分析方法技术

本发明专利技术描述了用于对样品中多个被分析物中的每个进行分析的方法。该方法包括将空间分隔的测试区的阵列与液体样品（例如全血）相接触。测试区布置在微流体装置的通道中。通道由至少一个挠性的壁和第二个可以是也可以不是挠性的壁所限定。每个测试区含有特异性针对相应靶被分析物的探针化合物。挤压微流体装置以减小通道的厚度，该厚度是通道中壁的内表面之间的距离。通过在相应位置处内表面之间的距离被减小的多个测试区中的每个测试区上，对相互作用进行光学检测，确定每种被分析物的存在。每个测试区上的相互作用指示了样品中靶被分析物的存在。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】与相关申请的交叉引用本申请要求2007年5月3日提交的美国申请No.60/915,884，以及2008年3月14日提交的美国申请No.61/036,537的优先权，上述每个申请在此以其全文引为参考。本申请涉及2006年9月22日提交的美国临时申请60/826,678、2005年5月6日提交的国际专利申请PCT/EP2005/004923的美国连续案，它指定为美国，并要求2004年5月6日提交的德国专利申请DE 102004022263、2006年11月6日提交的序列号为no.11/593,021的美国连续案、2006年11月6日提交的国际专利申请PCT/EP2006/068153和EP06/068155的优先权，后者指定为美国，并要求2005年11月4日提交的德国专利申请DE 102005052752、2006年11月6日提交的国际申请、以及2006年11月22日提交的美国临时申请60/867,019的优先权。每个上述申请在此引为参考。专利
本专利技术涉及分析方法(例如分析样品中的一种或多种被分析物)。专利技术背景可以进行分析以确定样品中一种或多种被分析物的存在。阵列可用于对样品进行多重分析(例如对于多种不同被分析物中的每种进行分析)。典型的阵列包括具有多个空间分隔开的测试区的基质，每个测试区具有不同的探针化合物，例如多核苷酸、抗体或蛋白。在使用中，将阵列与样品接触，然后样品与阵列的位点相互作用。对于每个位点来说，相互作用可以包括例如相应的被分析物与位点的探针化合物的结合，和/或相应的被分析物与探针化合物之间的化学反应。反应产生可检测的产物(例如沉淀)。相互作用的存在和程度取决于样品中是否存在相应的被分析物。典型情况下，相互作用通过光学方法检测(例如通过荧光)。例如，可以使用成像检测器(例如CCD)进行光学检测，成像检测器在至少一个(例如两个)维度上具有多个彼此分隔开的光敏元件(例如像素)。每个光敏元件被定位，以接收来自基质的不同空间位置的光。因此，由多个光敏元件同时检测到的光可以组合起来，形成基质的至少一个(例如两个)维度上的图像数据。可以对图像数据进行评估，以确定阵列的多个位点上相互作用的存在和/或程度。专利技术简述本专利技术涉及分析方法(例如分析样品中的多种被分析物)。在一种情况下，方法包括：将空间分隔的测试区的阵列与液体样品相接触，测试区布置在微流体装置的第一基质的内表面与第二基质的内表面之间，至少一个基质是挠性的，每个测试区含有探针化合物，探针化合物被构造用于参与靶被分析物的分析。在对应于测试区的位置减小第一和第二基质的内表面之间的距离，以及在相应位置处内表面之间的距离被减小的多个测试区中的每个测试区上，连续地光学测定相互作用的存在，每个测试区上的相互作用指示了样品中靶被分析物的存在。-->方法可以进一步包括，对于多个测试区中的每个，根据光学测定的相互作用确定相应被分析物的存在。对于至少某些测试区中的每个来说，多个测试区的每个上的相互作用，可以是被分析物与测试区的探针化合物之间的结合反应。光学测定可以包括使用零阶检测器检测来自每个测试区的光。使用零阶检测器检测来自每个测试区的光，可以基本上由使用零阶检测器检测光构成。对于第一和第二基质的内表面之间的距离被减小的多个位置中的每个位置来说，方法可以进一步包括在测试区进行光学测定的步骤之后，随后增加内表面之间的距离。减小距离可以包括在对应于测试区的位置连续地减小第一和第二基质的内表面之间的距离。在该实施方案中，对于第一和第二基质的内表面之间的距离被减小的多个位置中的每个位置来说，方法可以进一步包括在测试区光学测定结合的步骤之后，随后增加内表面之间的距离。光学测定可以包括连续地检测在相应位置处内表面之间的距离被减小的多个测试区中的每个上的相互作用。在一个实施方案中，光学检测包括同时检测来自不超过N个测试区的光，其中N≤5，或N≤3，或N＝1。或者，光学检测包括使用零阶检测器检测来自每个测试区的光。使用零阶检测器检测来自每个测试区的光，可以基本上由使用零阶检测器检测光构成。光学检测可以包括将微流体装置相对于用于进行光学测定的光学检测器的光学检测区进行平移。