腈水解酶突变体及其在饲料中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种腈水解酶突变体及其在饲料中的应用。蓖麻饼粕是蓖麻籽榨油后的残渣，含有丰富的蛋白质及纤维素，由于其中含有蓖麻碱等剧毒物质，会对禽畜造成巨大危害，使其在饲料、肥料领域的应用受到限制。因此本发明专利技术提出了将腈水解酶应用于降解蓖麻饼粕中的蓖麻碱，并对Streptomyces lunaelactis来源的腈水解酶第165、190和221号位点进行单点突变或组合突变，获得的最优腈水解酶突变体其比酶活是野生型腈水解酶的840倍，能够在24h内水解大部分蓖麻碱，解决了蓖麻饼粕作为饲料添加面临的挑战，具有较大的工业应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程领域，具体涉及一种腈水解酶突变体，腈水解酶及其突变体在催化蓖麻碱降解中的应用。

技术介绍

1、蓖麻是世界十大油料作物之一，蓖麻饼粕是蓖麻籽榨油后产生的残渣，占比约为50％。蓖麻饼粕具有丰富的营养物质，尤其是蛋白质最为丰富占比大约35％，这些蛋白质除此之外还含有钙磷和钾等矿物元素。因此蓖麻饼粕作为肥料或饲料添加具有很大的应用前景。我国作为全世界种植蓖麻作物面积最广的国家之一，工业榨油必定会产生大量的蓖麻饼粕，如果这些饼粕能够广泛应用于饲料和肥料领域，将会产生巨大的经济效益。

2、由于蓖麻饼粕中含有蓖麻碱(n-甲基-3-氰基-4-甲氧基-2-吡啶酮)、蓖麻毒蛋白和变应原等有毒物质，使其在饲料领域的应用受到了极大限制，这些物质会对禽畜造成伤害严重时可能会致死。因此如何去除饼粕中的有毒物质是目前的主要研究方向，蓖麻毒蛋白和变应原会在高温下变性失活从而失去毒性，一般在加热榨取的工艺后含量几乎为零。而蓖麻碱相对于毒蛋白来说更加稳定，因此也更加难以去除，目前蓖麻碱的去除有物理法、化学法和生物法。

3、物理法和化学法去除蓖麻碱本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.腈水解酶突变体，其特征在于，所述腈水解酶突变体由Streptomyces lunaelactis来源的腈水解酶其氨基酸序列第165、190和221号进行单点突变或多点联合突变获得。

2.如权利要求1所述的腈水解酶突变体，其特征在于，所述Streptomyces lunaelactis来源的腈水解酶其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.如权利要求2所述的腈水解酶突变体，其特征在于，所述腈水解酶突变体是由SEQ IDNO.2所示的氨基酸序列第165位色氨酸突变为甘氨酸，和/或第190位丝氨酸突变为色氨酸，和/或第221位缬氨酸突变为酪氨酸获得的。

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【技术特征摘要】

1.腈水解酶突变体，其特征在于，所述腈水解酶突变体由streptomyces lunaelactis来源的腈水解酶其氨基酸序列第165、190和221号进行单点突变或多点联合突变获得。

2.如权利要求1所述的腈水解酶突变体，其特征在于，所述streptomyces lunaelactis来源的腈水解酶其氨基酸序列如seq id no.2所示。

3.如权利要求2所述的腈水解酶突变体，其特征在于，所述腈水解酶突变体是由seq idno.2所示的氨基酸序列第165位色氨酸突变为甘氨酸，和/或第190位丝氨酸突变为色氨酸，和/或第221位缬氨酸突变为酪氨酸获得的。

4.如权利要求1所述的腈水解酶突变体，其特征在于，所述腈水解酶突变体的氨基酸序列为seq id no.4、seq id no.6、seq id no.8中的一种。

5.编码权利要求1～4中任一所述的腈水解酶突变体的基因。

6.含有权利要求5所述的腈水解酶突变体编码基因的重组载体。

7.含有权利要求5所述的腈水解酶突变体编码基因的基因工程菌。

8.来源于streptomyces lunaelactis或streptomyces hokutonensis的腈水解...

【专利技术属性】
技术研发人员：薛亚平，韦克衍，沈其，郑裕国，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：