本发明专利技术涉及天然药物领域，具体涉及６－姜烯酚治疗宫颈癌、白血病和乳腺癌中的用途。在对６－姜烯酚药理活性的研究中发现，尽管６－姜烯酚对多种肿瘤都显示有治疗活性，但不同的肿瘤活性差异很大，在众多的抑制肿瘤试验中，６－姜烯酚对宫颈癌、乳腺癌和白血病的疗效最好，对这三种癌症的治疗效果明显好于对其它癌症的治疗效果。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及天然药物领域，具体涉及6-姜烯酚在治疗宫颈癌、白血病和乳腺癌中的用途。
技术介绍
生姜及干姜分别为姜科植物姜Zingiber officinale Rose.的新鲜根茎及干燥根茎，均为常用中药。姜的临床应用相当广泛，国外对其关注程度亦较高。近年来，针对姜及其主要活性成分的化学和药理学报道较为丰富。6-姜烯酚(6-shogaol)是姜中的挥发成分之一，其分子式为(:17112403，分子量为276. 37，为黄色粉状物或结晶物，易溶于乙醇，难溶于水，其化学结构式如下H3C' 文献报道6-姜烯酚具有强心、抗血小板或抗血栓、舒縮血管等生物活性。近年来，生姜中活性强的姜烯酚类成分的抗肿瘤作用日渐受到关注。最近，有国外文献报道6-姜烯酚对人肺癌A549细胞有抗肿瘤活性，[6-Shogaol， an Active Constituent ofDietaryGinger， Induces Autophagy by Inhibiting the AKT/mTOR Pathway in HumanNon-S腿llCell Lung Cancer A549 Cells. J Agric Food Chem. 2009 Oct 2.]，但其活性不强，抑制A549细胞生长的IC50为55. 4 ii M ;还有文献报导6-姜烯酚对人结肠癌COLO205细胞有活性[6_Shogaol induces即optosis in human colorectal carcinoma cellsvia R0S production, caspaseactivation， and GADD 153 expression. Mol Nutr FoodRes. 2008,52,527-37.]，其活性也很弱，抑制COLO 205细胞生长的IC50 > 60 y M。本专利技术公开了 6-姜烯酚的抗宫颈癌、白血病和乳腺癌的作用，即6-姜烯酚可用于
技术实现思路
制备抗宫颈癌、乳腺癌和白血病的药物，并且其药效优异。 专利技术人在对6-姜烯酚药理活性的研究中发现，尽管6-姜烯酚对多种肿瘤都显示有治疗活性，但不同的肿瘤活性差异很大，在众多的抑制肿瘤试验中，e-姜烯酚对宫颈癌、乳腺癌和白血病的疗效最好，对这三种癌症的治疗效果明显好于对其它癌症的治疗效果。专利技术人分别对人肝癌细胞S匪C-7721、人乳腺癌MCF-7、人宫颈癌HeLa、人胰腺癌Aspc-1、人急性早幼粒白血病细胞HL-60、人鼻咽癌CNE2、前列腺癌PC-3及文献报道的人肺癌A549、人结肠癌HCT15、C0L0 205等肿瘤细胞进行体外MTT筛选，发现其对人宫颈癌HeLa细胞、人急性早幼粒白血病HL-60细胞和人乳腺癌MCF-7细胞的抗增殖活性强并呈良好的时效与量效关系，对A549、HCT15和C0L0 205的活性弱，跟文献报道一致；同时将其作用正常肝细胞L-02，未发现毒性反应。 以下结合实施例对6-姜烯酚的药理活性做进一步阐述。附图说明 图1为6-姜烯酚作用不同细胞株的MTT检测的IC5。结果 图2为不同浓度6-姜烯酚作用不同细胞株24小时后的抑制生长效果 图3为不同浓度6-姜烯酚作用不同细胞株72小时后的抑制生长效果具体实施例方式实施例1 6-姜烯酚的体外抗肿瘤作用 取对数生长期的细胞，根据细胞的大小接种4 10 X 103个于96孔板上，待生长24小时后，弃上清，然后按以下分组给药肿瘤细胞设不加药组和加药组(浓度1 25iiM)，每组设5或6个复孔，培养24或72小时，弃上清，加入100 ill含0. 