减小距离包括将微流体装置相对于对微流体装置施加压力的元件进行平移。将微流体装置相对于元件平移可以包括旋转元件的至少一部分。每个测试区可以是细长的，并限定了长轴。此外，微流体装置的平移可以包括沿着与多个测试区中的每个的长轴大体垂直的平移轴平移装置。例如，平移轴与多个测试区的长轴是垂直的，偏离在10°或以下，或甚至在5°或以下。此外，平移轴与大多数或甚至所有测试区的长轴可以是大体垂直的。在平移的步骤中，方法可以进一步包括读取微流体装置的参考码中包含的信息，并根据读取的信息确定多个测试区中的每个的性质。对于多个测试区中的每个来说，测定可以包括测定指示测试区何时位于用于进行光学检测的光学检测器的检测区中的值。此外，测定可以包括测定微流体装置的测试区的生理化学性质。例如，生理化学性质指示可以通过多个测试区中的每个测定的被分析物。此外，测定可以包括测定在使用前储存在微流体装置中的反应物的身份。沿着测试区的长轴的长度与沿着垂直维度上的宽度的比率，可以为至少2.5或甚至至少5。在接触步骤后，不用首先将测试区与不含样品的液体相接触，就可以进行光学检测步骤。光学测定可以包括激发并检测来自检测区的荧光。在另一种情况下，方法包括：将空间分隔的测试区的阵列与样品相接触，测试区布置在第一和第二表面之间，-->每个测试区含有探针化合物，探针化合物被构造用于参与相应被分析物的分析。在对应于测试区的位置减小内表面之间的距离，以及在相应位置处内表面之间的距离被减小的多个测试区中的每个测试区上，连续地光学测定分析的结果。对于多个测试区中的每个来说，方法可以进一步包括根据分析的结果确定相应被分析物的存在。对于至少某些测试区中的每个来说，分析的结果可以指示被分析物与测试区的探针化合物之间的结合反应。光学测定可以包括使用零阶检测器检测来自每个测试区的光。使用零阶检测器检测来自每个测试区的光，可以基本上由使用零阶检测器检测光构成。对于内表面之间的距离被减小的多个位置中的每个来说，方法可以进一步包括在测试区进行光学测定的步骤之后，随后增加内表面之间的距离。减小距离可以包括在对应于测试区的位置连续地减小内表面之间的距离。在另一种情况下，系统包含：微流体装置读数器，被构造用于接收微流体装置，微流体装置含有空间分隔的测试区的阵列，测试区布置在微流体装置的第一基质的内表面与第二基质的内表面之间，至少一个基质是挠性的，每个测试区含有探针化合物，探针化合物被构造用于参与靶被分析物的分析，光学检测器，被构造用于当至少一个测试区位于微流体装置的检测区内时，检测来自至少一个检测区的光，平移器，被构造用于将微流体装置和光学检测器的检测区中的至少一个相对于彼此进行平移，挤压器，被构造用于在对应于光学装置的检测区的位置上减小第一和第二基质的内表面之间的距离，处理器，被构造用于接收来自光学检测器的信号，信号指示了从测试区检测到的光。系统可以被构造用于连续地光学检测来自不超过N个测试区的光，其中N≤5，或N≤3，或N＝1。检测器可以是荧光检测器。在另本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于检测被分析物的装置，包括：盒，具有：包括入口和与入口流体连通的检测区的微流体通道；具有至少部分能变形的壁并与通道的检测区流体连通的微流体流通路径；以及盖子，具有：被构造用于密封入口，并形成包括入口、微流体通道和微流体流通路径的流体回路的密封元件。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2007-5-3 60/915,884;US 2008-3-14 61/036,5371.一种用于检测被分析物的装置，包括：盒，具有：包括入口和与入口流体连通的检测区的微流体通道；具有至少部分能变形的壁并与通道的检测区流体连通的微流体流通路径；以及盖子，具有：被构造用于密封入口，并形成包括入口、微流体通道和微流体流通路径的流体回路的密封元件。2.权利要求1的装置，其中盖子和盒被构造成在形成流体回路后不可逆地关闭。3.权利要求1的装置，其中盖子挠性连接在盒上。4.权利要求1的装置，其中盖子和盒被构造成在第一个相对位置咬合，使得盖子能够被除去，而在第二个相对位置咬合，使得盖子在形成流体回路后不可逆地关闭。5.权利要求1的装置，其中检测区被盒的至少一个表面和盖子的至少一个表面分界。6.权利要求5的装置，其中盖子包括覆盖在检测区上的透明薄膜。7.权利要求6的装置，其中盖子粘附在盒上。8.一种用于检测被分析物的系统，包括：盒，具有：包括入口和与入口流体连通的检测区的微流体通道；具有至少部分能变形的壁并与通道的检测区流体连通的微流体流通路径；以及盖子，具有：被构造用于密封入口，并形成包括入口、微流体通道和微流体流通路径的流体回路的密封元件；以及荧光检测器，包括：光源；获得10°或以上的立体角的聚光镜；以及获得10°或以上的立体角的物镜。