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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物,具体为一种水产苗种贝莱斯芽孢杆菌及其筛选方法和应用。
技术介绍
1、随着人们对水产养殖的需求不断扩大,促就了集约、高密度的工厂化水产养殖模式。其中,常见的疾病包括细菌性疾病,细菌性疾病的病原菌如嗜水气单胞菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、迟缓爱德华氏菌等,这些病原菌不仅危害水产动物本身,导致水产动物死亡,降低水产动物的产量,同时还会给水体带来污染,影响周边环境。
2、目前,国内工厂化水产养殖中细菌性疾病的处理方式主要是使用抗生素和消毒剂,但滥用抗生素容易造成细菌性病原菌产生耐药性,污染水质,增加水生动物疾病防控的难度;另外,抗生素和消毒剂的使用也容易在水产动物体内及环境中残留。因此,寻找替代使用抗生素药物以促进水产养殖健康发展迫在眉睫。
3、国内外目前有三种绿色健康的养殖模式:中草药养殖,疫苗等免疫预防和微生态养殖模式。其中,微生态养殖模式是一种利用益生菌进行养殖的方式,益生菌具有健康、安全、无污染、效果显著等优点,在水产养殖中作为替代抗生素使用的方案备受关注。益生菌种类很多,主要可分为乳酸菌类,酵母菌类,芽孢杆菌类,光合细菌类和其他类。其中,芽孢杆菌是一类菌体呈杆状、鞭毛典型侧生、多半运动、形成耐热内生孢子,利用多种底物进行严格呼吸代谢、严格发酵代谢或呼吸和发酵兼具代谢的革兰氏阳性细菌。芽孢杆菌具有广谱抗菌效果,能促进水产养殖对象的生长,提高免疫功能,维持与优化肠道菌群平衡等方面具有较为显著的益生效果,而且并对养殖环境也具有良好的维护和改善作用。但贝莱斯芽孢杆菌(bacillus ve
技术实现思路
1、本专利技术意在提供一种水产苗种贝莱斯芽孢杆菌及其筛选方法和应用,从健康草鱼肠道分离出一种水产苗种贝莱斯芽孢杆菌,经试验证明该菌株有广谱拮抗水产常见病原菌的功能,能有效抑制嗜水气单胞菌和金黄色葡萄球菌等病原菌的生长,对实验中的病原菌拮抗效果明显,在水产养殖中的可降低化学药物使用量和残留量。
2、为了实现上述目的,本专利技术提供如下技术方案:
3、一种水产苗种贝莱斯芽孢杆菌,所述贝莱斯芽孢杆菌的保藏编号为cgmccno.28417,其保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏日期为2023年09月11日。
4、上述的一种水产苗种贝莱斯芽孢杆菌的筛选方法,包括以下步骤:
5、s1、随机选取饲养的水产鱼,在无菌条件下剖取鱼肠道,前中后各一段,分装离心管,加无菌水,振荡,匀浆,将其水浴加热,再离心;
6、s2、去除沉淀,取其上清液,涂布至lb培养基,在培养箱内进行厌氧培养;
7、s3、在有细菌生长的lb培养基中,挑取单菌落用接种环在新的lb培养基中划线纯化,最后放入培养箱培养,得到所需贝莱斯芽孢杆菌。
8、进一步地,在s1中,选择的水产鱼为体重在25~35g的草鱼。
9、进一步地,在s1中,水浴加热的条件为:水浴锅中60℃水浴15~20min;离心的条件为:在3000rpm条件下离心3~5min。
10、进一步地,在s2中,厌氧培养的时间为1~2天。
11、进一步地,在s2和s3中,培养箱的温度为28℃。
12、上述的一种水产苗种贝莱斯芽孢杆菌在水产养殖中对细菌性疾病病原菌防控的应用。
13、进一步地,所述贝莱斯芽孢杆菌通过抑制嗜水气单胞菌和金黄色葡萄球菌的生长实现对病原菌拮抗效果。
14、技术方案的有益效果是:
15、本专利技术筛选出来的贝莱斯芽孢杆菌菌株有广谱拮抗水产常见病原菌的功能,能有效抑制嗜水气单胞菌和金黄色葡萄球菌等病原菌的生长,对病原菌拮抗效果明显,在水产养殖中的可降低化学药物使用量和残留量,促进绿色水产养殖;
16、本专利技术提供的筛选方法选取水产鱼的肠道进行筛选,可以获得具有较高酶活性的贝莱斯芽孢杆菌;通过水浴加热、离心等步骤,可以去除杂菌和杂质,提高菌株的纯度;采用厌氧培养的方法,可以更好地模拟肠道环境,促进贝莱斯芽孢杆菌的生长和繁殖;该方法操作简单、成本低、效果好,适用于大规模的菌株筛选和生产应用。
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1.一种水产苗种贝莱斯芽孢杆菌,其特征在于,所述贝莱斯芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC28417。
2.根据权利要求1所述的一种水产苗种贝莱斯芽孢杆菌的筛选方法,其特征在于,包括以下步骤:
3.根据权利要求2所述的一种水产苗种贝莱斯芽孢杆菌的筛选方法,其特征在于,在S1中,选择的水产鱼为体重在25~35g的草鱼。
4.根据权利要求2所述的一种水产苗种贝莱斯芽孢杆菌的筛选方法,其特征在于,在S1中,水浴加热的条件为:水浴锅中60℃水浴15~20min;离心的条件为:在3000rpm条件下离心3~5min。
5.根据权利要求2所述的一种水产苗种贝莱斯芽孢杆菌的筛选方法,其特征在于,在S2中,厌氧培养的时间为1~2天。
6.根据权利要求2所述的一种水产苗种贝莱斯芽孢杆菌的筛选方法,其特征在于,在S2和S3中,培养箱的温度为28℃。
7.根据权利要求1所述的一种水产苗种贝莱斯芽孢杆菌在水产养殖中对细菌性疾病病原菌防控的应用。
8.根据权利要求7所述的一种水产苗种贝莱斯芽孢杆菌在水产养殖中对细菌性疾病病原菌防
...【技术特征摘要】
1.一种水产苗种贝莱斯芽孢杆菌,其特征在于,所述贝莱斯芽孢杆菌的保藏编号为cgmcc28417。
2.根据权利要求1所述的一种水产苗种贝莱斯芽孢杆菌的筛选方法,其特征在于,包括以下步骤:
3.根据权利要求2所述的一种水产苗种贝莱斯芽孢杆菌的筛选方法,其特征在于,在s1中,选择的水产鱼为体重在25~35g的草鱼。
4.根据权利要求2所述的一种水产苗种贝莱斯芽孢杆菌的筛选方法,其特征在于,在s1中,水浴加热的条件为:水浴锅中60℃水浴15~20min;离心的条件为:在3000rpm条件下离心3~5min。
...【专利技术属性】
技术研发人员:秦真东,刘沥涵,洪宇聪,孙凯辉,林蠡,王晓珊,赵书燕,李佳莹,洪宇建,
申请(专利权)人:广东越群海洋生物科技股份有限公司,
类型:发明
国别省市:
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