【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物多肽，具体涉及一种甘蔗肽的制备方法和应用。
技术介绍
1、植物多肽指来源于植物的肽类物质，包括以植物为原料经水解和分离纯化等过程制备的肽，以及天然存在于植物中的肽类。许多作物中富含丰富的蛋白质、肽和氨基酸，如大豆中含有丰富的蛋白质、氨基酸和多肽，目前市面上的大豆肽是大豆蛋白质经大豆蛋白酶解制得，大豆肽与大豆蛋白相比，具有消化吸收率高、提供能量迅速、降低胆固醇、降血压和促进脂肪代谢的生理功能以及无豆腥味、无蛋白变性、酸性不沉淀、加热不凝固、易溶于水、流动性好等良好的加工性能，植物肽相比于植物蛋白具有其特殊的生物学作用，而目前对植物肽的研究越来越多。
2、目前，植物多肽的制备方法主要包括化学法、酶法和微生物发酵法，酸或碱水解植物蛋白是常用的多肽化学制备方法，但是酸、碱水解具有腐蚀性，容易产生有毒物质，安全性差，目前食品领域越来越少用。酶法和微生物法制备植物多肽是比较安全的方法，但是酶法易产生苦味物质，还需要进行脱苦处理，因此，目前食品比较常用微生物发酵法制备植物多肽。甘蔗具体包括甘蔗叶、甘蔗汁、甘蔗茎杆等存在的肽类物质数量非常有限且含量少，目前尚未有甘蔗肽的研究和应用。现有技术中报道，利用甘蔗叶制备青贮饲料，向甘蔗叶添加微生物菌发酵后可大大提高甘蔗叶中的粗蛋白含量，利用微生物对甘蔗叶进行发酵有望提高甘蔗肽的含量。然而有些微生物菌本身可以发酵产生蛋白，因此提取得到的甘蔗肽中源于甘蔗本身含量极少，纯度不高。因此，如何在低蛋白的甘蔗叶中高含量提取甘蔗肽是本专利技术的研究的重点，其对于后续甘蔗肽的生理活动研究和
技术实现思路
1、本专利技术克服了甘蔗叶中蛋白质本身含量不高，提取得到的甘蔗肽含量低的技术问题，提供可一种甘蔗肽的制备方法和应用。
2、为解决上述问题，本专利技术采取如下技术方案：
3、一种甘蔗肽的提取方法，包括如下步骤：
4、s1预处理：将甘蔗叶干燥后粉碎备用；
5、s2发酵处理：将甘蔗叶秸秆降解真菌(doratomyces sp.)xw2020002z菌株活化培养得到孢子液；将孢子液按照1～2wt％的接种量接种至粉碎后的甘蔗叶中，于相对湿度为75％～85％、温度为25～28℃下发酵培养2～3d后，再按照3～5wt％的添加量添加nacl溶液，搅拌后继续发酵5～7d后灭菌；向灭菌后的发酵产物中添加水，搅拌后经超滤去除盐分获得固体物；所述甘蔗叶秸秆降解真菌(doratomyces sp.)xw2020002z菌株的保藏号为cgmcc no.22472；
6、s3酶解处理：向s2得到的固体物添加枯草芽孢杆菌蛋白酶酶解3～5h后，再添加胃蛋白酶和胰腺蛋白酶酶解12～24h；采用离心机离心分离，取其滤液；
7、s4提取纯化：将滤液通过纳滤膜后，将滤液进行真空喷雾干燥即得所述甘蔗肽。
8、进一步的，所述nacl溶液的摩尔浓度为5～6mol/l。
9、进一步的，所述孢子液的浓度不低于1x108cfu/ml。
10、进一步的，s1中，所述的甘蔗叶干燥后的水分含量为15～18％。
11、进一步的，s3中，所述枯草芽苞杆菌蛋白酶的添加量为甘蔗叶质量的2～5％；所述胰蛋白酶的添加量为甘蔗叶质量的0.5～1％；所述胃蛋白酶的添加量为甘蔗叶质量的0.5～1％。
12、进一步的，s4中，所述纳滤膜的孔径为0.5纳米。
13、进一步的，所述甘蔗肽作为益生元中的应用。
14、本专利技术所使用的甘蔗叶秸秆降解真菌(doratomyces sp.)xw2020002z菌株，于2021年6月8日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为cgmccno.22472。该菌株已于专利授权公布号cn 115747081 b中公开。
15、本专利技术与现有技术相比较具有以下有益效果：
