一种利用内酯酶制备光学纯２－羟基－４－苯基丁酸的方法技术

本发明专利技术公开了一种化学－酶法制备光学纯２－羟基－４－苯基丁酸的新方法。该方法利用表达Ｆｕｓａｒｉｕｍ？ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ内酯酶基因的重组大肠杆菌细胞在优化条件下发酵产酶，然后以一锅煮的方式选择性催化水解４－苯基－２－羟基－４－丁内酯的非对映异构体，再将所需的构型在常温常压Ｐｄ／Ｃ催化氢化作用下，生成目标化合物。其中（Ｒ）－？２－羟基－４－苯基丁酸的对映体过量值达９８％，摩尔转化率达３６％，（Ｓ）－２－羟基－４－苯基丁酸的对映体过量值达９９％以上，摩尔转化率达４６％。本发明专利技术所述的生物催化剂及其化学－酶法工艺不仅具有较好的催化效果，而且操作简便、安全，成本低廉，产物容易纯化，对环境友好，具有工业开发应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物化工领域，涉及内酯水解酶用于生产光学纯2-羟基-4-苯基丁酸 的方法。
技术介绍
小分子羟基酸，例如乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸和葡萄糖酸等，在其分子结构中 含有羟基以及羧基这两种功能基团，是化学合成中非常有用的中间体，是一类非常重要的 有机酸，在生物体内具有特殊生理功能，而在食品/饲料工业上又是一类非常有用的功能 添加齐U。一些非天然的羟基酸，特别是具有光学活性的手性羟基酸，还可以作为"结构砌块" 用于许多天然产物和药物的化学合成。 2-羟基-4-苯基丁酸作为a -羟基酸家族的重要一员，是合成众多"普利"类血管 紧张肽转化酶抑制剂(ACEI)的关键手性中间体。这些酶抑制剂切断肾素-血管紧张素-醛 固酮系统，阻断血管紧张素II的产生而扩张血管、降低血压，是一类安全有效的降压药。作 为合成切块之一，手性羟基-4-苯基丁酸及其乙酯可与不同的氨基部分形成共价键，合成 如依拉普利、赖诺普利等药物。由于手性2-羟基-4-苯基丁酸及其乙酯在该类药物合成中 的重要价值以及原有的专利保护即将过期，吸引了许多研究人员的研究兴趣，并有多种制 备方法被报道。 目前，光学纯2-羟基-4-本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用内酯酶制备光学纯２－羟基－４－苯基丁酸的方法，其特征是包括如下步骤：１）采用Ｆｕｓａｒｉｕｍｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ内酯水解酶水解４－苯基－２－羟基－４－丁内酯（１）将保藏号为ＣＧＭＣＣ１４９４表达Ｆｕｓａｒｉｕｍｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ内酯水解酶基因的重组大肠杆菌ＪＭ１０９（ＤＥ３）或ＢＬ２１（ＤＥ３），在发酵培养基中进行扩增培养，离心洗涤得到静息细胞；（２）将（１）收获的静息细胞悬浮于ｐＨ为６．０～７．０的磷酸钾缓冲液中，加入４－苯基－２－羟基－４－丁内酯，在２５～４０℃反应０．５～８ｈ，然后采用常规的分离方法从反应混合物中收集光学纯的（２Ｓ）－４－苯基－２－羟基－４－丁内酯、（２...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：许建和，陈兵，
申请(专利权)人：华东理工大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]