人类松弛素配方组成比例

本发明专利技术提供一种人类松弛素的药物组合物，其特征为该组合物的酸度为ｐＨ４左右至７左右的范围。用于引产或阻止早产的该组合物包括：可将该组合物维持于所需ｐＨ范围的缓冲剂及可使该组成物成为等渗的药剂，必要时还可加入稳定剂。作为一个特例，本发明专利技术提供了一种溶于柠檬酸盐的缓冲液（ｐＨ５．０左右）的人类松弛素配方，其中存在氯化钠，离子强度大约为０．１５μ。（*该技术在2009年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种稳定的、均质的、具有生物学活性的人类松弛素的配方及将该配方用于治疗哺乳动物的方法。成熟的人类松弛素为一种卵巢激素肽，分子量大约为6，000道尔顿，已知与分娩前的产道改变有关，因而可以促进生育过程。参见Hisaw，F.L.，Pros.Soc.Exp.Biol.Med.，23，661-663(1926);Schwabe，C.etal.，Biochem.Biophys.Res.Comm.，75503-570(1977);James，R.etal.，Nature，267544-546(1977).该蛋白质似乎是调整靶器官的结缔组织的变化的，使在妊娠期及分娩中引起所需的器官结构的变化。作为妊娠激素，松弛素所起的作用包括抑制早产及分娩时的子宫颈催熟。虽然松弛素主要是妊娠激素，然而在非妊娠妇女及男性体内亦可测出它的存在。参见Bryant-Greenwood，G.D.，EndocrineReviews.362-90(1982)及Weiss，G.，Ann.Rev.Physiol.，4643-52(1984)。松弛素已从许多种生物中被提纯，包括猪、鼠、马、鲨、虎、大鼠、角鲨及人类，并且显示出与胰岛素及类胰岛素生长因子至少在一级结构及二级结构上有同源性。对于人类，经发现妊娠期黄体(CL)中含量最丰富。两种人类基因型，通过采用猪松弛素基因探针进行基因组克隆而被确定，尽管人们发现在这两种基因型中仅有一种(H2)在CL中被转录。参见(Hudson，P.etal.，Nature，301628-631(1984)andHudson，P.etal.，TheEMBOJournal，32333-2339(1984)。目前还不清楚，究竟另一种基因在另一个组织位点被表达呢，还是这只是一个拟基因。这两种人类松弛素基因相互之间在核苷酸及氨基酸方面显示了明显的同源性，尤其是在B及C肽中。然而，亦存在若干显著的序列分歧区域，尤其在A及B链中的氨基末端区域中。与所测试的所有物种类似，H2松弛素的初级转译产品为一种前松弛素原，它是包括24个氨基酸的信号序列，在其后接着大约29个氨基酸的B链有104-107个氨基酸的联接肽，以及大约有24个氨基酸的A链所组成。H2松弛素是在卵巢中合成并被表达的这一事实寓意着，该松弛素为一个参与妊娠生理过程的蛋白顺序。在对合成的人类松弛素(H2)及某些人类松弛素类似物就其生物学活性进行测试时发现，存在一个松弛素核心，对于生物学活性是必需的，同时还发现了蛋氨酸上的某些取代氨基酸不影响生物学活性。参见Johnstonetal.，inPeptidesStructureandFunction，Proc.NinthAmericanPeptideSymposium，Deber，C.M.etal.(des.)(PierceChem.Co.1985)。有许多应用或引入猪松弛素作为药物的方法，包括采用静脉及肌肉输注，已经被发表。参见BirnbergandAbitol，Obstet.&Gynecol.，10366-370(1957);Eichneretal.，Am.J.Obstet.Gyn.，711035-1048(1956).此外，猪松弛素的局部应用已用于人类临床试验，以催熟子宫颈及进行引产。参见MacLennanetal.，Obstetrics&Gynecology，68598-601(1986);MacLennanetal.，TheLancet，i220-223(1989);MacLennanetal.，Obstetrics&Gynecology，58601-604(1981);MacLennanetal.