蔓生白薇苷Ｃ在制备治疗疟疾药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供了蔓生白薇苷Ｃ在制备治疗疟疾药物中的应用，蔓生白薇苷Ｃ的结构式如下：并提供了含有所述的蔓生白薇苷Ｃ和药学上可以接受的载体组成的药物组合物。所述活性成分蔓生白薇苷Ｃ在药物组合物中的重量含量为５－９５％。通过蔓生白薇苷Ｃ与Ｆａｌｃｉｐａｉｎ－２蛋白酶结合活性测定等试验，结果证明蔓生白薇苷Ｃ与ＦＰ－２蛋白有明显的结合，对ＦＰ－２酶有较高的抑制活性。蔓生白薇苷Ｃ体外抗疟活性测定，结果显示，蔓生白薇苷Ｃ有较好的体外抗疟原虫活性。因此，可用于制备治疗疟疾的药物，有较大的临床应用价值。

Cynanversicoside C in preparation for the application of malaria drugs

The present invention provides cynanversicoside C in preparation for the application of malaria drugs in the structure of cynanversicoside C are as follows: the pharmaceutical composition comprising the carrier of cynanversicoside C and pharmaceutically acceptable and provide. The active ingredient of cynanversicoside C weight content in pharmaceutical compositions for 5 - 95%. Through cynanversicoside C and Falcipain2 protease activity were combined with the test results, cynanversicoside C and FP2 protein was combined with higher inhibitory activity of FP2 enzyme. Determination of the antimalarial activity of cynanversicoside C in vitro showed that cynanversicoside C has better anti Plasmodium activity in vitro. Therefore, it can be used in the preparation of drugs for the treatment of malaria, and has great clinical value.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及药物，具体涉及化合物蔓生白薇苷c在制备治疗疟疾药物中的应用， 尤其涉及化合物蔓生白薇苷c在制备治疗由疟原虫引起的疟疾药物中的应用。
技术介绍
疟疾是地球上发生最频繁的寄生虫病，是由按蚊进行传播、具有潜在致命危险的 疾病。每年全球有5亿左右的疟疾病例，导致超过100万人死亡，绝大部分发生在非洲。世 界卫生组织指出疟疾平均每30秒杀死一个5岁以下的儿童。疟疾由疟原虫引起。带有疟 原虫的雌按蚊叮咬人体后，将疟原虫注入人体，经10 20天会发生典型的疟疾临床症状， 可分为四期发冷期、发热期、出汗期和间歇期。疟疾的反复发作后，病人会出现贫血、肝脾 肿大，甚至出现脑型、超高热型、厥冷型和胃肠型等凶险症状，甚至危及生命。随着已有抗疟 药物的耐药性的不断增加，疟疾的发病率日益增加，亟待具有新型治疗作用的抗疟药物的 发现。 红细胞内期的疟原虫在其酸性食物泡内水解宿主的血红蛋白以获得自身生命所 需的能量和氨基酸。生物学研究表明，在疟原虫的食物泡内包涵一系列的水解酶，如天冬氨 酸蛋白酶(plasm印sins)，半胱氨酸蛋白酶(falcipains)，和金属蛋白酶(falcilysins)。 这些酶已成为疟疾化学治疗的潜在的靶标。 半胱氨酸蛋白酶是MT约为21000 30000的蛋白质，在pH 4 6. 5时具有最高水 解活性，它的活性部位具有半胱氨酸残基。疟原虫的半胱氨酸蛋白酶属于木瓜蛋白酶家 族。已知的疟原虫半胱氨酸蛋白酶有四个亚型，falcipain-l(疟原虫半胱氨酸蛋白酶-l)， falcipain-2A (疟原虫半胱氨酸蛋白酶-2A) ， falcipain-2B (疟原虫半胱氨酸蛋白酶-2B)， falcipain-3(疟原虫半胱氨酸蛋白酶-3)。 Falcipain 1是第一个表达得到的疟原虫半胱 氨酸蛋白酶，其生物学研究表明，它对疟原虫的无性生殖阶段并无影响，但能显著的影响卵 囊的功能。Falcipain-2A， falcipain-2B具有97%的同源性，仅在氨基酸序列的7位有所 不同。通过寡核苷酸探针的监测发现，falcipain-2B mRNA的表达水平比falcipain-2A低。 然而falcipain-2A和falcipain-2B在症原虫营养体晚期其表达的时间依赖性和峰值极为 相似，这表明两种不同的亚型具有相似的生物学功能。