16、(1)本专利技术将甘蔗叶干燥后粉碎，再向甘蔗渣中接种甘蔗叶秸秆降解真菌(doratomycessp.)xw2020002z菌株进行发酵，本专利技术使用的菌株具有生产羧甲基纤维素酶的优点，对甘蔗叶秸秆的降解20天后，甘蔗叶秸秆失重率达50％以上，对甘蔗叶具有较强的降解能力。专利技术人在前人的基础上利用甘蔗叶秸秆降解真菌(doratomyces sp.)xw2020002z菌株对甘蔗叶粉进行发酵研究发现，甘蔗叶在秸秆降解真菌(doratomycessp.)xw2020002z菌株长时间发酵下，蛋白质损失严重，因此本专利技术采用甘蔗叶秸秆降解真菌(doratomyces sp.)xw2020002z菌株进行发酵时，前期仅发酵2～3d，此时的高羧甲基纤维素酶活力较高，再向甘蔗叶中添加较高浓度的nacl溶液，一方面，较高浓度的nacl溶液能减缓甘蔗叶秸秆降解真菌(doratomyces sp.)xw2020002z菌株发酵，避免其过多的利用甘蔗叶中的氮源，同时较高浓度的nacl溶液，能使甘蔗叶含水的情况下，能够增加蛋白质表面电荷，甘蔗叶中的蛋白质与水分子的相互作用增强，促进蛋白质从甘蔗叶粉中解出，大大提高甘蔗肽的提取率。本专利技术在酶解方法上，先采用枯草芽孢杆菌蛋白酶酶解，枯草芽孢杆菌蛋白酶能先将蛋白质酶解成小分子多肽，再经胃蛋白酶和胰腺蛋白酶酶解，可进一步将小分子多肽酶解，获得的甘蔗肽经过试验发现，其对双歧杆菌具有突出的增殖作用，可以作为肠道益生元肽使用。
17、(2)本专利技术的甘蔗肽提取方法，相比于采用饲料常用的微生物菌(植物乳杆菌和枯草芽孢杆菌)发酵后提取得到的甘蔗肽的提取率低，但是提取得到的甘蔗肽用于双歧杆菌增殖实验发现，本专利技术提取得到的甘蔗肽对双歧杆菌具有明显的增殖作用，有望在肠道中作为益生元肽使用，而采用微生物菌(植物乳杆菌和枯草芽孢杆菌)发酵后提取得到的甘蔗肽在肠道中并没有表现出明显的双歧杆菌增殖作用，其在双歧杆菌增殖实验中的作用与普通的大豆多肽(江苏俊启生物科技股份有限公司生产，型号：jxy-ddz-iz)对双歧杆菌的作用无异。说明本专利技术提取得到的甘蔗肽具有突出的生理活性，对双歧杆菌具有增殖作用，可以作为益生元应用于饲料添加剂或者肠道调节剂中，可以广泛应用于畜禽养殖中。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种甘蔗肽的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种甘蔗肽的提取方法，其特征在于，所述NaCl溶液的摩尔浓度为5～6mol/L。
3.根据权利要求1所述的一种甘蔗肽的提取方法，其特征在于，所述孢子液的浓度不低于1X108cfu/ml。
4.根据权利要求1所述的一种甘蔗肽的提取方法，其特征在于，S1中，所述的甘蔗叶干燥后的水分含量为15～18％。
5.根据权利要求1所述的一种甘蔗肽的提取方法，其特征在于，S3中，所述枯草芽苞杆菌蛋白酶的添加量为甘蔗叶质量的2～5％；所述胰蛋白酶的添加量为甘蔗叶质量的0.5～1％；所述胃蛋白酶的添加量为甘蔗叶质量的0.5～1％。
6.根据权利要求1所述的一种甘蔗肽的提取方法，其特征在于，S4中，所述纳滤膜的孔径为0.5纳米。
7.根据权利要求1所述的一种甘蔗肽的提取方法，其特征在于，所述甘蔗肽作为益生元中的应用。
【技术特征摘要】
1.一种甘蔗肽的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种甘蔗肽的提取方法，其特征在于，所述nacl溶液的摩尔浓度为5～6mol/l。
3.根据权利要求1所述的一种甘蔗肽的提取方法，其特征在于，所述孢子液的浓度不低于1x108cfu/ml。
4.根据权利要求1所述的一种甘蔗肽的提取方法，其特征在于，s1中，所述的甘蔗叶干燥后的水分含量为15～18％。
5...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘菁，阳太亿，熊发前，赖振光，刘俊仙，丘立杭，段维兴，张革民，张保青，吴凯朝，闫海锋，高轶静，杨翠芳，黄玉新，周珊，陆衫羽，吴延勇，
申请(专利权)人：广西壮族自治区农业科学院，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。