含，给所述哺乳动物施用ＢｏＮＴ血清型的至少２种不同中和抗抗体，其中所述２种抗体中的至少一种以大于约１０ｎＭ的亲和力结合所述ＢｏＮＴ血清型的至少２种不同亚型。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：JD马克斯，P阿默斯多菲，I格伦，楼建龙，A拉扎伊，MC加西亚，
申请(专利权)人：加州大学评议会，
类型：发明
国别省市：US[美国]