增加肽、肽模拟物和其他胃肠道转运蛋白底物吸收的方法技术

提供了用于增强肽、肽模拟物和其他胃肠道转运蛋白底物通过胃肠道转运蛋白的吸收和／或转运的方法和组合物。所述方法包括使用激素例如褪黑激素来增加肽、肽模拟物和底物的转运。所述组合物包括一种或多种激素和一种或多种肽、肽模拟物以及其他胃肠道转运蛋白底物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请的交叉参考本申请要求2008年3月27日提交的美国临时申请序列号61/072069的优先权， 其公开的内容引入本文作为参考。专利技术背景专利
本专利技术一般性地涉及增加动物吸收化合物的方法，尤其是使用诸如5-甲氧 基-N-乙酰基色胺的激素来增加肽、肽模拟物以及其他胃肠道转运蛋白底物在动物中的吸 收。相关技术描述肽转运蛋白是介导二肽和三肽和多种肽模拟物以及其他化合物的细胞吸收的膜 结合蛋白质。它们发现于细菌、酵母、植物、无脊椎动物和脊椎动物中。在脊椎动物中，两种 转运蛋白，肽转运蛋白1和2，分别称为P印Tl和P印T2，主要在小肠(P印Tl)、肾(P印Tl和 PepT2)和肺(P印1 的刷状缘膜中表达。P印T转运蛋白是质子偶联的转运蛋白，其能转运 多种二肽和三肽以及多种诸如内酰胺抗生素、选择的血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂 和肽酶抑制剂的治疗药物。据认为，底物流与沿着膜电位的质子电化学梯度的质子运动偶 联，作为迁移的主要驱动力。哺乳动物寡肽转运蛋白是膜转运蛋白的PTR2家族的一部分。其特征为在所有已 知的家族成员中保守的两个标记性基序。第一个保守基序是在第二推定跨膜结构域末端开 始的区域，包括随后的第一细胞质环和第三跨膜结构域。第二个保守基序对应于第五跨膜 区域的核心区域。除了哺乳动物P印Tl和P印Τ2转运蛋白外，PTR2家族还包括酵母肽转运 蛋白PTR2、来自乳酸乳球菌的DtpT以及多种具有未知功能的“孤儿”转运蛋白。大部分孤 儿转运蛋白发现于原核生物例如大肠杆菌中。在哺乳动物中，P印Tl在蛋白质(包括小寡肽)的吸收中具有重要作用。P印Tl主 要在肠上皮细胞的刷状缘膜中表达，此处其介导诸如消化物中的寡肽从消化腔到细胞的吸 收。此外，由于相对较宽的底物特异性，PepTl能接受包括内酰胺抗生素在内的多种药 物活性化合物，并作为这些化合物的吸收途径。功能研究显示，除利用H+电化学梯度作为 驱动力外，P印Tl具有ρΗ依赖性，已报道是高速的低亲和转运蛋白。据称P印Tl还是可诱 导的转运蛋白。诱导物包括底物、底物类似物和各种激素。生理应激，包括肠内疾病、机体应激、手术、损伤和/或心理应激能负面影响肠道 健康和功能，直接或间接影响氨基酸吸收。例如，已显示1型糖尿病的大鼠(即天然的低或 无胰岛素生成)与健康大鼠相比PepTl活性下降。已尝试改善氨基酸吸收。例如预消化的食物蛋白和向食物例如病危护理食物中添 加水解的食物蛋白。然而该方法主要增加了可吸收的氨基酸或肽库，而未必能增强吸收过 程。某些特定的小肽能明显刺激肽的吸收。美国专利号6，803，186中披露了饲喂特定肽、尤 其是甘氨酰肌氨酸或β-丙氨酰-L-组氨酸(肌肽)增加犬细胞系中的肽吸收的方法。然而在体内，与单独的标准饮食相比，这些肽在刺激肽吸收中的应用并不成功。已显示单独的 二肽，即丙氨酰-谷氨酸不足以刺激肽吸收活性；然而当与生长激素(GH)结合时，当用过氧 化氢使人细胞系产生氧化应激时，肽吸收得以维持。在肽和GH存在下，过氧化物诱导的氧 化应激减少了肽吸收。某些科学文献表明特定的生物活性肽或激素能通过直接刺激PepTl 的活性来刺激小肽吸收。胰岛素、表皮生长因子、瘦素、干扰素Y和甲状腺激素均显示某些 刺激效应。已报道了关于生长激素的任何刺激效应的争议数据。 除甲状腺激素外，刺激性肽激素是物种特异性的蛋白。因此，这些激素的实际应用 或使用需要例如针对要使用的各物种通过化学或重组基因技术合成。此外，这些激素表现 为通过皮下注射的方式施用，这在实际应用中是不合适的。