【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及海水鱼类染色体操作技术,具体地说是一种我国重要海水养殖对象-牙鲆四倍体的诱导方法。
技术介绍
受精卵第一次卵裂的抑制是产生四倍体或与精子灭活技术结合产生同质雌核发育二倍体的关键技术。虽然日本学者曾采用静水压法进行牙鲆受精卵第一次卵裂的抑制与精子灭活技术结合产生了牙鲆同质雌核发育二倍体,但静水压法需要用特殊的仪器(水静压仪),成本较高,而我们采用的是低温休克法,方法简单易行,适于应用;另外,采用上述方法,其成活率虽然高一些,但诱导率却并不高,为2.7-5.3%。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种牙鲆受精卵第一次卵裂抑制的方法,根据我国的国情和应用的可行性,我们一开始除了采用自行设计改造的水静压机进行诱导外,也一直进行了低成本的低温法进行牙鲆受精卵第一次卵裂的抑制研究,并获得了一定的诱导率。本专利技术的技术方案是首先观察一定培育水温下第一次卵裂的发生时间,由此确定处理的最佳效应期范围,这也是第一次卵裂有效抑制的关键点。然后通过多次的梯度实验和重复实验,最终确定了处理时刻区间。依此为基础,又进行了处理温度和处理时间的筛选实验,获得了各自的范围,采用筛选出各处理因子的适宜条件进行重复诱导实验,最终获得了第一次卵裂抑制的胚胎-四倍体胚胎。诱导的具体方法如下选取发育正常的牙鲆雌鱼和雄鱼,分别挤取成熟卵、精液,行人工授精,卵启动75-100min,置于0-5℃,30-55min,抑制激活卵子的第一次卵裂,使染色体组加倍,产生四倍体,将牙鲆四倍体诱导组置于正常海水中培育,发育至原肠期时,取其100粒左右进行染色体制片,以检测其诱导效果。所述牙鲆受精卵第一次 ...
【技术保护点】
一种牙鲆受精卵第一次卵裂抑制的方法,其特征在于诱导方法如下:选取发育正常的牙鲆雌鱼和雄鱼,分别挤取成熟卵、精液,行人工授精,卵启动75-100min,置于0-5℃,30-55min,抑制激的卵子的第一次卵裂,使染色体组加倍,产生四倍体,将牙鲆四倍体诱导组置于正常海水中培育,发育至原肠期时,取样进行染色体制片,以获得诱导效果。
【技术特征摘要】
1.一种牙鲆受精卵第一次卵裂抑制的方法,其特征在于诱导方法如下选取发育正常的牙鲆雌鱼和雄鱼,分别挤取成熟卵、精液,行人工授精,卵启动75-100min,置于0-5℃,30-55min,抑制激的卵子的第一次卵裂,使染色体组加倍,产...
【专利技术属性】
技术研发人员:尤锋,张培军,王新成,许建和,
申请(专利权)人:中国科学院海洋研究所,
类型:发明
国别省市:21[中国|辽宁]