一次注射疫苗的配制品制造技术

一种微粒，其颗粒大小为０．５至３００μｍ，它是通过用水溶性物质包裹抗原或抗原混合物以得到核心颗粒，再用可生物降解的聚合物包裹核心颗粒而制备的；一种一次注射疫苗配制品，它是通过将微粒分散到注射介质中制备的。（*该技术在2016年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微粒，其颗粒大小为0.5至300μm，相继用水溶性物质和生物降解性聚合物包裹抗原或抗原混合物即可制备之；本专利技术还涉及疫苗的配制品，它是通过将微粒分散到注射介质中制备的，由于它可在一段时间内，如几个月内延缓释放抗原，因此仅仅施予一次注射即可完成抗传染病的免疫接种作用(“一次注射疫苗的配制品”)。迄今为止开发了大量能有效防治多种传染病的疫苗，然而大多数目前使用的疫苗都需要多次接种，这种需要给疫苗使用者带来了经济上的负担和不方便(M.T.Agoado and P.H.Lambert，Immunobiol.，184，113(1992)；Aryward，B.，et al.，Vaccine.12.1155(1994)).尤其是已发现那些接受第一次接种的人当中仅有约30％返回接受第二次接种。因此当规定要接种三次时，经统计100个人当中仅有9人完成了免疫接种过程，这可清楚地阐明对通过一次注射接种即可完成免疫接种的疫苗的需要。一次注射疫苗开发的现有技术方法基本上集中于使用微粒的思路，其中所需抗原被可生物降解的聚合物质包裹，此微粒在规定的时间期间内缓慢释放抗原以完成接种(R.Langer and J.Folkman，Nature.263.797(1976))。在多种可生物降解的聚合物中，通常已知聚交酯(PLA)、聚乙交酯(PGA)、和聚(交酯一共-乙交酯)(PLGA)是安全的，因为它们在活体内经水解可成为无毒的乳酸和乙醇酸。已将那些聚合物用于制备缝线，手术后无需将之除去；也可用于配制经包裹的Leuprolide乙酸盐，其是一种促黄体素释放激素(LHRH)类似物，经食品与药品管理署(FDA)的允许可将它们供人使用(R.Langer and M.Mose. Science.249.1527(1990)；D.K.Gilding and A.M.Reed.Polymer，20.1459(1979)；and William Morris.et al.，Vaccine.12.5(1994)).这些聚合物降解速率随乙交酯/交酯的比率及其分子量的不同而不同，因此通过调节聚合物的分子量和乙交酯/交酯的比率以及颗粒的大小、胶囊配制品的包裹厚度即可使药物的释放在几个月内得以维持(S.J.Holland，et al.，J.Control.Rel.，4.155(1986))。1988年以来，世界卫生组织(WHO)已发起大量研究以开发使用上述可生物降解的聚合物的破伤风类毒素的一次注射疫苗(M.T.Aguado，Vaccine，11，596(1993)；Proceed.Intern.Symp.Control.Rel.Bioact.Mater.2lst.Controlled ReleaseSociety，Inc.，Y.Men.etal.，Paper No.126(1994)；20th.B.Gander.et al.，Paper No.135(1993)；19th.A.M.Hazrati.et al.，Paper No.220(1992)；21st. M.Gilley.et al.，Paper No.218(1992)；21st.ManmohanSingh.et al.，Paper No.1476(1994)；21st.C.Yan.et al.，Paper No.127(1994)).然而尽管作出这些努力，仍没有将一次注射疫苗的配制品投入实际应用，这主要是由于以包裹的配制品所形成的抗体的量仅约为经常规明矾配制所产生抗体量的1/10，而且结果不能再现(R.E.Spier.Vaccine.11.1450(1993)；M.T.Aguado and P.H.