Treg细胞培养方法技术

技术编号:46626363 阅读:2 留言:0更新日期:2025-10-14 21:23
一种用于培养调节性T细胞(Treg)的体外方法以及一种通过所述方法获得的和/或可获得的产品,所述方法包括使所述Treg与mTOR抑制剂接触。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本专利技术整体涉及一种用于培养treg的体外方法,该方法包括在激活之前用mtor抑制剂预处理treg,然后在激活之后在mtor抑制剂的存在下培养激活的treg。体外方法特别地可以是用于扩增treg的体外方法,该方法包括在激活之前用mtor抑制剂预处理treg,然后在激活之后在mtor抑制剂的存在下培养激活的treg。特别地,在体外方法期间,具体地在treg被激活之前,mtor抑制剂可以仅施用于treg一次,并且在treg激活之后对于培养步骤的至少一部分可能仍然存在。因此,在预处理之后可能不必添加任何附加的mtor抑制剂。本专利技术还涉及可通过本文所述的体外方法获得的treg细胞产品。本专利技术另外涉及本文所述的体外方法用于增加treg扩增或减少treg细胞产品中的杂质或促进所需表型或增加可能已经引入treg中的异源核酸的表达的用途。


技术介绍

1、过继细胞疗法(act),即向受试者施用功能免疫细胞,已经成为一种针对各种医学病症的既定并且不断发展的免疫治疗方法,该医学病症尤其包括恶性或感染性疾病。肿瘤浸润淋巴细胞最初表明对治疗转移性黑色素瘤有效,随后开发了表本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于培养调节性T细胞(Treg)的体外方法,所述方法包括:

2.根据权利要求1所述的方法,所述方法还包括在步骤(a)之前分离Treg群,特别是CD4+CD25+Treg群的步骤。

3.根据权利要求1或2所述的方法,其中在步骤(a)和/或步骤(c)中使用的所述mTOR抑制剂是雷帕霉素或雷帕霉素类似物。

4.根据任一前述权利要求所述的方法,其中在步骤(a)中使用的所述mTOR抑制剂与在步骤(c)中使用的所述mTOR抑制剂相同。

5.根据任一前述权利要求所述的方法,其中所述方法不包括在步骤(b)或步骤(c)之前去除步骤(a)中使用的所述m...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种用于培养调节性t细胞(treg)的体外方法,所述方法包括:

2.根据权利要求1所述的方法,所述方法还包括在步骤(a)之前分离treg群,特别是cd4+cd25+treg群的步骤。

3.根据权利要求1或2所述的方法,其中在步骤(a)和/或步骤(c)中使用的所述mtor抑制剂是雷帕霉素或雷帕霉素类似物。

4.根据任一前述权利要求所述的方法,其中在步骤(a)中使用的所述mtor抑制剂与在步骤(c)中使用的所述mtor抑制剂相同。

5.根据任一前述权利要求所述的方法,其中所述方法不包括在步骤(b)或步骤(c)之前去除步骤(a)中使用的所述mtor抑制剂的步骤。

6.根据任一前述权利要求所述的方法,其中所述方法不包括在步骤(b)或步骤(c)之前洗涤所述treg的步骤。

7.根据任一前述权利要求所述的方法,其中步骤(a)中使用的所述mtor抑制剂存在于步骤(b)和步骤(c)期间,并且特别地不添加附加的mtor抑制剂以用于步骤(c)的目的。

8.根据任一前述权利要求所述的方法,其中步骤(a)和/或步骤(c)中使用的所述mtor抑制剂的初始浓度为约30nm至约500nm。

9.根据任一前述权利要求所述的方法,其中在步骤(b)之前,所述treg在步骤(a)中与所述mtor抑制剂接触至少约15分钟,例如约30分钟至约90分钟。

10.根据任一前述权利要求所述的方法,其中通过使所述treg与tcr/cd3激活剂和/或tcr共刺激激活剂接触来激活它们。

11.根据权利要求10所述的方法,其中所述tcr/cd3激活剂是抗cd3抗体或其cd3结合片段,和/或其中所述tcr共刺激激活剂是抗cd28抗体或其cd28结合片段。

12.根据任一前述权利要求所述的方法,其中在步骤(c)中在所述mtor抑制剂的存在下将所述treg培养至少约6小时,例如约12小时至约72小时,例如约12小时至约60小时,例如约36小时至约60小时,例如约48小时。

13.根据任一前述权利要求所述的方法,其中步骤(c)与步骤(b)同时发生或步骤(c)在步骤(b)之后立即发生。

14.根据任一前述权利要求所述的方法,所述方法还包括降低与所述treg群接触的所述mtor抑制剂的浓度的步骤(d)和在浓度降低的所述mtor抑制剂的存在下进一步培养或扩增所述treg群的步骤(e);其中步骤(d)和(e)在步骤(c)之后进行。

15.根据权利要求1至14中任一项所述的方法,所述方法还包括去除与所述treg群接触的所述mtor抑制剂的步骤(d)以及在不存在任何mtor抑制剂的情况下进一步培养或扩增所述treg群的步骤(e);其中步骤(d)和(e)在步骤(c)之后进行。

16.根...

【专利技术属性】
技术研发人员:N·贝尔蒙特N·埃马米M·基肖尔A·古文内尔
申请(专利权)人:圭尔医疗有限公司
类型:发明
国别省市:

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