9.权利要求8的系统，其中荧光检测器包括相机。10.权利要求8的系统，其中荧光检测器包括一种或多种可选择的发射滤光片。11.一种用于检测被分析物的方法，包括：将液体样品导入微流体通道，从而形成被通道封闭并被运输流体分界在第一个末端的连续液体段；形成流体回路，使得运输流体为液体段的第一个和第二个末端之间提供流体连通；以及经运输流体对液体段的第一个和第二个末端施加不同的压力。12.权利要求11的方法，其中一部分流体回路由能弹性变形的壁形成。13.权利要求12的方法，其中对液体段的第一个和第二个末端施加不同的压力包括挤压能弹性变形的壁。14.权利要求11的方法，还包括用第一荧光抗体和第二荧光抗体标记被分析物，其中第一和第二荧光抗体具有不同的发射波长。15.权利要求14的方法，其中检测被分析物包括在第一荧光抗体的发射波长处记录被分析物的第一个图像；在第二荧光抗体的发射波长处记录被分析物的第二个图像；以及比较第一和第二个图像。16.一种方法，包括：将液体样品导入微流体通道，从而形成被通道封闭并被运输流体分界在第一个末端的连续液体段，液体样品含有多种颗粒，形成流体回路，使得运输流体为液体段的第一个和第二个末端之间提供流体连通，通过经运输流体对液体段的第一个和第二个末端施加不同的压力，形成含有至少一部分液体样品和光学标记物的混合物，形成多种复合物，每种复合物含有多种颗粒中的一种以及至少一种光学标记物，以及检测在混合物的一部分中存在的复合物。17.权利要求16的方法，其中一部分流体回路由能弹性变形的壁形成。18.权利要求17的方法，其中对液体段的第一个和第二个末端施加不同的压力包括挤压能弹性变形的壁。19.权利要求16到18任一项的方法，还包括检测混合物的多个不同部分的每个中存在的复合物。20.权利要求19的方法，其中多个不同部分的总体积为导入到微流体装置中的液体样品的体积的至少90％。21.权利要求16到20任一项的方法，包括将总体积为V的液体样品导入微流体装置，其中混合物的总体积为体积V的至少90％。22.权利要求21的方法，其中混合物包含至少大约95％体积V的液体样品。23.权利要求20的方法，包括检测混合物总体积的至少10％中存在的复合物。24.权利要求16到23任一项的方法，其中颗粒是细胞，光学标记物是荧光标记物。25.权利要求11到24任一项的方法，其中微流体通道包含入口以及与入口流体连通的检测区，并且是微流体装置的微流体通道。26.权利要求11到25任一项的方法，在将液体样品导入微流体通道之前，还包括将液体样品导入毛细管的孔。27.权利要求26的方法，在将液体样品导入毛细管的孔和将液体样品导入微流体通道的步骤之间，还包括将毛细管与微流体装置相连，液体样品保留在毛细管中。28.权利要求11到27任一项的方法，还包括对指示液体样品的一部分中存在的复合物的量的信号进行光学检测，该液体样品的一部分存在于微流体装置的检测区中。29.权利要求11到28任一项的方法，其中将液体样品导入微流体通道，通过挤压能弹性变形的壁来进行。30.权利要求29的方法，其中挤压能弹性变形的壁，包括挤压第一部分流体回路，并且不用首先完全释放这种压力，将挤压的位点沿着流体回路移动足以进行导入步骤的量。31.权利要求11到30任一项的方法，包括首先完全释放压力，再进行指示该部分中存在的复合物的量的信号的光学检测步骤。32.权利要求11到31任一项的方法，其中液体样品是血液。33.权利要求26到32任一项的方法，其中毛细管孔含有凝结抑制剂。34.权利要求26到33任一项的方法，在将液体样品导入毛细管的孔和将至少一部分液体样品导入微流体通道的步骤之间，还包括制止液体样品流出毛细管。35.权利要求11到34任一项的方法，其中微流体通道的检测区不支持液体样品的毛细管流动。36.权利要求11到35任一项的方法，其中微流体通道的内表面的至少一部分是疏水的。37.权利要求25到36任一项的方法，还包括将微流体装置和光学检测器中的至少一个相对于彼此进行移动，然后对指示液体样品的不同部分中存在的复合物的量的光学信号进行检测。38.权利要求26到37任一项的方法，其中毛细管是首尾相接的毛细管，包括第一和第二个开口端，毛细管的孔总体积为V，并且导入至少一部分液体样品的步骤包括将至少90％的液体样品导入微流体通道。39.被构造用于进行权利要求11到38任一项的方法的装置。40.一种用于检测被分析物的装置，包括：盒，具有：微流体通...

【专利技术属性】
技术研发人员：托马斯凯泽，克劳斯彼得默比乌斯，托尔斯滕舒尔茨，托马斯乌利希，亚历山大范申克楚施魏因斯贝格，尤金埃曼特劳特，延斯图赫舍雷尔，
申请(专利权)人：科隆迪亚戈有限公司，
类型：发明
国别省市：DE[德国]