5mg/ml的MTT (四氮唑盐)无血清培养液培养4小时，加入lOOiU DMSO(二甲亚砜)，放置于微型振荡仪上振荡10min，再置于酶标仪上570nm处检测OD值。正常人细胞系L_02做毒性评价，每次实验重复3次。结果见表l和图1 图2。 表l 6-姜烯酚作用不同细胞株的ICs。结果<table>table see original document page 4</column></row><table> 从表1可看出6-姜烯酚对A549、C0L0 205和HCT15细胞株的24小时作用的IC5。> 50 ii M， 72小时作用后IC5。 50 ii M，说明6-姜烯酚对A549、 COLO 205和HCT15的活性比较弱；同时也可以得出6-姜烯酚作用MCF-7、 HL-60和HeLa细胞24小时后的IC5。均在10 ii M左右，72小时后的IC5。均接近5 ii M，说明对MCF-7、HL-60和HeLa细胞的抑制活性好；6_姜烯酚对Aspc-1 、 SMMC-7721的活性也明显不如对MCF-7、 HL-60和HeLa的活性。 图l为在不同化合物浓度下(1，5，10，15，20，25iiM)对MCF-7、 HeLa、 Aspc-l、S匪C-7721及L-02细胞株作用24小时后的生长抑制情况，结果提示，随着化合物的浓度增加，与相应不加化合物的对照组比较，MCF-7、HeLa、HL-60、Aspc-l和SMMC-7721细胞增殖活性分别下降，提示该化合物呈浓度依赖性抑制肿瘤细胞细胞增殖；而不抑制正常肝细胞系L-02细胞的增殖。 图2为在不同化合物浓度下(1，5，10，15，20，25iiM)对MCF-7、 HeLa、 HL_60、Aspc-l、S匪C-7721及L-02细胞株作用72小时后的生长抑制情况，可得出72小时后，相应浓度作用肿瘤细胞株的抑制率增加并不抑制正常肝细胞L-02的生长。综合上述实验结果，提示该化合物具有良好的时效和量效关系，同时对正常细胞具有低毒的特性。 实施例2 细胞形态学观察和AO(吖啶橙)染色 肿瘤细胞设不加药组和加药组(5iiM)。细胞经作用不同时间(0， 2， 4， 8， 12， 24小时)后经过4%多聚甲醛固定30min后，0. 01M的PBS洗涤2_3次，A0染色10min，荧光显微镜下观察细胞核形态。 发现阴性处理组的细胞形态正常，经过染色试剂染色后细胞核完整，经过6-姜烯酚处理后的许多细胞形态变圆或皱縮，在荧光显微镜下用蓝色光激发发现细胞核固縮。 AO荧光染色后，典型的凋亡细胞胞核致密浓染，呈块状或颗粒状黄绿色荧光；正常细胞均匀淡染；死细胞不染色。实验结果显示阴性对照组细胞细胞核均匀淡染，呈黄绿色荧光，偶尔有几个因自然凋亡导致而被染成致密浓染的凋亡细胞；e-姜烯酚处理组随作用时间延长，被染成呈块状或颗粒状致密浓染的细胞数目明显增加(见图3)，结果表明化合物处理后的细胞部分凋亡，说明6-姜烯酚抑制肿瘤细胞增殖可能跟细胞凋亡相关。 实施例3 流式细胞仪检测细胞凋亡 实验设阴性对照组(即不加药物处理组)和6-姜烯酚处理组(15iiM)。细胞经6-姜烯酚作用12小时后，用不含EDTA的0. 1%胰酶消化，含血清培养基终止消化后，收集到10ml的玻璃离心管中于500rpm(或100g)离心5min，弃上清，用0. 01M的PBS于500rpm(或100g)离心5min洗涤2次，然后按Annexin V/PI双染试剂盒说明书添加结合液体并染色后进行流式细胞仪(Becto本文档来自技高网...
【技术保护点】
６－姜烯酚在制备治疗和／或预防肿瘤疾病的药物中的应用，其特征在于：所述肿瘤疾病为人宫颈癌、乳腺癌或白血病。
【技术特征摘要】
6-姜烯酚在制备治疗和/或预防肿瘤疾病的药物中的应用...
【专利技术属性】
技术研发人员：齐炼文，李萍，刘慧，成小兰，彭咏波，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]
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