本发明专利技术涉及合欢皮中抑制血管生成的有效部位的制备方法及实际应用。其制备方法为：合欢皮用７０％乙醇加热提取，提取物经水饱和正丁醇萃取，得到合欢皮中抑制血管生成的有效部位，其药效较高且毒性较小。本发明专利技术以血管生成作为治疗疾病的靶点，研究并阐明合欢皮有效部位的药用疗效和机制，为其新用途开发和发现药物作用新的靶点提供科学依据和重要信息。本发明专利技术的有效部位可与药学上适用载体混合制成各种制剂。它可用于治疗或预防与血管生成相关的疾病，还可用于肿瘤化疗和／或辅助化疗方面的治疗。
【技术实现步骤摘要】
合欢皮中抑制血管生成的有效部位的制备工艺和应用。本专利技术涉及从中药合欢皮 中提取、分离得到的一种有效部位，具有抑制血管生成的活性。阐明了其制备方法，及其在 医药、食品、化妆品方面的新用途。
技术介绍
恶性肿瘤直径大于1毫米呈肿瘤转移趋势时，必需先形成新的肿瘤血管。抑制肿 瘤内部和周围新血管形成便可有效减少，甚至消除肿瘤。近年来，肿瘤血管生成已成为肿 瘤治疗中一个很有吸引力的热点。目前开发出许多血管生成抑制剂在进行I III期临 床试验研究，例如血管生成抑素(Angiostatin)、内皮抑素(Endostatin)、烟曲霉素类似物 及金属蛋白酶抑制因子和尿激酶、白介素-12、血小板因子、Bufotanine等20多种。美国 Genentech 公司以血管内皮生长因子(vessel endothelial growth factor, VEGF)为靴标 的抗新生血管形成药Avastin近年用于治疗晚期转移的直肠癌和乳腺癌等，延长病人生命 4-6个月。2007年Avastin的年销售量已超过24. 5亿美元，2009年第一季度销售额达到13 亿美元。Avasitin成为近年抗癌新药的一枝独秀。此外，几种针对不同靶标的抗新生血管 形成的药物已进入 Π、ΙΙΙ 期临床试验。但目前上市的抑制肿瘤血管新生的药物只能静脉给药，且用药剂量较大、治疗时 间长。因此开发口服、高效低毒、价廉的血管生成抑制剂成为该领域的热点。“多成分、多靶点、多途径”是中药治疗疾病的特点，发挥祖国医学特色，从多途径、 多层次、多环节，研究中药直接地或间接地影响血管新生，有着重要的临床意义和应用前 景。通过建立体内、体外血管生成筛选模型，寻找到目的中药合欢皮等，并对其进行提取分 离，获得若干有效部位。进一步通过药效与毒性评价，得到一高效低毒有效部位。合欢皮是中国药典一部收录的一味常用中药，为豆科植物合欢Albizia julibrissin Durazz.的干燥树皮，具有解郁安神，活血消肿的功能，用于心神不安，忧郁 失眠，肺痈疮肿，跌扑伤痛等症。合欢属植物树皮、茎皮、叶、花、种子的主要的化学成分有三萜及其苷类 化合物、黄酮及其苷类化合物、生物碱、有机酸、留醇类化合物、木脂素、鞣质及挥发性成分 等。现代药理实验表明，合欢属植物具有广泛的抗癌、镇静、抗生育、PAF受体拮抗和抗炎 等作用 0也有研究发现合欢皮提取物具 有广泛的体内、体外抑制肿瘤细胞增殖的活性，但由于其抗癌作用机制还不明确，限制了其 抗癌作用的临床应用
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种从合欢皮中提取分离得到的高效低毒的有效部位，具有 抑制血管生成的作用。本专利技术的技术方案一种用于抑制血管生成的高效低毒的合欢皮有效部位。所述有效部位的制备方法，用70%乙醇加热回流提取合欢皮的干燥树皮、茎皮、 叶、花、种子、豆荚或根，并将提取液过滤、浓缩成浸膏。所得的浸膏用水饱和正丁醇萃取，收 集萃取相有效部位，回收溶剂成浸膏，冷冻干燥制成干粉。所述有效部位，体内、体外均有抑制血管生成的作用。所述有效部位经Molish反应、Libermann-Buchard反应、三氯化锑反应均呈阳性， 说明上述这些有效部位均含有至少一种以上苷类成分。所述合欢皮有效部位在制备抑制血管生成药物中的应用，其特征是该抑制血管生 成药物中含有几种有效剂量的合欢皮有效部位，以及常规药用载体和/或赋形剂。所述合欢皮有效部位在制成抑制血管生成药物时，可以加入一种或多种药学上可 接受的载体。所述载体包括药学领域常规的稀释剂，赋形剂、填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解 齐U、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂、乳化剂、渗透压调节剂，必要时还可以加入 香味剂、甜味剂等。