为了各种目的，进行了其他尝试以特异性调节PepTl转运活性。例如美国专利申 请US20030170748A1披露了编码犬P印Tl的核酸。该公开物还评价了亮氨酸和色氨酸的某 些肽结合形式的吸收，以及各种小肽抑制模型底物甘氨酰肌氨酸(GlySar)转运的能力。提 供了确定具体的肽是否对动物具有有益的营养性质的方法，以及通过使细胞接触P印Tl底 物来刺激细胞内PepTl活性的方法。类似的，美国专利申请US20060210569A1披露了抑制 P印Tl，从而抑制细胞生长的方法。因此，仍然需要增加动物吸收或摄取一种或多种特定或非特定的肽、肽模拟物和 其他胃肠道转运蛋白底物的方法，尤其是通过转运蛋白例如P印Tl转运蛋白的方法。专利技术概述因此，本专利技术的一个目的是提供增强、改善或增加肽、肽模拟物或其他胃肠道转运 蛋白底物在动物中吸收、转运、摄取和/或同化的方法。本专利技术的另一目的是提供支持和/或改善胃肠道健康、促进动物的健康或保健、 对患有吸收不良症的动物提供改善的氨基酸营养、递送作为胃肠道转运蛋白底物的药物或 前药，以及维持老年动物或紧张体力活动，例如锻炼的动物中的肌肉量的有益方法。这些和其他目的中的一个或多个通过使用新的组合物和用于增强动物中肽、肽模 拟物或其他胃肠道转运蛋白底物转运的方法来实现。所述方法包括施用有效增强肽、肽模 拟物或其他胃肠道转运蛋白底物的转运的量的一种或多种褪黑激素，其通过动物中的肠道 转运蛋白、例如PepTl进行。该方法改善了这些化合物的吸收，并增加了这些化合物可被动 物利用以达到既定目的(例如构建蛋白或抑制感染)的量。当食物组合物与足以增强所述 组合物中一种或多种二肽或三肽或其天然消化产物吸收的量的褪黑激素一起施用至动物 时，所述方法还增强了食物组合物在体内的营养价值。所述组合物包括褪黑激素和一种或 多种肽、肽模拟物或其他胃肠道转运蛋白底物。本专利技术的其他目的、特征和优点对于本领域技术人员来说也是显而易见的。专利技术详述定义术语“褪黑激素”表示5-甲氧基-N-乙酰基色胺及其基本上与5-甲氧基-N-乙 酰基色胺具有同样生物学活性的衍生物和类似物，以及其体内前体。5-甲氧基-N-乙酰基 色胺是其量在每日周期内变化的化合物。该化合物由松果体、视网膜、免疫细胞和胃肠道产 生。其经血清素的合成从氨基酸色氨酸天然合成。松果体从视网膜接收关于光和暗的日夜 信息，从而合成褪黑激素。该化合物也可通过各种植物例如大米、细菌、原生动物、藻类和其他生物体合成。该术语还表示具有与5-甲氧基-N-乙酰基色胺对胃肠道转运蛋白如P印Tl 和PepT2基本上相同的生物学活性的任何其他激素。术语“肽模拟物”表示模拟天然寡肽一个或多个结构方面或生物学活性，但包含一 个或多个非肽或非天然化学结构或键的化合物。本文所用肽模拟物具有与动物中寡肽转运 有关的一种或多种生物学性质。在一个优选的实施方案中，本文所用肽模拟物由一种或多 种寡肽转运蛋白识别，例如作为底物、抑制剂、激动剂或拮抗剂。在另一个实施方案中，肽模 拟物是一种或多种寡肽转运蛋白的诱导物，即，肽模拟物诱导所述寡肽转运蛋白的量或活 性，而不直接识别为该蛋白的底物或激动剂。肽模拟物常用于模拟肽的生物学作用，因此它 们可以是设计为模拟一种或多种肽的小蛋白样链。肽模拟物通常基于现有的相关肽进行合 成，进行一个或多个修饰以改变分子的结构或性质。修饰可改变肽分子的稳定性、半衰期、 生物活性、吸收或副作用(例如毒性、溶解性、疏水性、侧链电荷或柔性)。肽模拟物可用作 合理开发的或基于对已知或推定生物学活性的现有肽的修饰开发的药物或药物类化合物。 本文所用肽模拟物优选包含一个或多个非天本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种增强肽、肽模拟物和其他胃肠道转运蛋白底物在动物中转运的方法，包括施用有效增强肽、肽模拟物或底物通过动物肠内转运蛋白进行转运的量的褪黑激素。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2008-3-27 61/072,0691.