本发明专利技术公开了一种菌剂与酶复合微生态制剂的生产方法，其根据各个菌种的作用原理和特点，采取了科学组合，并且添加了酶制剂和酸化剂，使产品中的微生物能够在发酵饲料及动物体内快速生长占据优势，减少了其杂菌的生长机会。其成分包括：枯草芽孢杆菌，植物乳杆菌，产朊假丝酵母，嗜酸乳杆菌，蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶、半乳糖苷酶、果胶酶、柠檬酸，本产品各个菌种均采取液态深层发酵培养，保证了产品的无污染性。液态菌剂保证产品菌落数超过１亿，无其他杂菌污染；固态菌剂保证产品菌落数超过１０亿，杂菌数占有效菌数比例不超过万分之一。本发明专利技术中含有芽孢杆菌、乳酸菌和酵母菌，既可适用于制作青黄贮饲料、发酵饲料、饲料浸泡等工艺，又可直接添加于饲料中饲喂，可提高反刍动物、家禽类、猪、水产类及特种动物的生长性能。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种菌和酶的复合微生物制剂。
技术介绍
抗生素作为畜禽的饲用添加剂，由于在畜禽产品中的残留和抗药性等问题，许 多国家已严格限制甚至禁止使用。为了寻求替代物，世界卫生组织(WHO)和联合国粮 农组织(FAO)以及美、日等国极为重视抗生素替代物的研制。我国也非常重视这方面的 研究，制订了 "饲料添加剂品种选用目录"等规范文件。目前，美、日、欧洲、中南美 洲、东南亚等地均在使用饲用活菌剂，并证实对畜禽及其产品无害、无残留、无污染、 无耐药性，具有替代抗生素的发展前景。我国对此报道也很多，其主要作用原理和效果 主要有以下几个方面( — )补充动物肠道正常菌群。动物微生态制剂中的有益菌是畜禽肠道内的"原 藉菌"，是肠道内正常的生理性细菌，这些"原藉菌"均为专性厌氧或兼性厌氧菌。畜 禽服用动物微生态制剂后，肠道内的正常菌群便得到补充，"原藉菌"在数量上便占绝 对优势，通过生存竞争排斥，生长代谢造成厌氧环境，就大大抑制了那些需氧性致病菌 的生长繁殖，其发酵结果是产生大量乳酸、乙酸，降低肠道内pH值，使致病菌难以生 存，从而有效防止菌群失调症的发生。 ( 二 )提高机体免疫力。动物微生态制剂中的有益菌均是良好的免疫激活剂， 它们剌激肠道黏膜固有层中淋巴细胞的转化，使之产生体液免疫和细胞免疫，增强机体 免疫力，及时杀灭侵人体内的致病菌，消除体内"病变"细胞，从而防止疾病发生和恶 化。(三)协助机体清除毒素及代谢产物。动物微生态制剂中的有益菌在肠道内生长 能形成致密性膜菌群，形成生物屏障阻止毒素和废物的吸收。如双歧杆菌能分泌过氧化 氢等物质直接降解细菌毒素及代谢产物，它与乳酸杆菌在肠道内繁殖可产生大量乳酸和 乙酸剌激胃肠蠕动，也有利于毒素和废物的排泄，从而减轻肝脏负担，防止肝脏疾病的 发生和发展。(四)补充机体营养成分。动物微生态制剂中的有益菌在肠道内代谢所产生的多 种酶制剂、氨基酸、维生素以及其他一些代谢产物，可加快分解营养物质或直接作为营 养物质被畜禽机体吸收利用，促进畜禽的生长发育和增重。 此项技术存在的不足 1、农业部在2003年至2008年多次颁布了 "饲料添加剂品种目录"及其补充修 订版，其中对饲料用微生物的菌种做出了明确的规定，防止病原菌或潜在致病菌对饲料 及畜禽构成威胁。但是国内大多没有按照此项要求规定的菌种范围选用菌种，因此存在 着潜在的致病危险。 2、大多数微生态制剂中菌种选用没有遵循互补原则，在上述的微生态制剂几大 功能中，并非是单个菌株或一个同类的菌群即可起到效果，应需要几种不同类微生物菌的协同作用才能起到上述效果。 3、国内大多微生态制剂生产采用固体发酵等粗放工艺，生产的产品往往目的菌 群和污染的杂菌共同存在，严重的影响了产品的使用效果。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供，该微生态制剂添加在饲料中，可减少杂菌的生长，保证产品无污染，使产品中的微生物能够在发酵饲 料及动物体内快速生长。 本专利技术的技术方案是 —种菌剂与酶复合微生态制剂的生产方法，成分包括枯草芽孢杆菌 (CICC10088)，植物乳杆菌(CICC6026)，产朊假丝酵母(CICC1801)，嗜酸乳杆菌 (CICC6005)，蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶、半乳糖苷酶、果胶 酶、拧檬酸； a、液体菌剂与酶复合微生态制剂，把枯草芽孢杆菌植物乳杆菌嗜酸乳杆 菌产朊假丝酵母的发酵液液体复合酶制剂柠檬酸按照i:2:2:i:3:i的重 量比混合制成； B、固态菌剂与酶复合微生态制剂，先把各菌剂的液态发酵剂加入10%的稻 糠，过滤后烘干，控制烘干温度30-5(TC，水分要求在4-8%，混合加入各种固体酶制剂、柠檬酸和稻糠制成，重量比为粉状枯草芽孢杆菌植物乳杆菌嗜酸乳杆菌产朊 假丝酵母固体复合酶制剂柠檬酸o.5 :2:2:2:2: 1.5。 