【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于害虫防治，具体涉及沉默dccp8基因在防治柑橘木虱中的应用。
技术介绍
1、柑橘黄龙病(huanglongbing，hlb)是世界柑橘产业中最具有毁灭性的病害之一。由于目前对黄龙病感病树体尚无有效的治疗方法，所以黄龙病又称为柑橘的“癌症”。至今黄龙病病菌仍不能进行人工培养，却能在柑橘木虱体内长期生长繁殖，柑橘木虱一旦被黄龙病菌侵染就能够终身携带并迅速传播，这给研究黄龙病及其防控带来了巨大的困难，是近年来困扰柑橘产业的最大难题。当前国际柑橘产业对于黄龙病的控制主要局限于通过化学杀虫剂控制柑橘木虱的发生，然而化学杀虫剂的频繁使用造成了农药残留、环境污染、生物多样性被破坏和害虫的抗药性等诸多问题。因此十分有必要研究快速和长效的控制黄龙病的新方法。
2、rna干扰(rnainterference，rnai)已经广泛应用于昆虫基因功能的研究，随着研究的深入，基于rnai的策略在害虫防治领域也展示出巨大的潜力。目前，现有技术中通过rna干扰技术实现柑橘木虱防治的相关报道较少，即便有相关报道，其防治效果相对较差。
技术实现思路
1、针对现有技术中的缺陷，本专利技术的目的是提供dccp8蛋白表达抑制剂或沉默dccp8基因的制剂在防治柑橘木虱中的应用。通过沉默dccp8基因的制剂可以在柑橘木虱发育为成虫之前，对其发育进行调控，进而达到对柑橘木虱进行防治的目的。
2、本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的：
3、本专利技术提供了dccp8蛋白表达抑制
4、本专利技术提供了dccp8蛋白表达抑制剂或沉默dccp8基因的制剂在调节柑橘木虱发育中的应用。
5、优选的，所述dccp8蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示。
6、优选的，所述dccp8基因的核苷酸序列如seq id no.2所示。
7、优选的，所述调节柑橘木虱发育包括以下(1)～(4)中的任一种或两种以上：
8、(1)干扰柑橘木虱表皮蛋白的合成；
9、(2)干扰柑橘木虱蜕皮；
10、(3)提高柑橘木虱畸形率；
11、(4)提高柑橘木虱死亡率。
12、优选的，沉默dccp8基因的制剂包括柑橘木虱dccp8基因的dsrna。
13、优选的，dsrna的核苷酸序列如seq id no.9所示。
14、本专利技术提供了一种柑橘木虱dccp8基因的dsrna的合成方法，包括以下步骤：
15、以含有dccp8基因质粒为模板，用含t7启动子的rnai引物进行扩增，扩增产物胶回收，得到胶回收产物；
16、以胶回收产物为模板合成得到柑橘木虱dccp8基因的dsrna；
17、含t7启动子的引物包括上游引物rnai-f和下游引物rnai-r；所述rnai-f的核苷酸序列如seq id no.3所示；所述rnai-r的核苷酸序列如seq id no.4所示。
18、本专利技术提供了一种防治柑橘木虱的方法，包括：将dccp8基因的dsrna注射至柑橘木虱，干扰靶基因dccp8的表达。
19、优选的，所述柑橘木虱包括五龄若虫；所述注射包括显微注射。
20、本专利技术的有益效果：
21、本专利技术提供了dccp8蛋白表达抑制剂或沉默dccp8基因的制剂在防治柑橘木虱中的应用。本专利技术首次以柑橘木虱为研究对象，鉴定筛选表皮蛋白cp8基因，进一步通过设计特异性引物合成dsrna，借助rna干扰dccp8基因的表达，发现沉默dccp8基因，能够干扰柑橘木虱表皮蛋白的正常合成，影响柑橘木虱正常蜕皮，提高畸形率，死亡率，从而影响柑橘木虱的生命活性，达到防控柑橘木虱的效果。本专利技术dccp8基因将进一步为开展基于rnai的柑橘木虱防治技术手段提供新的分子靶标和理论依据。
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1.DcCP8蛋白表达抑制剂或沉默DcCP8基因的制剂在防治柑橘木虱中的应用。
2.DcCP8蛋白表达抑制剂或沉默DcCP8基因的制剂在调节柑橘木虱发育中的应用。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述DcCP8蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示。
4.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述DcCP8基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示。
5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述调节柑橘木虱发育包括以下(1)～(4)中的任一种或两种以上：
6.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，沉默DcCP8基因的制剂包括柑橘木虱DcCP8基因的dsRNA。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，dsRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示。
8.一种柑橘木虱DcCP8基因的dsRNA的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：
9.一种防治柑橘木虱的方法，其特征在于，包括：将DcCP8基因的dsRNA注射至柑橘木虱，干扰靶基因DcCP8的表达。>
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述柑橘木虱包括五龄若虫；所述注射包括显微注射。
...【技术特征摘要】
1.dccp8蛋白表达抑制剂或沉默dccp8基因的制剂在防治柑橘木虱中的应用。
2.dccp8蛋白表达抑制剂或沉默dccp8基因的制剂在调节柑橘木虱发育中的应用。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述dccp8蛋白的氨基酸序列如seq idno.1所示。
4.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述dccp8基因的核苷酸序列如seq idno.2所示。
5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述调节柑橘木虱发育包括以下(1)～(4)中的任一种或两种以上：
6....
【专利技术属性】
技术研发人员：张灿，余海中，夏涛，钟鸿，何青，舒佳旺，卢占军，陈玮，刘小强，刘映雪，
申请(专利权)人：赣南师范大学，
类型：发明
国别省市：
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