所述合欢皮有效部位在制成抑制血管生成药物时，可以按常规的制剂工艺，单独 使用或与其它药物配合制备成在临床上可以使用的各种不同剂型的药物，例如注射液、片 剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液、膏剂、霜剂或乳剂等多种形式。所述的应用，为所述有效部位是用于预防和/或治疗至少一种选自下述之一的疾 病癌症和/或癌症转移，血管瘤，血管纤维瘤，新生血管性青光眼，糖尿病视网膜病变，早 熟视网膜病及视网膜静脉闭塞，视网膜变性，晶体后纤维组织增生，颗粒性结膜炎，血管生 成引起的角膜疾病，更年期黄斑和黄斑变性，牛皮癣，老年盘状斑变性及风湿性关节炎，银 屑病，毛细管扩张，脓性肉芽肿，伤口愈合中抑制斑痕形成，动脉粥样便化，脂溢性皮炎和痤 疮。所述的应用，为所述有效部位有抗肿瘤血管生成及其它与血管生成有关疾病治 疗、预防的用途。所述的应用，为所述有效部位还有用于肿瘤化疗和/或辅助化疗的用途。所述有效部位在制备抑制血管生成的保健食品中的应用，是上述有效部位用于抑 制血管生成的保健食品组合物。所述有效部位在制备抑制血管生成的化妆品中的应用，是上述有效部位用于抑制 血管生成的化妆品组合物。本专利技术的有益效果本专利技术以血管生成作为治疗疾病的靶点，首次明确合欢皮中具有抑制血管生成活 性的高效低毒有效部位的制备工艺方法，并将其作为用于肿瘤血管生成及其它与血管生成 有关的疾病预防、治疗的药物，其特点是剂量小，疗效高，副作用小。且以血管生成理论为研 究背景，为今后阐述中药有效部位的作用机制，发展中医药理论新的方向，发现新的药物作 用靶点提供重要的科学依据。附图说明图1合欢皮有效部位对HMEC和3B11细胞体外增殖的抑制作用图2合欢皮有效部位对体外HMEC细胞迁移的抑制作用图3合欢皮有效部位对体外3B11细胞迁移的抑制作用图4合欢皮有效部位对体外HMEC成管的抑制作用图5合欢皮有效部位对体外3B11成管的抑制作用图6合欢皮有效部位对小鼠H22体内肿瘤的抑制作用图7合欢皮有效部位对小鼠H22实体瘤的病理改变 图注·Λ模型组，B高剂量组，C中剂量组，D低剂量组图8致毒剂量合欢皮有效部位对小鼠主要脏器的损伤 图注=AB心肌，CD肺，EF肝，GH脾，IJ肾具体实施例方式实施例1 合欢皮的有效部位提取分离工艺与理化性质的鉴定IOOg合欢皮用1L70%乙醇回流两次，每次2-2. 5h，冷却后，过滤，旋转蒸发至干， 去离子水复溶，冻干，后取冻干粉lg，IOOml水溶解，水饱和正丁醇萃取三次，收集正丁醇相。所得正丁醇组分旋转蒸发至浸膏状，水复溶，冷冻干燥，得率为原药材的1. 25%。 有效部位的Molish反应呈紫红色，Libermann-Buchard反应呈紫红色，三氯化锑显色为红 色。此结果说明这一有效部位含有至少一种以上苷类化合物。实施例2 合欢皮的有效部位对HMEC和3B11细胞增殖的抑制作用将HMEC用含lmmol/L谷氨酰胺、lmg/L氢化可的松、10 μ g/L EGF和150ml/L小牛 血清的MCDB-131培养液，于37°C，50ml/L C02培养箱中传代培养。取对数生长期HMEC细 胞，按每孔8000个细胞接种于96孔板中，放置于37°C、50ml/LC02的培养箱中培养24h，加 入不同浓度药物作用时间48h，以不加药组为阴性对照组，每组同时设3个复孔，每批样品 重复3次试验。加药后培养至72h，去上清液，每孔轻轻加入100g/L三氯醋酸100 μ 1固定， 静置5min后移到4°C再放置至40min，倾掉本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种权利要求合欢皮中具有抑制血管生成作用的一种高效低毒的有效部位。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：金坚，邱丽颖，冯磊，刘玲艳，钱建瑛，杜斌，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：32[]
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