，Aust.NZJ.Obstet.Gynaec.，2568-71(1985).在这些研究中，是将溶于蒸馏水的猪松弛素混以水溶性甲基纤维素颗粒以产生粘滞的凝胶。已发现2mg的剂量可以改善子宫颈的状态。参见MacLennanetal.(1981)，supra.此外，猪松弛素还可用聚1，2-亚乙基二醇模压成丸药，用以催熟人类子宫颈。参见Evansetal.，Am.J.Obstet.Gynecol.，147410-414(1983).猪松弛素也可采用悬浮于灭菌的K-Y凝胶及磷酸盐缓冲的食盐水进行配制，采用一个灭菌的授精管以使之输入子宫颈口。在子宫颈口输入3，000单位的松弛素之后的8小时之内，子宫颈的扩张不断增加。参见PerezgrovasandAnderson，BiologyofReproduction，26765-776(1982)。公开于1983年8月24日的公开号为86，694的欧洲专利揭示了如何制备猪的前松弛素原、猪松弛素原及猪松弛素。发表于1987年8月26日的澳大利亚第561，670号专利及公开于1983年1月5日的公开号为68，375的欧洲专利及文献Haleyetal.，DNA，1155-162(1982)揭示了如何制备猪松弛素。公开于1984年2月22日的公开号为101，309的欧洲专利及发表于1988年7月19日的第4，758，516号美国专利分别地揭示了对人类H1-松弛素及H2松弛素及其类似物编码的基因序列进行的分子克隆及特性鉴定。公开于1988年3月16日的公开号为260，149的欧洲专利揭示了人类松弛素原的配方。发表于1981年5月12日的美国专利第4，267，101号揭示了一种自胎膜获得人类松弛素的方法。公开于1988年1月7日的公开号为251，615的欧洲专利揭示使还原的人类松弛素A链或其类似物与还原的人类松弛素B-链或其类似物在某些条件(包括pH值大于7.0)下进行结合的方法。美国专利第4，267，101号揭示了一种自胎膜制取人类松弛素的方法。文献Sherwood，inThePhysiologyofReproduction，ed.byKnobilandNeill，(NewYork，RavenPress，(1988)，p.585-673，于第587页揭示了藉助松弛素于酸性溶剂中的稳定特性而进行的提取及分离的方法的几乎所有的操作方法。此外，在第588页上还指出，在松弛素提取过程中采用强酸性介质，从低pH值本身及使高分子量蛋白酶沉淀这两方面使蛋白水解减少至最低程度。文献EldridgeandFields，Endocrinology，1172512-2519(1985)报道免的松弛素具有一个等电点，经等电聚焦测定，为6.5左右。这是与文献Fieldsetal，Ann.NYAcad.Sci，38075(1982)的发现相违背，该文献作者发现的兔松弛素等电点远远地高于此。另外，发表于1960年12月13日的第2，964，448号美国专利揭示了可注射的松弛素组合物，包括溶于注射用油中的松弛素(最好为低酸度的)，及铝的脂肪酸盐。本专利技术的一个目的是，提供一种可用于治疗的即通过局部或非肠胃道给药的具有生物学活性的、稳定的、人类松弛素的均质配方。本专利技术的另一个目的是，提供一种在液态可以允许长期贮藏，而便于在施用前的存放及运输。本专利技术的另外一个目的是减少人类松弛素的凝聚及降解从而提供一种可抵抗因温度的波动而引起降解的配方。本专利技术的又一个目的是提供一种用本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有生物学活性的药物组合物，其特征在于，该组合物包括于可将该组合物的ｐＨ值维持于４至７左右的缓冲剂之中存在有效数量的人类松驰类。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：大卫C西普拉，吐H古扬，斯蒂芬J喜儿，
申请(专利权)人：基因技术公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]