，Lambert.Immunobiol.，184.113(1992))。已观察到这些问题的起因是首先，用于溶解可生物降解的聚合物的有机溶剂通过使抗原变性而使抗原的抗原性降低或丧失；第二，当与水接触时，抗原形成了抗原性有所降低的凝聚体；第三，由于抗原和疏水的可生物降解的聚合物之间不必要的相互作用使得抗原性降低或丧失。Alonso等人通过用PLA和PLGA包裹破伤风类毒素制备了一次注射疫苗，但由于在包裹过程中不可避免地将类毒素与有机溶剂相接触，因此发现在疫苗颗粒中保持的破伤风类毒素的抗原性仅为原始抗原性的0.5至20％(Maria.J.Alonso.et al.，Vaccine.12.229(1994))。在使用大鼠的实验中，这种疫苗的配制品显示了比使用明矾作佐剂不加强免疫的对照要低很多的抗体形成能力，这表明这种疫苗配制品作为一次注射疫苗是不可行的。Schwendeman等人通过对破伤风类毒素进行化学修饰，即通过将抗原的巯基S-烷基化来努力解决上述问题，但结果并不令人满意(S.P.Schwendeman.et al.，Proceed.Intern.Symp.Control.Rel.Bioact.Mater.，21st.Paper No.128.1994)。Nellore等人报道了乙肝病毒一次注射疫苗的配制品，其包括微粒，此微粒是通过使用包括有机溶剂抽提或蒸发的方法用PGA包裹乙肝表面抗原(HBsAg)来制备的(R.V.Nellore.et al.，J.Parenteral Science & Technology.46.176(1992))。使用豚鼠的动物实验表明含有大小为1至10μm的较小颗粒的配制品显示出的抗体形成能力比使用明矾作佐剂不经加强免疫的对照要低很多，而颗粒大小为20至60μm和1至60μm的其它配制品基本上没有活性。在这些配制品中，包裹过程中使用的有机溶剂使HBsAg变性。因此，为了通过用可生物降解的聚合物包裹抗原来制备有效的一次注射疫苗，人们必须使用在包裹步骤中不需要使用有机溶剂的可生物降解的聚合物，或者在包裹过程中必须防止抗原与有机溶剂接触。然而，还没有已知的不需要使用有机溶剂的可生物降解的聚合物。典型地，已通过用可生物降解的聚合物包裹有机的、肽或蛋白质药物制备微粒。特别地，通过将药物溶解或分散于其中溶解了可生物降解的聚合物的有机溶剂中，并在表面活性剂的存在下将油相分散于水相中制备油-水(“O/W”)乳浊液即可制备油相。然后，使用如蒸发或抽提的常规方法除去有机溶剂，使生物可降解的聚合物固化即可得到微粒。在此过程结束时，药物分散于聚合物基质中而存在，所得微粒以于溶解有表面活性剂的水相中的分散相而存在。然而，此常规方法的缺点是大多数可生物降解的聚合物易于被水水解；通常表面活性剂不适于注射，因此必须通过洗涤过程除去；洗涤过程之后此颗粒必须经受干燥过程以防止聚合物降解。在此O/W乳浊液方法中，药物直接与有机溶剂接触，因此此方法不能被用来制备含接触有机溶剂后抗原性会降低的抗原的疫苗配制品。另外，此方法还有其它局限性，即不能用于水溶性药物。随后，开发的努力就转移到发现一种使用W/O/W乳浊液以克服上述困难的方法上。例如，欧洲专利申请No.87309286.0公开了口服疫苗的配制品，它包含10μm或更小的颗粒，此颗粒是通过用PLA、PGA、PLGA等包裹多种抗原而制备，已知它可穿过Peyer氏小膜片。另外，欧洲专利申请No.88302940.7公开了一种注射本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种微粒，其颗粒大小为０．５至３００μｍ，它是通过用水溶性物质包裹抗原或抗原混合物以得到核心颗粒，再用可生物降解的聚合物包裹核心颗粒而制备的。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：李铉国，朴廷焕，崔湳锡，金明珍，金秀宪，
申请(专利权)人：株式会社LG化学，
类型：发明
国别省市：KR[韩国]