一种增强肽、肽模拟物和其他胃肠道转运蛋白底物在动物中转运的方法，包括施用 有效增强肽、肽模拟物或底物通过动物肠内转运蛋白进行转运的量的褪黑激素。2.权利要求1的方法，其中所述褪黑激素与肽、肽模拟物或底物联合施用。3.权利要求1的方法，其中褪黑激素在食物组合物中施用。4.权利要求3的方法，其中所述食物组合物与肽、肽模拟物或底物联合施用。5.权利要求1的方法，其中施用的褪黑激素量为至少约0.lmg/kg。6.权利要求1的方法，其中施用的褪黑激素量为约0.lmg/kg至约50/mg/kg。7.权利要求1的方法，其中肠内转运蛋白是膜转运蛋白PTR2家族的成员。8.权利要求1的方法，其中肠内转运蛋白是肽转运蛋白1(P印Tl)。9.权利要求1的方法，其中肽、肽模拟物或底物是营养物或药物。10.权利要求9的方法，其中所述药物是抗生素。11.权利要求1的方法，其中所述动物具有吸收不良症。12.权利要求1的方法，其中褪黑激素与一种或多种兴奋剂联合施用。13.权利要求1的方法，其中所述动物是伴侣动物。14.包含褪黑激素和一种或多种肽、肽模拟物或其他胃肠道转运蛋白底物的组合物。15.权利要求14的组合物，其包含至少一种含有β-内酰胺环的肽模拟物。16.权利要求15的组合物，其中所述肽模拟物包括青霉素、头孢菌素、单酰胺菌素、碳 青霉烯、内酰胺酶抑制剂，上述的任何一种的衍生物或盐，或其任意组合。17.权利要求14的组合物，其中所述肽模拟物包括抗生素、抗高血压剂或抗病毒剂或 前药。18.减少对抗抗生素敏感型微生物所需要的抗生素量的方法，包括口服施用一种或多 种抗生素，其与有效增强所述抗生素的胃肠道转运蛋白转运的量的褪黑激素联合。19.权利要求18的方法，其中褪黑激素的施用量至少为约0.lmg/kg。20.权利要求18的方法，其中所述抗生素是青霉素、头孢菌素、单酰胺菌素、碳青霉烯、 β -内酰胺酶抑制剂，上述的任何一种的衍生物或盐，或其任意组合。21.减少发展成抗生素抗性微生物风险的方法，包括口服施用一种或多种抗生素，其与 有效增强所述抗生素的胃肠道转运蛋白转运的量的褪黑激素联合。22.权利要求21的方法，其中褪黑激素的施用量至少为约0.lmg/kg。23.权利要求21的方法，其中所述抗生素是青霉素、头孢菌素、单酰胺菌素、碳青霉烯、 β -内酰胺酶抑制剂，上述的任何一种的衍生物或盐，或其任意组合。24.改善P印Tl底物在动物胃肠道中吸收的方法，包括向动物施用有效改善P印Tl底物 吸收的量的褪黑激素。25.权利要求对的方法，其中褪黑激素的量不诱导动物睡眠或困倦。26.权利要求对的方法，其中所述P印Tl底物是二肽、三肽或肽模拟物。27.权利要求M的方法，其中所述P印Tl底物包括色氨酸、谷氨酰胺、精氨酸或支链氨 基酸残基。28.权利要求M的方法，其中施用步骤包括施用至少一种PepTl底物。29.权利要求M的方法，其中PepTl底物用于促进老年动物的最佳营养。30.权利要求对的方法，其中所述动物具有吸收不良症。31.权利要求M的方法，其中褪黑激素以一个或多个剂量提供，其与PepTl底物联合口 服施用。32.权利要求对的方法，其中褪黑激素存在于食物中，配制为在动物正常睡眠时间前 消耗。33.改善肽模拟物在动物中吸收的方法，包括向动物联合施用有效改善所述肽模拟物 的吸收的量的褪黑激素和所述肽模拟物。34.权利要求33的方法，其中褪黑激素的施用量不诱导动物睡眠或困倦。35.权利要求34的方法，其中褪黑激素以一个或多个剂量口服施用。36.权利要求35的方法，其中褪黑激素的总剂量低于约:3mg/kg。37.权利要求33的方法，其中所述肽模拟物是抗生素。38.权利要求33的方法，其中所述肽模拟物含有β-内酰胺环。39.权利要求33的方法，其中所述肽模拟物是青霉素、头孢菌素、单酰胺菌素、碳青霉 烯、β -内酰胺酶抑制剂，上述的任何一种的衍生物或...

【专利技术属性】
技术研发人员：BM赞吉，
申请(专利权)人：雀巢产品技术援助有限公司，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]