所述复合酶的制备A、液体复合酶制剂蛋白酶4000u/ml、淀粉酶1000u/ml、纤维素酶5000u/ml、 木聚糖酶10000u/ml、甘露聚糖酶1000u/ml、半乳糖苷酶1000u/ml、果胶酶1000u/ml，剩 余为水； 液体复合酶的制备，通过液态发酵生产液体各单酶种，把各单酶种根据酶活需 求按比例混合制，各种酶的比例添加量由各酶种的单酶酶活决定；B、固体复合酶制剂蛋白酶4000u/ml、淀粉酶1000u/ml、纤维素酶5000u/ml、 木聚糖酶10000u/ml、甘露聚糖酶1000u/ml、半乳糖苷酶1000u/ml、果胶酶1000u/ml，剩余为稻糠填充料； 固体复合酶的制备，通过液态发酵生产固体各单酶种，把各单酶种根据酶活需 求按比例混合制，各种酶的比例添加量由各酶种的单酶酶活决定。 所述枯草芽孢杆菌培养 (1)枯草芽孢杆菌分离培养 营养琼脂培养基蛋白胨0.5%、牛肉膏3%、氯化钠0.5%、琼脂粉1.5%、 pH 值7.0-7.2、 37。C培养24-48h ; (2)斜面培养 培养基牛肉膏1%、蛋白胨1%、氯化钠0.5%、 pH值7.0、 37"培养24-48h ; (3)种子培养 培养基葡萄糖5%、牛肉膏1%、蛋白胨1%、氯化钠0.5%、 pH值7.0;500ml三角瓶装入100ml液体种子培养基，12rC灭菌30min，接入以上培养好的菌种一接种环，温度37t:，在转速为210r/min摇床上震荡培养16h ; (4)发酵培养 培养基高温豆饼粉2.2%、玉米浆0.15%、玉米淀粉0.85%、磷酸氢二钾0.3%、磷酸二氢钾0.15%、 pH值7.5(消前)；温度37t:，通风量为1 : 0.8条件下培养36-48h，菌落数超过10亿。 所述乳酸菌培养 (l)乳酸菌分离培养 MRS培养基制备葡萄糖10g，胰蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母提取物5g，柠檬酸二铵2g，磷酸氢二钾2g， MgS04 71120 0.58g， MnS04 20 0.25g，吐温80为lmL，蒸馏水1L，琼脂20g。用醋酸调节pH到6.8， 12rC高压灭菌20min， 37。C培养24-48h ; (2)斜面培养 MRS培养基制备葡萄糖10g，胰蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母提取物5g，柠檬酸二铵2g，磷酸氢二钾2g， MgS04 71120 0.58g， MnS04 20 0.25g，吐温80为lmL，蒸馏水1L，琼脂20g。用醋酸调节pH到6.8， 12rC高压灭菌20min， 37。C培养24-48h ; (3)种子培养 培养基脱脂乳粉调整固形物含量11%左右，加蔗糖6%，玉米浆10%， 37°C培养24-48h ; (4)发酵培养 培养基脱脂乳粉调整固形物含量11%左右，加蔗糖6%左右，玉米浆10%，磷酸氢二钾0.3%、磷酸二氢钾0.15%、植物乳杆菌pH值6.5(消前)，嗜酸乳杆菌pH值5.8(两个菌种其他部分培养工艺相同)，温度37t:，厌氧培养36-48h，菌落数超过10亿。 所述酵母菌培养 (1)酵母菌离培养 培养基将发酵啤酒的原料(未加酒花)，稀释至12柏林，加琼脂1.5%，溶化后分装，115。C灭菌30分钟，28。C培养24-48h ; (2)斜面培养培养 平板培养基加1.5-2%的琼脂28-3(TC培养3-4天； (3)发酵培养 培养本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种菌剂与酶复合微生态制剂的生产方法，成分包括：枯草芽孢杆菌，植物乳杆菌，产朊假丝酵母，嗜酸乳杆菌，蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶、半乳糖苷酶、果胶酶、柠檬酸，其特征是： Ａ、液体菌剂与酶复合微生态制剂，把枯草芽孢杆菌∶植物乳杆菌∶嗜酸乳杆菌∶产朊假丝酵母的发酵液∶液体复合酶制剂∶柠檬酸按照１∶２∶２∶１∶３∶１的重量比混合制成； Ｂ、固态菌剂与酶复合微生态制剂，先把各菌剂的液态发酵剂加入１０％的稻糠，过滤后烘干，混合加入各种固体酶制剂、柠檬酸和稻糠制成，重量比为粉状枯草芽孢杆菌∶植物乳杆菌∶嗜酸乳杆菌∶产朊假丝酵母∶固体复合酶制剂∶柠檬酸０．５∶２∶２∶２∶２∶１．５。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：何勇，薛立新，李树俊，李军，邓福斌，曲海军，付振山，
申请(专利权)人：肇东市日成酶制剂有限公司，
类型：发明
国别省市：23[]
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