Falcipain-3与falcipain-2在催化 域有66. 6%的同源性，但是它们表达的阶段有所不同。Falcipain-2在营养体阶段表达达 到最高峰，而falcipain-3在更为成熟的疟原虫阶段表达达到高峰。在这几种亚型中，对于 falcipain-2的研究最多，因此其抑制剂的开发亦受到更为广泛的关注。 中医中药治疗疟疾已经有很长的历史，比如在《素问*剌虐论》中就提出了用针灸 预防治疗疟疾，在中草药方面，除了闻名世界的青蒿外，威灵仙、水蜈蚣、鸦胆子、常山、鹅不 食草、槟榔、翻白草、石龙芮等也在民间用来治疗疟疾。从中药青蒿中发现的活性化合物青 蒿素用于治疗疟疾取得了很好的效果，广泛用于临床，因此从中药中寻找具有抗虐活性的 化合物意义重大。本专利技术人通过多年的基础研究积累了 2000多种，并建立了天然产物库， 通过对库中化合物进行筛选，发现了蔓生白薇苷C具有抗疟作用。 白薇为萝摩科鹅绒藤属植物直立白薇、蔓生白薇的根，中医理论中白薇具有清热 凉血、利尿通淋、解毒疗疮的功效，用于阴虚发热、骨蒸劳热、产后血虚发热等症。尚未见白 薇中的化学成分具有抗疟作用的报道。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于提研究设计蔓生白薇苷C在制备治疗疟疾药物 中的应用。 本专利技术提供了蔓生白薇苷C在制备治疗疟疾药物中的应用。 蔓生白薇苷C的结构式如下 蔓生白薇苷c系从直立白薇、蔓生白薇中分离得到的化合物。 通过蔓生白薇苷C与Falcipain-2蛋白酶结合活性测定等试验，结果证明蔓生白 薇苷C与FP-2蛋白有明显的结合，对FP-2酶有较高的抑制活性。蔓生白薇苷C体外抗疟 活性测定，结果显示，蔓生白薇苷C有较好的体外抗疟原虫活性。因此，可用于制备治疗疟 疾的药物 本专利技术的另一目的是提供以蔓生白薇苷C为活性成分，用于制备治疗疟疾的药物 组合物，尤其用于制备治疗由疟原虫引起的疟疾的药物组合物。 本专利技术所述药物组合物含有治疗有效量的蔓生白薇苷C为活性成分，以及含有一种或多种药学上可接受的载体。其中活性成分在药物组合物中的重量为5-95%。 所述药学上可接受的载体是指药学领域常规的药物载体，例如稀释剂、赋形剂如水灯；填充剂如淀粉、蔗糖等；粘合剂如明胶、聚乙烯吡咯烷酮；湿润剂如甘油；崩解剂如碳酸钙、碳酸氢钠；吸收促进剂如季铵化合物；表面活性剂如十六烷醇；吸附载体如高岭土和皂粘土；润滑剂如滑石粉、硬脂酸钙、聚乙二醇等、另外还可以在组合物中加入其它辅剂如香味剂、甜味剂等。 本专利技术化合物可以组合物的形式通过口服、鼻吸入、直肠或肠胃外给药的方式施 用于需要这种治疗的患者。用于口服时，可将其职称常规的固体制剂如片剂、颗粒剂、胶囊 等或制成液体制剂如水或油悬浮剂、糖浆等；用于肠胃外给药时，可将其制成注射用的溶 液、水货油性悬浮剂等。 本专利技术药物组合物的各种剂型可以按照药学领域的常规生产方法制备。例如使活 性成分与一种或多种载体混合，然后将其制成所需的剂型。具体实施例方式实施例1 :蔓生白薇苷C的制备 白薇干燥根10kg粉碎后，以10倍量90%乙醇回流3次，每次2小时，合并提取液，减压回收溶剂，得乙醇提取物，该提取物上大孔树脂HP-20柱，分别用蒸馏水和30% EtOH 洗脱至洗脱液无色，再用90% EtOH洗脱至硫酸乙醇皂苷显色阴性为止，回收90% EtOH洗 脱液至干，得90% EtOH洗脱部分。将90% EtOH洗脱部分进行硅胶柱层析，以氯仿_甲醇 (1 : 1 1 : 10v/v)进行梯度洗脱，用薄层层析检查层析流分，具有相同单一斑点的流分 合并，浓縮，分得流分1、2、3、4、5，将其中的第3和第4部分再分别进行正相硅胶柱层析，以 不同比例的氯仿-甲醇进行洗脱，第3流分得A I-VII流分、第4流分得B I-V流分，将其 中的B IV流分经反复的RP-C18层析(MeOH:H20)分离、纯化，得到蔓生白薇苷C 146mg。制 得的蔓生白薇苷C用于实施例2-5。 蔓生白薇苷C(cynanversicoside C)，白色无定形粉末，mpl24-128。C， d28 :+49. 8。(c = 0. 562， MeOH)，分子式C28H4。014。经光谱数据分析和理化性状测定与文献报道(Qiu Sheng-Xiang， et al. Phytochemistry， 1989， 28 (11) ， 3175-3178)的蔓生白薇苷C完全一致。 实施例2 :蔓生白薇苷C与Falcipain-2蛋白酶结合活性测定 Falcipain-2蛋白酶与紫草酸丁酯结合活性的筛选和动力学常数的测定基于 SPR(表面等离子共振)原理，使用的仪器是Biacore 3000(Biacore AB， Uppsala， Sweden)。 (1)Falcipain-2质粒(pQE30-Fa12)的构建 根据Fal本文档来自技高网...

【技术保护点】
蔓生白薇苷Ｃ在制备治疗疟疾药物中的应用，其特征在于蔓生白薇苷Ｃ的结构式如下：　　　　＊＊＊。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：单磊，黄瑾，张卫东，李洪林，苏娟，卢伟强，张寿德，陈瞳，
申请(专利权)人：中国人民解放军第二军医大学，华东理工大学，
类型：发明
国别省市：31[]